新生儿足跟血苯丙氨酸测定在新生儿苯丙酮尿症筛查的切值分析

目的分析研究新生儿足跟血苯丙氨酸测定在新生儿苯丙酮尿症筛查的切值。方法对于本地区出生72 h后经过充分的哺乳的新生儿足跟血滤纸标本进行采集,运用荧光法检验滤纸中干血斑的苯丙氨酸(Phe)浓度。通过SPSS 16.0软件行百分位数法筛查切值,并进行分析。结果本地区2017年1月~2017年12出生的10 344例新生儿的苯丙酮尿症筛查数据中苯丙酮尿症的切值为1.94 mg/dl。结论新生儿足跟血苯丙氨酸测定可以为本地区以后开展大规模的新生儿苯丙酮尿症筛查提供一定的依据。

浙江省1200万例新生儿先天性甲状腺功能减退症、高苯丙氨酸血症筛查结果分析

目的:了解浙江省新生儿先天性甲状腺功能减退症(CH)及高苯丙氨酸血症(HPA)的筛查及发病情况。方法:收集1999年9月至2022年12月浙江省新生儿疾病筛查中心11 922 318名新生儿血促甲状腺素(TSH)及苯丙氨酸(Phe)检测的资料。其中,血TSH浓度采用荧光法检测,血Phe浓度采用荧光法或串联质谱法检测。TSH在9μIU/mL及以上的新生儿为CH筛查阳性,血Phe浓度超过120μmol/L和(或)血Phe与酪氨酸(Tyr)比值大于2.0为HPA筛查阳性,召回复查。采用高通量测序和MassARRAY技术检测基因变异。结果:1999—2022年共筛查新生儿11 922 318名,总筛查率为89.41%,筛查率由1999年6.46%提升至2022年的100.00%。检出CH患儿8924例,患病率为1/1336,检出HPA患儿563例,患病率为1/21 176,其中508例为经典型苯丙酮尿症(cPKU),55例为四氢生物蝶呤缺乏症(BH4D)。97例CH患儿完善基因检测,检出9种CH相关基因,双氧化酶2(DUOX2)基因检出频率最高(69.0%),其中c. 3329G>A(p. R1110Q)(18.2%)和c.1588A>T(p.K530X)(17.3%)为热点突变。250例cPKU患者中检出81种苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因变异,其中c728G>A(p.R243Q)(24.4%)和c.721C>T(p.R241C)(15.0%)为热点突变,7种为新发变异:c.107C>A(p.S36*)、c.137G>T(p.G46V)、c.148A>G(p.K50E)、c.285C>T(p.I95I)、c.843-10del TTCC、exon4-7del和c.1066-2A>G。36例BH4D患者中检出12种6-丙酮酰四氢蝶呤合成酶(PTS)基因变异,热点突变为c.259C>T(p.P87S)(31.9%)。结论:浙江省新生儿筛查率逐年升高,CH发病率明显增高,HPA发病率与全国平均水平接近。DUOX2基因变异为CH患儿最常见基因变异,c728G>A(p.R243Q)为cPKU患者的热点突变,c.259C>T(p.P87S)为BH4D患者的热点突变。

新生儿高甲硫氨酸血症的筛查结果及MAT1A基因突变分析

目的分析新生儿高甲硫氨酸血症的筛查结果及MAT1A基因突变情况。方法选取2015年1月至2022年12月于枣庄市进行串联质谱遗传代谢病筛查的168694例新生儿作为研究对象,应用高通量测序技术结合Sanger测序法对筛查出的高甲硫氨酸血症新生儿相关致病基因进行检测,并对其核心家系成员进行基因分析。结果共检出3例高甲硫氨酸血症新生儿,发病率约为1/56231。3例高甲硫氨酸血症新生儿血浆甲硫氨酸浓度在筛查、治疗以及随访期间均较高,且均有MAT1A基因突变,其中2例为c.791G>A杂合突变,1例为c.163G>A和c.451C>A复合杂合突变;c.163G>A和c.451C>A突变为未见文献报道的突变。Sanger测序结果显示,高甲硫氨酸血症新生儿的突变均来自其父母。结论枣庄市新生儿高甲硫氨酸血症的发病率约为1/56231;基因检测检出MAT1A基因3种突变位点,包括c.791G>A、c.163G>A和c.451C>A突变。

