新扶正除疫颗粒剂的成型性工艺

目的正交实验法优选新扶正除疫颗粒剂的成型性工艺条件。方法以辅料成型性、流动性、水分、吸湿性为考察指标,综合评分法筛选出颗粒剂的最优辅料,正交试验法优化辅料加入量、乙醇体积分数及用量的工艺参数。结果最佳成型工艺条件为以糊精为辅料,浸膏粉与糊精配比为3∶2,乙醇的体积分数为85%,乙醇用量(g/mL)为1∶0.4,干燥温度60℃,干燥时间3 h。为减少水分对药物性质及稳定性的影响,环境湿度控制在73%以下。结论该工艺符合《中国药典》2010年版要求,而且合理方便,简单可行,适合工业化生产。

RP-HPLC法测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷的含量

目的:建立测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为GRACE Alltima TMC 18,流动相为甲醇-水(15∶85,V/V,红景天苷)、乙腈-水(23∶77,V/V,虎杖苷),流速为1.0 m L/min,检测波长为275 nm(红景天苷)、306 nm(虎杖苷),柱温为25℃,进样量为10μL。结果:红景天苷和虎杖苷检测进样量线性范围分别为0.99~10.89μg(r=0.999 8)、0.046~1.196μg(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为96.31%~99.44%(RSD=1.20%,n=6)、95.96%~99.73%(RSD=1.42%,n=6)。结论:该方法操作简单方便、结果准确可靠,适用于测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷的含量。

新扶正除疫颗粒对感染流感病毒小鼠抗病毒作用机制的研究

目的:研究新扶正除疫颗粒对感染流感病毒小鼠的抗病毒作用机制。方法:选择雌性BALB/c小鼠40只,并分成正常对照组(未攻毒)、病毒模型组、达菲对照组、新扶正除疫组,各10只,其中正常对照组、病毒模型组采用无菌生理盐水灌胃,达菲对照组采用达菲水溶液灌胃,新扶正除疫组采用新扶正除疫颗粒水溶液灌胃,持续给药7 d;同时病毒模型组、达菲对照组、新扶正除疫组于给药第3天开展FM1-6-E2滴鼻造模;四组于造模后的第3、6、9天制备脾脏细胞悬液,应用流式细胞仪对T细胞亚群进行检测、对比分析。结果:造模第3天病毒模型组小鼠的CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+水平高于正常对照组,CD_8^+水平低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);达菲对照组、新扶正除疫组小鼠的CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+水平低于病毒模型组,CD_8^+水平高于病毒模型组,差异有统计学意义(P<0.05);造模第6天病毒模型组小鼠的CD_3^+、CD_8^+水平高于正常对照组,CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+水平低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);达菲对照组、新扶正除疫组小鼠的CD_3^+、CD_8^+水平低于病毒模型组,CD_4^+/CD_8^+水平高于病毒模型组,差异有统计学意义(P<0.05);造模第9d病毒模型组小鼠的CD_3^+、CD_8^+水平低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而达菲对照组、新扶正除疫组小鼠的CD_3^+、CD_8^+水平高于病毒模型组,CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+水平低于病毒模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新扶正除疫颗粒能对感染流感病毒小鼠的细胞免疫功能进行调节,说明新扶正除疫颗粒调节T细胞亚群是其抗流感病毒主要作用机制之一。

新扶正除疫颗粒抗柯萨奇病毒B3作用评价

目的评价新扶正除疫颗粒抗柯萨奇病毒B3(CVB3)感染的效果。方法将60只小鼠随机分为空白对照组、病毒模型组(A组)、新扶正除疫颗粒低、中、高剂量组(B、C、D组)、阳性药物对照组(E组)。给除空白对照组以外的每只小鼠腹腔注射50μL柯萨奇病毒液(10×TCID50)。每天观察小鼠的发病体征及死亡情况,计算生存率,检测病毒滴度,观察心肺组织病理变化。结果给药第3天时D组死亡率仅10%,第7天时仅为20%,显著低于A组、B组和C组,与E组基本相同。检测不同组心、肺中病毒滴度,发现D组显著低于A组、B组和C组(P<0.01)。在比较小鼠脏器组织病理观察方面,D组与E组对肺组织的影响结果相似,病理变化轻微,炎症反应明显弱于A组。结论新扶正除疫颗粒能降低柯萨奇病毒B3感染小鼠的死亡率和病毒滴度,对心肺组织有保护作用。

新扶正除疫颗粒剂组方药物扶正祛邪作用研究

新扶正除疫颗粒剂是由国医大师、全国名老中医、白求恩医学奖章者任继学教授集六十年临床经验提练出的效验方(扶正除疫汤)开发研制而成,用以防治时疫温病,并获得国家科技重大专项课题项目。对新扶正除疫颗粒剂的4种组成药物的中医扶正、祛邪作用及西医提高免疫力、抗病毒作用的研究进展进行归纳、整理与总结,将中医扶正与西医免疫增强作用、中医祛邪与西医抗病毒作用进行对比以挖掘、探讨中西医治疗方向的紧密联系,为新扶正除疫颗粒剂在防治时疫温病的中、西医不同理论层面发挥协同作用提供更多依据,也为使用其防治时疫温病探索新思路、提出新见解。

