基于基因共表达网络分析氧诱导小鼠视网膜新生血管模型免疫相关靶基因

目的:通过生物信息学方法探究氧诱导小鼠视网膜新生血管(OIR)模型中与免疫相关的关键基因以及免疫细胞浸润水平。方法:从GEO数据库获取基因芯片数据集,采用R语言环境中“limma”包获得差异表达基因(DEGs),并进行GO功能富集和KEGG通路分析,基于CIBERSORT算法进行数据集免疫细胞浸润分析,通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与免疫相关基因模块中的DEGs,利用STRING在线数据库及Cytoscape软件构建蛋白质互作(PPI)网络,利用cytoHubba模块筛选出最终的靶基因。结果:筛选出467个表达具有显著差异性的基因,其中270个基因表达上调,197个基因表达下调。免疫浸润分析结果显示仅辅助型T细胞2(Th2 cells)高表达,且差异具有显著性(P<0.05)。WGCNA分析后,与免疫最相关模块中差异基因为66个,构建PPI网络后利用插件筛选出5个关键基因,即血管性血友病因子(vWF)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、Serping1、凋亡诱导因子1(AIF1)以及信号传导蛋白和转录激活物(STAT3)。结论:采用生物信息学的方式进行OIR模型的免疫细胞浸润分析及筛选出与免疫相关的关键基因,可为视网膜新生血管性疾病的进一步研究与诊疗提供依据。

GPER抑制星形胶质细胞活性减少OIR小鼠视网膜新生血管生成的机制研究

目的探究在氧诱导下的新生小鼠视网膜缺血模型(oxygen-induced retinopathy,OIR)中,G蛋白偶联雌激素受体(G proteincoupled estrogen receptor,GPER)减少OIR小鼠视网膜新生血管生成的机制。方法42只新生小鼠采用随机数字表法分为4组:常氧对照组(n=11)、OIR组(n=11)、G-1(GPER激动剂)组(n=10)和溶剂对照组(n=10)。出生后17 d(P17)时,眼球冰冻切片免疫荧光染色观察常氧对照组小鼠GPER在视网膜分布情况。G-1组和溶剂对照组在P12~P15时分别腹腔注射给予G-1[50μg/(kg·d)]或玉米油溶剂,P17时视网膜铺片免疫荧光染色观察视网膜血管标志物(IB4)、星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glia fibrilary acidic protein,GFAP)表达,蛋白免疫印迹法定量检测视网膜血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、GFAP、炎症因子TNF-α、IGF-1、IL1-β蛋白表达情况。结果GPER存在于小鼠视网膜全层,在视网膜神经节细胞层与星形胶质细胞标志物GFAP共染。与常氧对照组相比,OIR组小鼠视网膜出现新生血管与无血管区,且GPER、VEGFA和GFAP表达增多,差异具有统计学意义(P<0.05);与溶剂对照组相比,G-1组视网膜新生血管生成减少,VEGFA、GFAP、TNF-α、IGF-1、IL1-β蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论GPER能抑制星形胶质细胞活性,减少VEGFA、炎症因子释放,减少OIR小鼠视网膜新生血管生成。

Avastin玻璃体腔注射对小鼠氧诱导视网膜病变新生血管的抑制作用

背景早产儿视网膜病变（ROP）主要源于视网膜新生血管的形成，avastin可以同血管内皮生长因子（VEGF）的所有异构体发生高亲和力结合，拮抗其生理活性。目的观察玻璃体腔注射avastin对氧诱导视网膜病变模型新生血管的作用。方法取7日龄清洁级C57BL／6J小鼠90只，用随机数字表法随机分为6组：空气对照组、高氧对照组、高氧BSS组和低、中、高剂量avastin组，每组15只。空气对照组小鼠在空气中喂养，其他各组均置于体积分数75％±2％O，的高氧环境中饲养，连续5d，高氧BSS组大鼠玻璃体腔注射无菌BSS液0．5μl，3个avastin处理组小鼠分别玻璃体腔注射1．25、2．50、5．00g／Lavastin各0．5μl。17日龄时过量麻醉处死小鼠，摘除眼球制备视网膜组织切片，苏木精一伊红染色后计数突破内界膜的新生血管内皮细胞核数目；应用免疫组织化学染色法检测视网膜中CD34分子的表达；利用视网膜铺片技术观察低、中、高剂量avastin组大鼠视网膜新生血管的形态并进行比较。结果苏木精一伊红染色发现，高氧对照组小鼠视网膜突破内界膜的新生血管内皮细胞核数目明显多于空气对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；不同剂量的avastin组小鼠视网膜中突破内界膜的新生血管内皮细胞核数明显少于高氧BSS组和高氧对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）；高剂量avastin组与低剂量avastin组比较，突破内界膜的新生血管内皮细胞核数明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学检测显示，高氧对照组视网膜突破内界膜的内皮细胞CD34分子呈阳性表达。视网膜铺片可见空气对照组的血管自视盘向四周均匀放射，分支良好，结构清晰；高氧对照组、高氧BBS组可见大量新生血管，其结构紊乱，分布不均；各剂量avastin组随着剂量的增加，视网膜血管分布和走行接近空气对照组。结论玻璃体腔注射avastin可抑制视网膜新生血管的产生，其作用与avastin的剂量有关。