研究串联质谱法检测苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr)在新生儿苯丙酮尿症诊断中的应用

探讨串联质谱法检测苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr)在新生儿苯丙酮尿症诊断中的应用效果。方法 选取2023年1月~2023年12月本院27765例实施苯丙酮尿症筛查新生儿,其中82例初筛阳性新生儿,并选取同期200例健康新生儿,通过干滤纸血片对200例健康新生儿Phe及Tyr浓度进行检测,确定检测指标的线性范围,并对82例疑似苯丙酮尿症患儿phe及Tyr浓度进行测定,检测平均回收率、变异系数,计算苯丙酮尿症阳性新生儿的phe及Tyr水平和Phe/Tyr比值,检测方法应用串联质谱法。结果Phe和Tyr的线性范围、回收率及CV如下:线性范围:Phe为(26.28~890.64)umol/L,Tyr为(38.94~263.58)umol/L。浓度平均回收率:Phe为98.2%,Tyr为97.1%。批内CV:phe为3.8%,Tyr为4.0%。批间CV:Phe为4.3%,Tyr为5.5%。经串联质谱法检测后,总计5例苯丙酮尿症阳性新生儿,其Phe水平为465.93~612.37umol/L,Tyr水平为78.65~152.38umol/L,Phe/Tyr为4.0~5.9(均>3.5)。结论 串联质谱法在新生儿苯丙酮尿症诊断中,通过该方法对Phe及Tyr浓度检测,线性范围较宽,且具有较高的浓度回收率,值得采纳。

高苯丙氨酸血症家系PAH和PTS基因突变研究

目的 检测湖北省地区26例中国人高苯丙氨酸血症家系基因突变,研究其基因型、表型和遗传学特征。方法 采集2018年3月至2020年12月在武汉儿童医院就诊的26例HPA患儿和父母静脉血样本,并收集其临床资料,提取DNA,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增PAH基因和PTS基因编码区及其侧翼序列,并以直接测序法对扩增产物正反测序进行突变分析。同时选取同时段来本院健康体检无明显异常儿童100名为正常对照组,处理方式与患儿相同。结果 患儿中检出PAH基因突变24种,其中c.728G>A(R243Q)最常见,等位基因突变率为15.2%(7/46)。发现一新PTS基因突变IVS3+9A>G。3例BH4缺乏型患儿中检出PTS基因P87S、D96N和A111T突变,其中P87S是最常见致病突变。在正常对照组中,未检出以上患儿中携带的突变,仅检出三种突变Q232Q(c.696A>G)、V245V(c.735G>A)和L385L(c.1155G>C),均为同义突变,不改变编码氨基酸,属于正常DNA多态。结论 PAH基因突变引起患儿PAH缺乏型HPA,而PTS基因突变引起严重型BH4缺乏症。基因检查的结果可为临床诊断和选择合适的治疗方案提供参考,并且可为进一步生育指导提供参考。

