延迟亚低温对新生幼鼠脑白质损伤的改善作用

目的探讨延迟亚低温对氧糖剥夺-复氧复糖诱导新生幼鼠脑白质损伤的改善作用及其可能机制。方法建立40只新生幼鼠全脑灌流和氧糖剥夺模型,随机平均分为4组进行延迟亚低温干预,每组各10只。用免疫荧光法分析各组脑切片髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达、少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,O4)数量。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测M1型和M2型小胶质细胞相关基因表达。结果在亚低温32℃延迟24、48和72h组MBP蛋白荧光强度均高于对照组,且荧光强度随着延迟时长的增加而递增;O4细胞数量均高于对照组(F分别为314.907,P<0.001),且发现细胞数量的增加与延迟时长呈显著正相关(r=0.968,P<0.001);M1型小胶质细胞的CD32、iNOS表达均低于对照组(F分别为41.451、92.912,P均<0.001),且CD32、iNOS表达均与延迟时长呈显著负相关(r分别为-0.868、-0.916,P均<0.001);M2型小胶质细胞的CD206、IL-10表达均高于对照组(F分别为79.699、63.839,P均<0.001),且CD206、IL-10表达均与延迟时长呈显著负相关(r分别为0.862、0.910,P均<0.001)。结论延迟亚低温能有效改善氧糖剥夺-复氧复糖诱导新生幼鼠脑白质损伤,其机制可能与增加O4数量和促进小胶质细胞向M2型极化有关。

红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响

目的探讨红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响,为从微生态角度研究红茶在人体肠道菌群形成过程中的作用机制奠定基础。方法利用宏基因组测序技术检测4周龄新生幼鼠(4weeks组,n=30)、12周龄正常对照组小鼠(control组,n=15)和12周龄喂饲红茶水实验组小鼠(teadrink组,n=15)的肠道菌群分布,分析3组样本的菌群差异情况,探求红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响。结果与control组相比,teadrink组小鼠肠道拟杆菌门(t=-7.711,P<0.001)、拟杆菌科(t=-3.411,P=0.009)、长尾嗤菌体科(t=-2.515,P=0.036)、拟杆菌属(t=-2.693,P=0.027)、邓肯菌属(t=-2.434,P=0.041)、居海事城球杆菌属(t=-3.327,P=0.029)、迪博邓肯菌(t=-2.679,P=0.028)、普通居海事城球杆菌(t=-3.401,P=0.027)和Duncaniella_sp._C9(t=-3.104,P=0.035)相对丰度显著增加,厚壁菌门(t=8.952,P<0.001)、乳杆菌科(t=13.102,P<0.001)、消化链球菌科(t=3.665,P=0.021)、爱格菌科(t=4.481,P=0.002)、理研菌科(t=3.626,P=0.022)、乳杆菌属(t=5.542,P=0.004)、黏液乳杆菌属(t=6.334,P=0.002)、龙包茨菌属(t=3.785,P=0.005)、阿德勒菌属(t=4.504,P=0.002)、约氏乳杆菌(t=4.282,P=0.011)和罗伊氏粘液乳杆菌(t=6.156,P=0.003)相对丰度显著减少。与4weeks组相比,teadrink组小鼠肠道菌群分布差异大于control组。结论红茶对新生幼鼠肠道菌群的形成能够产生影响,不同丰度的菌群可能通过调节碳水化合物代谢等途径来达到改善肠道菌群结构、增强肠道稳态的目的,具体代谢机制有待深入研究。

延迟亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖新生幼鼠脑白质损伤的机制研究

目的探讨延迟亚低温保护氧糖剥夺-复氧复糖新生幼鼠脑白质损伤的效果及可能机制。方法建立40只新生幼鼠全脑灌流和氧糖剥夺模型,随机均分为4组每组10只,分别进行亚低温32℃延迟0 h、24 h、48 h、72 h干预。用Western Blot检测髓鞘碱性蛋白(MBP)的蛋白表达情况;用免疫荧光鉴定小胶质细胞的表达情况;用ELISA测定TNF-α、IL-6浓度情况。结果在亚低温32℃延迟24 h、48 h和72 h的MBP蛋白表达均显著高于对照组0 h(F=478.007,t=-18.180、22.940、-29.670,P<0.001),可发现蛋白表达量与延迟亚低温时长呈显著正相关;随着延迟亚低温时间的延长,小胶质细胞活化程度受到抑制,24 h、48 h和72 h的Iba-1阳性细胞比例均显著低于对照组0 h(F=99.892,t=5.879、9.295、18.760,P<0.001),可发现荧光表达增高与延迟亚低温时间呈显著负相关;TNF-α、IL-6浓度均较对照组0 h显著降低(TNF-α:F=454.197,t=2.184、15.300、15.000,P<0.05;IL-6:F=123.995,t=5.650、13.120、13.910,P<0.001),可发现IL-6浓度与延迟亚低温时间呈负相关。结论延迟亚低温能保护氧糖剥夺-复氧复糖新生幼鼠脑白质损伤,其机制可能与抑制小胶质细胞活化和下调炎症反应有关。

血管生成素样蛋白8对糖尿病幼鼠成年后血糖和胰岛功能的影响

目的:探究血管生成素样蛋白8(Angiopoietin-like protein 8,ANGPTL8)对链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病幼鼠成年后糖代谢和胰岛功能的影响。方法:选取出生10 h内Wistar雄性幼鼠33只,随机分为糖尿病模型组(STZ组,n=13)、ANGPTL8治疗组(STZ+ANGPTL8组,n=11)、对照组(NS组,n=13)以及ANGPTL8对照组(NS+ANGPTL8组,n=18)。前两组幼鼠腹腔注射STZ 0.1 g•kg^(-1)建立糖尿病模型,后两组腹腔注射等体积生理盐水。造模3 d后血糖升至20 mM左右视为造模成功。治疗组幼鼠2 d到6 d腹腔注射ANGPTL80.3 mg•kg^(-1)进行早期治疗。连续7 d监测幼鼠血糖、体重以及胰岛素水平,于造模后7 d采用蛋白免疫印记分析检测胰腺组织胰腺十二指肠同源盒-1(Pancreatic and duodenal homeobox 1,Pdx-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl2-associated X,Bax)蛋白水平。同时于第9 w检测成年鼠葡萄糖耐量,第10 w采用酶联免疫吸附法测量血浆胰岛素水平,并对胰腺组织进行胰岛素免疫组织化学染色。结果:与STZ组相比,STZ+ANGPTL8组血糖得到明显控制,体重、血浆胰岛素水平、Pdx-1蛋白水平明显升高,Bax/Bcl-2百分比明显降低,幼鼠成年后,胰岛素水平与糖耐量提高,胰岛形态结构明显改善(P<0.05)。结论:ANGPTL8早期治疗可有效促进糖尿病幼鼠糖代谢,保护β细胞,抵抗STZ诱导幼鼠模型成年糖尿病的发展。