新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立

目的建立检测新布尼亚病毒IgG抗体的间接免疫荧光（IFA）方法。方法用分离到的5株新布尼亚病毒株感染非洲绿猴肾（Vero）细胞，制备抗原片，优化IFA工作条件，进行IFA法的特异度和敏感度评价，应用建立的IFA方法对2007—2011年在河南省信阳地区采集的126例发热伴血小板减少综合征患者急性期和恢复期双份血清标本进行检测，并与RT—PCR方法的检测结果进行比较。结果筛选出免疫荧光反应特异、稳定性较好的WZ69毒株作为建立新布尼亚病毒IFA检测方法的抗原种子株。IFA方法的最佳工作条件：一抗（患者血清）最适稀释度为1：40；二抗（异硫氰酸荧光素标记的羊抗人IgG抗体）最适稀释度为1：150；二抗中伊文思蓝最适稀释度为1：20000。在126例患者中，新布尼亚病毒IgG抗体阳性者96例，阴性者30例，抗体阳性率为76．19％，与RT—PCR的检测阳性率[72．22％（91／126）]差异无统计学意义（P〉0．05）。结论建立的新布尼亚病毒IgG抗体IFA检测方法敏感性高，特异性强，操作简单，可用于新布尼亚病毒致发热伴血小板减少综合征患者的实验室检测。

新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立与应用

新布尼亚病毒是一种全新的病毒，基因组由L、M、S3个单负链RNA片段组成，现归属于布尼亚病毒科白蛉病毒属第三组病毒，与白蛉病毒属的乌库尼米病毒有最高的同源性（核酸的同源性38．83％，氨基酸的同源性28．57％）。新布尼亚病毒被证实是发热伴血小板减少综合征（fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS）的重要病原，该病毒感染所致疾病有较高的病死率。在我国湖北、安徽、河南、山东、

某部新入伍人员水痘-带状疱疹病毒抗体血清学分析

目的了解某部新入伍人员的水痘免疫状况及抗体阳性率,为军队人员疫苗防控政策提供流行病学数据。方法采用整群抽样法对903名新入伍人员基本信息进行收集并分析,采集静脉血进行血清分离,采用水痘-带状疱疹病毒(VZV)IgG抗体ELISA试剂盒进行检测。结果903名入选的新入伍人员中,有198名曾经患过水痘,20名患过带状疱疹。903份血清标本中,共检出VZV IgG抗体阳性标本617份,阳性率为68.33%。结论新入伍人员VZV IgG抗体阳性率较低,提示加强水痘疫苗接种,对军队中水痘防控具有重要意义。

新型布尼亚病毒抗体检测方法的建立及初步应用

目的:建立新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法。方法:用基因工程重组表达的新型布尼亚病毒NP抗原包被酶联板,建立间接ELISA法检测新型布尼亚病毒IgG抗体,并进行特异性和灵敏度评价,健康人群中检测结果计算临界值(均值+3标准差)。检测70例发热伴血小板减少综合征患者恢复血清和69份健康人血清样品。结果:在70份患者血清样品中,检测出新型布尼亚病毒IgG抗体阳性51例,阳性率为72.14%(51/70);69份健康人血清样品中,检测出1份阳性,特异性为98.6%(1/69)。结论:建立的新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法特异性强、灵敏度高,可用于新型布尼亚病毒感染的检测及流行病学调查。

新冠病毒感染患者恢复期血浆抗体效价的相关因素分析

目的研究新冠病毒感染康复者恢复期血浆IgG、IgM、中和抗体效价与性别、年龄、采集间隔等因素的关系,从而指导新冠病毒感染康复者血浆采集。方法采集新冠恢复期患者血浆,测定抗体效价,采用SPSS统计学分析软件,分析各组数据差异性及相关性。结果不同性别与3种抗体效价(男性IgG、IgM、中和抗体效价中位数分别为484.24 AU/mL、2.13 AU/mL、1124.74 AU/mL;女性IgG、IgM、中和抗体效价中位数分别为516.04 AU/mL、1.73 AU/mL、1143.99 AU/mL)组间比较无差异(P>0.05),年龄与IgG、中和抗体有弱的正相关,Spearman相关系数为0.188(P<0.05);30名重复捐献者,首次捐献IgG、IgM、中和抗体效价中位数分别为522.3 AU/mL、2.64 AU/mL、1174.6 AU/mL,再次捐献3种抗体效价中位数为332.08 AU/mL、0.63 AU/mL、708.96AU/mL,前后浓度水平比较有差异(P<0.05)。结论不同年龄、性别的新冠病毒感染康复者恢复期血浆IgG、IgM、中和抗体效价水平无差异,其效价水平均可达到临床治疗指南要求。重复捐献者抗体水平虽有所下降,但仍具有临床价值。