新生儿高苯丙氨酸血症筛查及PAH基因变异和缺失分析

目的 了解石家庄市新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)的发病率、临床分型以及相关基因的变异特征。方法选择2017年3月至2021年5月在石家庄市新生儿疾病筛查中心进行HPA筛查的487 380名新生儿,经免疫荧光法检测其足跟血苯丙氨酸浓度,采用基因测序技术对可疑阳性患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因进行检测,患儿父母采用Sanger法进行目标基因变异验证,进一步将基因测序结果与正常人比对,找出片段缺失区域并进行分析。结果487 380名新生儿中筛查出阳性儿191例,确诊HPA 104例,均为PAH缺乏症,发病率为1/4686。104例患儿中共检测出62种基因变异,包括错义变异37种、剪接变异10种、无义变异7种、同义变异2种、整码变异1种以及杂合缺失5种。PAH基因常见的变异位点有c. 158 G>A(18.7%)、c. 728 G>A(10.5%)、c. 611 A>G(6.7%)、c. 331 C>T(4.8%)和c.721C>T(4.8%),并发现未报道基因片段缺失(外显子6杂合缺失)及基因变异(c.630T>G、c.61-1G>A、c.912+5G>T和c.1055+241C>A)。结论 石家庄市HPA发病率较高,为1/4686;发现了62种PAH基因变异,包括5种片段缺失;此外发现5种未报道的基因变异,丰富了基因数据库。

晚发型高苯丙氨酸血症脑白质病变的临床和影像学特征分析

目的探讨未经治疗的青少年起病的晚发型高苯丙氨酸血症(hyperphenylalaninemia,HPA)白质病变的临床和影像学特征。方法选取2015年1月2022年1日北京协和医院神经科经生化和(或)基因确诊的青少年起病HPA患者5例,分析其临床和影像学特征。结果5例患者中男3例、女2例,起病年龄7~15岁,诊断年龄14~20岁。临床表现包括精神发育迟滞、精神行为症状,痉挛步态和癫痫发作。脑白质病变以侧脑室后角旁顶枕叶为中心,逐渐向额叶、半卵圆中心和皮层下白质扩展,早期避开视放射和U形纤维。病变呈持续的DWI高信号,不强化。MRI示白质病变与临床严重程度不匹配,白质病变和皮层萎缩不匹配提示灰质受累。经低苯丙氨酸饮食治疗后,患者神经精神症状保持稳定,但影像学病灶仍可进展。结论青少年起病的HPA常表现为精神发育迟滞或痉挛性瘫痪,伴或不伴其他神经系统症状;影像学白质病变的分布以侧脑室后角旁顶枕叶白质为中心,可随疾病严重程度向更大范围扩展。饮食控制后可稳定临床症状,但影像病灶可继续进展,早期诊断和治疗可改善患者预后和生活质量。

2例新生儿高氨血症导致昏迷的救治过程报道

目的:报道2例新生儿高氨血症导致昏迷的临床特点及救治过程,以提高对该类病的临床认识。方法:回顾性分析2例高氨血症导致昏迷新生儿的临床资料,并结合文献学习瓜氨酸血症及丙酸血症的临床特点及临床诊断。结果:2例患儿发病后均由浅昏迷进入深昏迷,予以对症治疗后血氨短暂下降,但很快再次升高,预后差。结论:2例患儿共同特点是临床不明原因反应差、昏迷警惕遗传代谢病,尤其是进行性加重,应注意检测血氨浓度,新生儿发病无特异性,对原因不明的进行性喂养困难、拒乳、呕吐、嗜睡、昏迷、惊厥、感染指标增高等可疑败血症的患儿,应考虑可能为高氨血症,并尽快进行串联质谱检测,及时给予左卡尼汀、精氨酸降血氨等对症治疗,在血氨显著升高时可进行血滤或腹膜透析。