1145例新生儿需氧血培养结果分析

目的 了解近年来住院新生儿需氧血培养病原菌种类.方法 用BACTEC-9120全自动血培养仪对1145例中新生儿需氧血培养进行检测,对结果进行比较分析.结果 1145例共检出病原菌125株(10.9％),其中革兰氏阳性菌占9.4％,革兰氏阴性菌占1.5％.葡萄球菌108株,肠杆菌科细菌11株,草兰氏阴性非发酵菌6株.男女及年龄段无差异.结论 凝固酶阴性的葡萄球菌检出率最高.早期新生儿感染病原菌种类较多,分布较广.

新生儿窒息复苏中应用不同氧浓度的临床效果

目的探讨新生儿窒息复苏过程中应用不同氧浓度的临床效果。方法将2014年1月至2016年12月在我院娩出的99例窒息新生儿作为研究对象,并将其按照复苏方案的不同分成观察1组33例(高浓度氧复苏)、观察2组33例(低浓度氧复苏)及对照组33例(空气复苏),分别对3组新生儿的临床复苏效果、Apgar评分、血气指标水平及不良事件情况进行对比。结果观察2组新生儿的临床复苏有效率明显高于其他组; 3组新生儿在出生1 min Apgar评分差异不明显,观察2组新生儿在出生5 min、10 min Apgar评分明显高于观察1组与对照组; 3组新生儿在pH值与PCO_2水平上差异不明显,观察1组在PO_2水平上明显高于观察2组与对照组;观察2组新生儿在脑损伤及氧中毒发生率上明显低于其他组。结论新生儿窒息复苏过程中应用低浓度氧复苏的临床效果最佳,可明显改善新生儿的不良症状,同时降低复苏过程中脑损伤及氧中毒的发生风险,值得在临床推广应用。

氧诱导视网膜新生血管模型中基质细胞衍生因子1的表达及机制研究

目的:观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)在氧诱导视网膜新生血管(OIR)模型中的表达情况,并初步研究其在OIR模型中的促新生血管生长机制。方法:30只C57BL/6J新生小鼠随机分为2组。其中15只小鼠置于氧浓度为75%的容器内饲养5 d,再转移至正常空气下饲养5 d,作为高氧诱导组;另15只小鼠一直在正常空气中饲养,作为正常对照组。免疫组织化学方法检测视网膜SDF-1、CD14蛋白的定位及含量,real-time PCR法检测视网膜SDF-1 mRNA的表达。结果:与正常对照组相比,高氧诱导组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目明显增多(P<0.01),血管分支减少,大血管扩张、迂曲。两组小鼠视网膜神经上皮均可见SDF-1和CD14阳性染色,但高氧诱导组的SDF-1和CD14含量明显高于正常对照组(均P<0.01)。并且视网膜SDF-1与CD14的蛋白含量存在正相关(r=0.898,P<0.01)。视网膜SDF-1 mRNA表达在高氧诱导组也明显高于正常对照组(P<0.01)。结论:OIR模型小鼠视网膜SDF-1表达增高,其促新生血管功能可能与CD14+细胞有关。

自制鼻旁管用于新生儿吸氧

制作与使用方法原料：在无菌原则下输液完毕，将废弃的一次性静脉输液针头取下，剪掉钢针弃去，清水冲洗剩余的硅胶软管用其制作鼻旁管。

脑干听觉诱发电位对新生儿缺氧缺血性脑病诊断和评价预后的价值

目的应用脑干听觉诱发电位(BAEP)结合CT为诊断新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)及分度提供科学依据。方法采用ZABR-200型脑干反应测听仪及西德SomatomDR型高分辨率全身CT扫描机对30例HIE患儿进行检测和扫描。结果BAEP:正常4例(13.3%),异常26例(86.7%);头颅CT:正常2例,轻度异常8例,中度异常12例,重度异常8例。结论CT所示脑损伤与临床表现程度有密切关系,BAEP检查敏感性高,影响性小,对诊断HIE及预测和评价预后有可靠的价值。