新型冠状病毒特异性抗体IgM、IgG的临床意义

目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2,简称新冠病毒)特异性抗体IgM、IgG对新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称新冠肺炎)的诊断价值。方法1)收集2020年3月上旬在本院发热门诊就诊的全部145名患者的新冠病毒IgM、IgG抗体(胶体金法)和核酸(荧光定量PCR法)检测结果(发热组),做配对卡方检验;2)收集3月5日当天做新冠病毒IgM、IgG抗体检测的612名新冠肺炎确诊患者(来自本院2月~3月作为新冠肺炎定点治疗医院收治的1500名新冠肺炎患者)的新冠病毒IgM、IgG抗体检测结果(新冠肺炎组),并跟踪随访患者出院后30、60 d的新冠病毒IgM、IgG抗体和核酸检测结果;通过对各组(间)的统计分析,明确抗体检测阳性率及抗体变化趋势等。结果1)发热组:新冠病毒抗体IgM阳性、IgG阳性及IgM合并IgG双阳性的比例分别为26.21%(38/145)、54.48%(79/145)及26.21%(38/145)(P<0.01);核酸检测阳性率4.14%(6/145)低于抗体阳性率(P<0.01);IgM和IgG均为阴性而核酸检测阳性的比例为0.69%(1/145)。2)新冠肺炎组:以2~98 d为观察时段,抗体阳性率由5%(1/20)逐渐增至97.8%(87/89);>56 d阳性率平缓下降。2~14 d的IgM阳性率5%(1/20)、IgG阳性率65%(13/20),≥14~56 d IgM阳性率47.68%(277/581)、IgG阳性率94.15%(547/581),≥56 d IgM、IgG阳性率均下降。所有患者住院期间IgM抗体阳性率45.8%(280/612),IgG抗体阳性率93.1%(570/612)。出院后(其中15名患者因转入他院治疗无后期复查数据)1和2个月的新冠病毒核酸检测均为阴性,出院后2个月IgG阳性率≥80%(487/597)、IgM阳性率≥40%(240/597)。结论胶体金法能很好地检测新冠病毒IgM、IgG抗体,阳性率高于核酸检测,其中IgG抗体产生早,阳性率高,持续时间长;联合应用胶体金抗体检测与核酸检测方法有助于提高新冠肺炎确诊和疑似病例的排除诊断。

新冠病毒抗体阳性结果分布特征分析

目的分析新冠病毒IgG和IgM抗体阳性分布特征。方法选择2022年12月-2023年2月在常州市第三人民医院就诊患者667例,用化学发光法检测血浆中新冠IgG和IgM抗体,分析不同检测时间阳性标本数、性别分布、IgG和IgM阳性分布特征。结果2022年12月-2023年2月检测新冠病毒抗体阳性率分别为49.5%、90.9%、90.3%,总体阳性率为84.7%;男性阳性率54.9%,女性阳性率45.1%;IgG单阳性率89.6%,IgM单阳性率0.5%,IgG和IgM双阳性率9.9%;<18岁、19-40岁、41-60岁、>60岁年龄组IgG单阳性率分别为89.5%、81.7%、82.8%、57.6%;IgM单阳性率为0.0%、0.0%、0.7%、0.5%;双阳性率为4.5%、5.3%、4.6%、16.3%。结论2022年12月-2023年2月抗体阳性率呈上升趋势,不同性别之间阳性率无统计学差异,IgG阳性率高于IgM阳性率,IgG单阳性率高于双抗体阳性率,IgG单阳性率最高在<18岁组,双阳性率最高在>60岁组。