新生儿筛查确诊苯丙氨酸羟化酶缺乏症患者基因变异及长期随访分析

目的:了解苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因变异的特点,观察PAH缺乏症新生儿的长期治疗效果及随访情况。方法:收集1996至2021年198例济南地区新生儿筛查确诊PAH缺乏症患者的临床资料及治疗随访结果,总结其中完善基因检测的55例及济南周边地区转诊的213例患者的基因分析结果。采用定制Panel检测基因变异,定期监测血苯丙氨酸浓度及患者身高、体重等体格发育指标,采用0~6岁儿童神经心理发育量表和学习成绩评估智力发育,颅脑磁共振成像检测评估患者脑损伤情况。结果:PAH基因以c.728G>A、c.158G>A、c.721C>T、c.1068C>A、c.611A>G变异多见;c.158G>A变异的基因型主要为复合杂合变异,以轻度高苯丙氨酸血症为主。随访期间,168例PAH缺乏症患者的体格发育均正常,无矮小及营养不良。33例学龄期前接受智能发育评估的患者中,2例智能发育落后,初始治疗年龄均超过6月龄。9例平均年龄为(17.13±2.42)岁的患者完成颅脑磁共振成像检查,结果正常1例,异常8例(以T2WI上双侧侧脑室旁小斑片状或片状高信号灶多见),智能发育均正常;结果正常的这例患者较其他8例患者的血苯丙氨酸浓度控制更佳。结论:PAH基因以c.728G>A、c.158G>A、c.721C>T、c.1068C>A、c.611A>G变异多见;经筛查确诊的PAH缺乏症患者规范治疗后,青少年期绝大部分能够获得正常的体格发育和智力发育,但脑白质存在不同程度的器质性病变。

广东省新生儿筛查检出持续性高苯丙氨酸血症的鉴别诊断及管理模式

目的对广东省新生儿筛查检出持续性高苯丙氨酸血症(PHPA)进行诊断和鉴别诊断,探讨可行有效的管理模式。方法建立广东省"一个诊断中心支持多个检测机构"的PHPA转诊协作网络及"转诊申请-诊断报告反馈"管理模式,应用苯丙氨酸(Phe)定量测定、四氢生物蝶呤(BH4)负荷试验、尿蝶呤谱分析、二氢蝶啶还原酶检测和PTPS基因测序分析等方法对PHPA进行诊断和鉴别诊断。结果2002～2007年6年期间广东省新生儿筛查检出PHPA75例,诊断经典型苯丙酮尿症(PKU)22例(29.33)、轻～中度HPA26例(34.66)、BH4反应型(BH4R)-HPA12例(16.00)和BH4缺乏症(BH4D)15例(20.00)。全部病例得到明确诊断和有效治疗。结论PHPA的病因病机和临床类型不同,治疗方法迥异,故筛查检出PHPA治疗干预前必须先行鉴别诊断。可采用"一个诊断中心,多个检测机构"的管理模式,培育诊断中心,建立转诊协作网络,规范管理程序,为区域性新生儿筛查检出的PHPA提供鉴别诊断服务。

江西省新生儿高苯丙氨酸血症筛查结果分析

【目的】分析江西省新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)发病情况。【方法】应用细菌抑制法和荧光分析法进行新生儿足跟血纸片苯丙氨酸检测。四氢生物喋呤缺乏症(BH4D)鉴别诊断送上海新华医院。【结果】10年来共筛查367 166例新生儿,确诊HPA 20例,发病率为1/18 358。其中经典型PKU 3例,占15%;中等型HPA 5例,占25%;轻型HPA 1例,占5%。BH4缺乏症11例,占55%。【结论】江西省HPA的发病率低于全国平均水平,但BH4D的发病率明显高于全国水平;应对所检出的所有高HPA患者进行鉴别诊断,以免错过最佳治疗时机。

顺德地区新生儿先天性甲状腺功能减退症和高苯丙氨酸血症调查

目的分析顺德地区先天性甲状腺功能减退症(CH)和高苯丙氨酸血症(HPA)的发病情况及治疗效果。方法回顾性分析顺德地区2001年7月至2012年9月260 765例新生儿CH、HPA初筛、确诊结果,对接受治疗的患儿进行随访。结果 260 765例新生儿中,确诊CH 121例,发病率1/2 155;确诊HPA 7例,发病率1/37 251,其中经典型苯丙酮尿症2例、轻～中度HPA 3例、四氢生物蝶呤缺乏症2例。所有确诊患儿经有效治疗,未见智力及体格发育障碍。结论顺德地区CH发病率较高,HPA发病率较低;顺德地区CH初筛促甲状腺激素临界值定为8mIU/L较为适合;早期诊断和鉴别诊断有利于指导治疗和保证疗效。