新扶正除疫颗粒对金葡球菌所致急性上呼吸道感染小鼠肺组织TNF-α、IL-6含量的影响研究

目的探究新扶正除疫颗粒在抗炎及免疫方面的作用机制。方法小鼠分为空白组、模型组、新扶正除疫颗粒的高中低剂量组、中药对照组和西药对照组,造模1h后灌药,并于造模后第1天、4天、7天取材,测定小鼠肺脏湿/干质量比值、肺指数和肺组织局部TNF-α、IL-6的含量变化。结果小鼠肺脏湿/干质量比值与肺指数显示低剂量组在4 d、7d明显高于高剂量组和空白组,其他组与空白组无明显差异。金黄色葡萄球菌感染后各药物治疗组各时间点IL-6、TNF-α含量与模型组相比均有不同程度的降低,且随着药物干预时间延长表现出逐渐下降的趋势。新扶正除疫颗粒高中低剂量组各时间点小鼠肺组织匀浆液IL-6、TNF-α含量逐渐下降,且高剂量组下降最明显,优于中西药组。结论新扶正除疫颗粒具有一定的抗炎和免疫调节作用,符合中医"扶正"与"祛邪"的治法。

新扶正除疫颗粒对感染肺炎链球菌小鼠肺组织TLR2、TLR4mRNA的影响

目的:检测新扶正除疫颗粒对肺炎链球菌所致小鼠急性上呼吸道感染模型肺组织中TLR2、TLR4mRNA变化的影响,探究新扶正除疫颗粒在抗炎及免疫方面的作用机制。方法:小鼠分为空白组、模型组、新扶正除疫颗粒的高中低剂量组、中药对照组和西药对照组,造模1h后灌药,并于造模后第1、4、7天取材,采用Real-time PCR方法测定小鼠肺组织中TLR2、TLR4 mRNA。结果:小鼠肺组织中TLR2在第1、4天各药物干预组与空白组和模型组比较,差异显著(P<0.05),第7天各组与模型组差异显著,但除低剂量组外均与空白组无显著性差异。肺组织中TLR4在第1、4天时,高、中剂量组、中药对照组及西药对照组与模型组有差异,但与空白组无显著差异。各组均存在随给药时间TLR2、TLR4 mRNA含量出现下降的趋势,新扶正除疫颗粒高、中剂量组优于低剂量组,与西药对照组无显著性差异。结论:提示新扶正除疫颗粒可以激活TLR2/TLR4系统,从而达到抗炎与免疫调节的作用,增强免疫与抗炎抑菌作用和中医"扶正"与"祛邪"的治法有关联性。

新扶正除疫颗粒对肺炎链球菌所致上呼吸道感染小鼠脾组织TLR2、TLR4 mRNA的影响

目的:以肺炎链球菌鼻腔滴入导致急性上呼吸道感染的小鼠为模型,采用Real-time PCR方法,检测脾脏组织中Toll样受体(TLR)2、TLR4 m RNA的变化,探讨新扶正除疫颗粒中药复方在抗炎及免疫调节方面作用机制。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组,模型组,复方高、中、低剂量组,中药对照组和西药对照组,造模1h后灌药,第1、4、7天为取材时间点,测定小鼠脾组织中脾脏指数及TLR2、TLR4 m RNA表达情况。结果:药物干预后各时间点脾脏指数均有不同程度下降。模型组脾脏TLR2、TLR4 m RNA表达水平相对空白组明显增强(P<0.05),且随感染时间的增加表达量逐渐增强。复方低、中、高剂量组表达水平逐渐下降,复方高剂量组表达水平随感染时间下降趋势最明显。结论:新扶正除疫颗粒可通过调节脾脏TLR2、TLR4 m RNA表达,调控机体抗感染免疫作用,对激活第一道天然免疫的屏障具有一定作用。

新扶正除疫颗粒HPLC指纹图谱的研究

目的:为控制新扶正除疫颗粒剂质量,采用高效液相色谱(HPLC)法对其建立指纹图谱。方法:采用Agilent 1100高效液相色谱仪,用GRACE AlltimaTM C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸水为流动相,二元系统梯度洗脱。检测波长275nm,流速:1.0m L/min,柱温:25℃。结果:新扶正除疫颗粒剂中选定的共有峰分离良好,且重现性RSD%均<3%。结论:新扶正除疫颗粒剂指纹图谱的建立方法通过实验结果证明是具有科学性和有效性的,并且该制剂指纹图谱为新扶正除疫颗粒及其它中药复方制剂质量标准的建立提供一定的理论依据。