利用荧光免疫层析技术检测新冠病毒IgG抗体

目的建立新冠病毒IgG抗体的快速检测方法。方法制备并纯化重组新冠病毒N蛋白,将获得的重组N蛋白免疫家兔,获得多克隆抗体。将鼠抗人IgG单克隆抗体和兔抗新冠病毒N蛋白多克隆抗体分别喷于硝酸纤维素膜的检测线和控制线,用重组N蛋白标记荧光纳米颗粒作为标记抗原,建立荧光免疫层析方法。结果重组新冠病毒N蛋白经表达纯化后,纯度达到90%以上。用新冠病毒IgG抗体标准品测得建立的荧光层析方法灵敏度为1∶5 000;与甲型流感病毒(H1N1、H3N2、H5N1、H7N9)、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒IgG抗体无交叉反应;批内、批间变异系数均低于10%。结论建立的新冠病毒IgG抗体检测方法具有较好的灵敏性和特异性,可用于新冠病毒抗体的快速筛查。

舟山海岛地区发热伴血小板减少综合征病毒流行情况及感染者IgG抗体持续时间分析

目的分析舟山海岛地区人群发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)隐性感染状况及既往感染者SFTSV-IgG抗体持续时间。方法收集2019年8月浙江省舟山市健康人群1122名进行横断面研究,其中来自非流行区641名,流行区481名,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测健康人群血清SFTSV-IgG抗体,并与2013年舟山市流行区和非流行区人群SFTSV-IgG抗体阳性率进行比较。同时选择2011年7月至2018年6月确诊的SFTS患者19例,采用间接ELISA法检测SFTSV-IgG抗体滴度。采用SPSS软件对数据进行分析。结果2019年流行区人群SFTSV-IgG抗体阳性率为1.5%(7/481),高于非流行区(0/641),差异具有统计学意义(χ^2=7.187,P<0.01);且SFTSV-IgG抗体阳性率均低于2013年流行区(11.7%)和非流行区(2.5%),差异亦具有统计学意义(χ^2=22.556和10.352,P<0.01)。既往确诊患者中18例血清SFTSV-IgG抗体仍为阳性,最长者可达8年。结论舟山海岛地区存在SFTSV隐性感染,SFTSV感染后患者体内SFTSV-IgG抗体可长期存在,具有一定保护力。

发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒实验室检测技术研究进展

近年来,湖北、河南、江苏、山东、辽宁及浙江等地相继发生发热伴血小板减少综合征病例,其病原体经中国疾病预防控制中心证实,为一种属于布尼亚科白蛉病毒属的新病毒,该病毒被命名为发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒（SFTSV）,简称新布尼亚病毒[1-2]。SFTSV属于布尼亚病毒科白蛉病毒属第3组病毒,其基因是由大（L）、中（M）、小（S）3个单股负链RNA片段组成。目前实验室主要应用病毒分离、核酸检测、抗原检测和抗体检测等技术对SFTSV进行检测。现将这些检测技术方法作一简要综述。

COVID-19确诊病例及灭活疫苗接种者不同时期血清IgA、IgM、IgG抗体检测结果比较

目的研究不同时期新型冠状病毒感染(COVID-19)病例及接种2019-nCoV灭活疫苗人群的抗体免疫应答规律及特点。方法于2020年1月—2021年10月采集河南省43例COVID-19确诊病例的86份血清标本,46名灭活疫苗接种者的184份血清标本,50名未感染健康人的50份血清标本,采用磁微粒化学发光法和酶联免疫吸附法对320份血清标本检测并分析其抗体水平。结果确诊病例恢复期IgA、IgM、IgG抗体阳性率高于急性期(P值均<0.05);恢复期的IgM、IgG抗体水平高于急性期(P值均<0.05)。灭活疫苗接种后31周,IgG和IgA抗体阳性率分别维持在63.04%(29/46)和36.96%(17/46),IgM抗体全部转阴;疫苗接种者第4、8、12、31周IgA抗体吸光度值差异无统计学意义(F=2.365,P=0.073),IgM、IgG抗体水平差异均有统计学意义(P<0.05)。同时期确诊病例的IgA、IgM抗体阳性率高于疫苗接种者,IgM、IgG抗体水平高于疫苗接种者(P值均<0.05)。结论IgG抗体在新型冠状病毒感染早期和恢复期阳性率最高。IgA、IgG抗体出现时间较IgM早,在疫苗接种者体内持续时间超过31周。同时期确诊病例的IgM、IgG抗体水平高于疫苗接种者。