九江市2013～2017年新生儿高苯丙氨酸血症筛查及基因分析

目的探讨九江市新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)的患病率及临床分型、基因突变特点。方法选取本市2013年1月～2017年12月出生的新生儿共261 659例作为筛查对象,使用芬兰产VICTOR-2D全自动免疫荧光仪对处理后的血斑标本进行检测;对确诊HPA患儿行四氢生物蝶呤(BH4)负荷试验、尿蝶呤谱分析和红细胞二氢蝶啶还原酶(DHPR)活性测定以鉴别诊断,以Sanger测序对苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变进行分析。结果筛查261 659例活产新生儿后发现HPA 24例,患病率1/10 902。24例HPA中,14例(58.3%)苯丙氨酸羟化酶(PAH)缺乏症(PKU),患病率1/18 689,其中7例(50%)经典型苯丙酮尿症(PKU),2例(14.3%)轻度缺乏PKU,5例(35.7%)BH4缺乏症,11例患儿接受PAH基因突变分析,其中,9例发现2个突变点,2例发现1个突变点,共发现12种基因突变。结论九江市PAH缺乏症发病率低于全国水平,以经典PKU和BH4为主,早期新生儿HPA筛查有利于降低全市出生人口缺陷率。

串联质谱法检测苯丙氨酸和酪氨酸在新生儿苯丙酮尿症诊断中的应用价值

目的:研究串联质谱法检测苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr)在新生儿苯丙酮尿症诊断中的应用价值。方法:选取2016年至2021年期间于孝感市妇幼保健院行苯丙酮尿症筛查的新生儿218420例入组研究,其中有初筛阳性新生儿1352例。另选取同期于该地区出生的500例健康新生儿作为对照。采用干滤纸血片检测500例健康新生儿的Phe、Tyr浓度后,确定检测指标线性范围。然后对1352例疑似苯丙酮尿症新生儿行Phe、Tyr浓度测定,检测平均回收率、变异系数,计算苯丙酮尿症阳性新生儿的Phe水平和Phe/Tyr比值,检测方法应用串联质谱法。结果:Phe和Tyr的线性范围、回收率及CV如下:线性范围:Phe为(26.32~891.12)mol/L,Tyr为(38.96~265.22)mol/L。浓度平均回收率:Phe为98.0%,Tyr为97.3%。批内CV:Phe为3.9%,Tyr为4.1%。批间CV:Phe为4.6%,Tyr为5.7%。经串联质谱法检测发现,1352例初筛阳性新生儿中有阳性患儿14例,其Phe水平分别为431.28 mol/L、584.34 mol/L、451.34 mol/L、520.31 mol/L、481.25 mol/L、621.05 mol/L、587.21 mol/L、496.38 mol/L、526.34 mol/L、514.28 mol/L、499.68 mol/L、599.63 mol/L、601.21 mol/L、615.34 mol/L。Tyr水平分别为89.36 mol/L、142.35 mol/L、103.20 mol/L、126.30 mol/L、114.21 mol/L、156.31 mol/L、125.98 mol/L、86.35 mol/L、112.36 mol/L、132.52 mol/L、90.35 mol/L、102.39 mol/L、115.32 mol/L、115.30 mol/L。Phe/Tyr分别为4.8、4.1、4.4、4.1、4.2、4.0、4.7、5.7、4.7、3.9、5.5、5.9、5.2、5.3。结论:新生儿苯丙酮尿症诊断中应用串联质谱法检测Phe、Tyr浓度,具有线性范围宽、浓度回收率高的优势,临床应用价值较高。

泰安市新生儿先天性甲低及高苯丙氨酸血症的调查

泰安市自1999年6月开始,对辖区内出生的活产新生儿进行先天性甲状腺功能低下症(CH)及高苯丙氨酸血症(HPA)的筛查,现将结果报告如下:

高苯丙氨酸血症遗传分型与诊治

高苯丙氨酸血症是一组常染色体隐性遗传氨基酸代谢病,由苯丙氨酸羟化酶及其辅酶四氢生物蝶呤缺陷引起,如不及时治疗将出现严重的神经系统损害,治疗以低苯丙氨酸饮食疗法和补充神经递质药物为主。我国于1982年开始进行高苯丙氨酸血症的新生儿筛查,越来越多的患者在新生儿疾病筛查过程中确诊。高苯丙氨酸血症的诊断已经从临床症状的诊断向新生儿期无症状的生化和基因诊断转变。如何对高苯丙氨酸血症患者进行早期识别和诊治,已然成为临床医师面临的新挑战。文章主要对高苯丙氨酸血症的遗传背景、诊断、鉴别诊断与治疗进行阐述,以提高临床医师对此疾病的认识。

46例高苯丙氨酸血症新生儿早期干预效果分析

目的对高苯丙氨酸血症(hyperphenylalaninem ia,HPA)患儿早期干预效果进行分析,探讨干预后的经济效益、社会效益和有效干预的方法。方法通过新生疾病筛查和免费鉴别诊断,以早期诊断,并立即给予免费6年的干预。结果几年来,共确诊HPA患儿46例,由于有效解决了患儿家庭的经济负担,提高了患儿家长配合治疗的积极性,使患儿持续治疗率达到100%,治疗良好率97.8%。结论广泛宣教、政策干预、新生儿疾病筛查、诊断治疗、家庭饮食指导、实行保偿制等综合干预措施,可有效提高筛查率、患儿检出率,实现早发现、早诊断、持续有效的治疗,达到提高出生人口素质的目的。

血清CKMB、ALP及AST的表达水平及对高胆红素血症新生儿的临床意义

目的研究血清肌酸激酶同工酶(CKMB)、碱性磷酸酶(ALP)及天冬氨酸氨基转移酶(AST)的表达水平及对高胆红素血症新生儿的临床意义。方法选取2021年1月至2023年1月上海交通大学医学院附属新华医院住院治疗的高胆红素血症新生儿162例为观察组,通过经皮黄疸测试仪检测总胆红素(STB),按照STB分度分为:轻度组79例,中度组64例,重度组19例;另选取本院同期测量黄疸值(STB<221μmol/L)正常的健康新生儿159名为对照组。比较对照组和观察组治疗前、后CKMB、ALP及AST水平;比较观察组不同STB程度患者CKMB、ALP及AST水平;采用Pearson相关性分析CKMB、ALP及AST水平与STB水平的关系。结果CKMB、ALP及AST水平比较:观察组(治疗后)>观察组(治疗前)>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同STB程度患者CKMB、ALP及AST水平比较:轻度组<中度组<重度组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,CKMB、ALP及AST水平与STB水平呈正相关(P<0.05)。结论血清CKMB、ALP及AST与高胆红素血症新生儿病情严重程度密切相关,三者水平变化可作为评估高胆红素血症新生儿早期诊断的敏感性指标。

Fluoroskan Ascent荧光读数仪测定新生儿疾病筛查干血斑标本中苯丙氨酸（phe）的初步评价

目的对Fluoroskan Ascent荧光读数仪测定干血斑中苯丙氨酸（phe）浓度进行初步评价。方法根据中华人民共和国卫生行业标准的《定量临床检验方法的初步评价》[1]提供的方法,利用荧光测定法原理,按照特定顺序连续5天测定低、中、高浓度干血斑中phe浓度,并对其进行线性、精密度、偏差以及离群点的目测评价,并计算偏差和总不精密度。结果将phe浓度测定结果作图,目测可以得出其线性良好、精密度好、偏差小及无离群点的初步印象,phe低、中、高3种不同浓度的不精密度分别为4.91%、5.21%、6.66%,均小于厂家说明书规定的10%。结论用Fluoroskan Ascent荧光读数仪测定干血斑中Phe浓度线性良好、精密度良好,性能符合新生儿疾病筛查的要求。