新扶正除疫颗粒血清药物化学初步研究

目的:研究新扶正除疫颗粒的血清药物化学。方法:通过SD大鼠灌胃给予新扶正除疫颗粒后,采用高效液相色清-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定其含药血样色谱图,通过与空白样品的HPLC指纹图谱对比分析,探讨新扶正除疫颗粒的体内移行成分。结果:新扶正除疫血清HPLC色谱图中可检出14个移行成分,其中9个为原型成分入血,5个为代谢产物,通过对照品比对法(比较保留时间),确认了9个原型成分中4个成分分别为红景天苷、酪醇、虎杖苷、白藜芦醇。结论:含药血清的色谱峰明显多于空白样品,该方法为阐明新扶正除疫颗粒的药效物质基础提供科学依据。

新扶正除疫颗粒剂抗腺病毒作用研究

目的:探索新扶正除疫颗粒剂对腺病毒感染小鼠肺损伤的防治效果。方法:取100只雌性Balb/c小鼠随机分为5组:病毒模型组,利巴韦林组,新扶正除疫颗粒低、中、高剂量组(简称低、中、高剂量组),5组小鼠建立腺病毒感染模型,并观察给药前后小鼠的一般状态、药物死亡保护作用,制作病理切片进行形态学观察、计算肺组织病毒滴度,腹主动脉采血后制备血清,ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果:与病毒模型组比较,新扶正除疫颗粒各剂量组小鼠一般状态均有不同程度的改善,死亡率显著降低(P<0.05,P<0.01)。病毒模型组小鼠肺组织纤维化,肺泡壁和间质增厚,肺泡内充满炎性渗出物等病理变化明显,新扶正除疫颗粒剂各剂量组炎性渗出物减少,病理变化明显减轻。与病毒模型组比较,新扶正除疫颗粒高、中剂量组小鼠肺组织内病毒滴度显著降低(P<0.05,P<0.01),与利巴韦林组比较差异无统计学意义,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著下降(P<0.05,P<0.01),IL-10表达显著增加(P<0.01)。结论:新扶正除疫颗粒剂对腺病毒感染导致肺损伤的小鼠具有明显保护作用。

新扶正除疫颗粒剂体外抗腺病毒感染作用评价

目的:评价新扶正除疫颗粒剂体外抗腺病毒效果。方法:取A549细胞及人7型腺病毒(HAdV7),采用细胞病变法对新扶正除疫颗粒剂药物毒性及HAdV7病毒毒力进行检测。设置正常细胞对照组,病毒对照组,利巴韦林组,新扶正除疫颗粒剂0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL组。除正常细胞对照组外,其余8组建立HAdV7感染的细胞模型。确定每种药物半数致死浓度(LC_(50))和最大无毒浓度(TC_(0)),计算病毒的半数细胞感染量(TCID_(50)),观察药物的保护作用以及抑制病毒作用。结果:新扶正除疫颗粒剂TC_(0)为0.6mg/mL,LC_(50)为8mg/mL。HAdV7对A549的TCID_(50)数值为10~(-2.4)/mL。新扶正除疫颗粒剂浓度为0.1-0.3mg/mL时,细胞被病毒侵袭;当浓度达到0.4~0.5mg/mL,可在一定程度上保护细胞;当浓度升高至0.6mg/mL,对细胞的保护作用最明显。新扶正除疫颗粒剂抗病毒作用随药物浓度增高,对病毒抑制率也从(18.66±1.81)%升至(60.89±3.98)%,呈现出剂量依赖性。结论:新扶正除疫颗粒剂对细胞表现出抗腺病毒侵袭的保护作用。

新扶正除疫颗粒剂对感染腺病毒小鼠肺部炎性因子及 TLRs 信号途径的影响

目的探讨感染腺病毒小鼠使用新扶正除疫颗粒剂治疗后,肺内相关炎性因子及TLRs信号途径作用机制。方法雌性BALB/c小鼠120只,随机分为5组,新扶正除疫颗粒剂低、中、高剂量组(简称低、中、高剂量组)、腺病毒模型组、利巴韦林组。模型建立后,给药7天。最后1天摘得动物肺脏用荧光定量PCR法测白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达水平,Western blot、荧光定量PCR测定TLR9、MyD88和NF-κB蛋白与基因表达。结果比较模型组,低、中、高剂量组肺组织TNF-α基因表达显著下降(P<0.05,P<0.01),IL-10的基因表达显著增加(P<0.01),TLR9、MyD88和NF-κB观察指标蛋白与基因表达均下降(P<0.05,P<0.01),高剂量组下降最明显(P<0.01)。结论新扶正除疫颗粒剂保护被腺病毒侵袭的小鼠肺组织,可能的作用机制是调节TL R9、MyD88和NF-κB信号途径表达,以及调节TNF-α、IL-10的表达。