氧诱导新生小鼠视网膜病变中血管新生和氧应激相关基因表达的变化

目的建立氧诱导新生小鼠视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)模型,观察视网膜血管新生情况,检测OIR病变过程中调控血管新生和氧应激相关基因表达的变化。方法新生小鼠出生后d 7,置75.5%高氧环境中饲养5 d,再返回正常氧环境继续饲养5 d,建立OIR模型。运用视网膜免疫荧光染色检测OIR小鼠视网膜中血管新生情况;运用Real-time PCR技术检测基因表达情况。结果视网膜免疫荧光染色结果显示,OIR小鼠视网膜在高氧诱导视网膜微血管消退的基础上,相对缺氧状态诱导出现明显的新生血管。Real-time PCR结果显示OIR模型小鼠视网膜中:血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(VEGFR)家族中:VEGFA、VEGFD、VEGFR1、VEGFR2的基因表达分别上调1.73、1.71、1.48、1.80倍;血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)及其受体(PDGFR)家族中:PDGFA、PDGFB、PDGFRa、PDGFRb的基因表达分别上调1.29、1.71、1.42、1.42倍;基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)中的MMP2基因表达上调1.48倍;参与调控氧化应激的核转录因子Nrf2[nuclear factor(erythroid-derived 2)-like 2]及受其调控的下游基因包括谷氨酸-半胱氨酸连接酶(glutamatecysteine ligase,GCL)的催化(GCLC)和调节(GCLM)亚单位的基因表达均下调,表达量分别为正常的0.28、0.76、0.49。结论 OIR小鼠视网膜病变过程中,视网膜中促进血管新生相关基因表达上调,而抗氧化相关基因表达下调。

局疗氧疗治疗新生儿脐炎的疗效观察——附120例分析

目的:探讨局部氧疗治疗新生儿脐炎的效果。方法:将120例患脐炎的新生儿依照入院单双号分为对照组和观察组,其中对照组56例、观察组64例。对照组采用常规的消毒处理,观察组在常规消毒基础上联合局部氧疗。结果:观察组治愈58例,好转6例;对照组治愈40例,好转16例,两者比较,差异有显著性,u=3.2,P<0.01。结论:局部氧疗能提高新生儿脐炎的治疗效果。

新生儿缺氧缺血性脑病的早期治疗

目的：探讨新生儿缺氧缺血性脑病的治疗现状和早期药物治疗。方法：对80例新生儿缺氧缺血性脑病患儿的治疗现状及早期药物治疗过程进行分析。结果：患儿轻中度的缺氧经过早期治疗大多数町以恢复正常，中重度缺氧的患儿，经过早期治疗后，须进行后期的康复治疗，大部分患儿能恢复正常，极少数留下后遗症。主要采用支持疗法和对症疗法。其中根据中西医结合治疗的方法，醒脑静和纳洛酮治疗中、重度新生儿缺血缺氧性脑病，复方丹参注射液加胞二磷胆碱佐治新生儿缺血缺氧性脑病，均有显著疗效。结论：患儿轻中度的缺血缺氧性脑病，大部分经过治疗，可恢复正常。小部分重度缺血缺氧性脑病患儿，需进一步进行后期康复治疗，方叮恢复正常。

自制简易鼻塞持续正压给氧治疗新生儿呼吸窘迫综合征的治疗体会

目的探讨自制简易鼻塞持续正压给氧（NCPAP）治疗新生儿呼吸衰竭窘迫综合征的治疗体会。方法对我院新生儿重症监护室（NICU）收治的3例NRDS患儿应用NCPAP治疗，CPAP初始压力3-5cmH2O，当CPAP压力逐渐降至1—2cmH2O以下，经皮氧饱和度在90％以上，气促明显缓解，三凹征明显减轻，可以停止CPAP吸氧改为鼻导管吸氧。结果三例于24小时内紫绀、呻吟消失，三凹征及气促程度减轻。没有改用气管插管机械通气。3例痊愈，除1例有轻度腹胀外，余未发现其他不良反应。结论应用自制简易鼻塞CPAP治疗NRDS，有效、简便，值得广大基层医院推广应用。

乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤 模型的疗效研究

目的研究乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤的疗效,并初步探讨其作用机制。方法新生2日龄昆明小鼠随机分为空气组(46只)及高氧组(46只),分别在空气或55%~65%氧气中饲养至21 d。21 d后空气组随机选取9只作为空气对照组(n=9);高氧组造模成功后再随机分为高氧对照组(n=9),乌司他丁低剂量治疗组(n=9),乌司他丁中剂量治疗组(n=9),乌司他丁高剂量治疗组(n=9),分别给予生理盐水(空气对照组及高氧对照组)、乌司他丁1万U/kg(乌司他丁低剂量治疗组)、5万U/kg(乌司他丁中剂量治疗组)及10万U/kg(乌司他丁高剂量治疗组)腹腔内注射,1次/d,连续用21 d,观察每组小鼠状态及体重变化。21 d后处死各小鼠,观察肺组织外观,HE染色观察肺组织病理结构,免疫组化染色观察肺组织肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达水平及巨噬细胞浸润的情况;Western印迹法检测肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialehyde,MDA)的活性。统计学方法采用t检验和χ2检验。结果乌司他丁治疗组小鼠体重增长高于高氧对照组,其中乌司他丁高剂量治疗组尤为明显,两组间差异有统计学意义(P<0.05);乌司他丁治疗能显著减轻高氧诱导的肺组织结构紊乱、巨噬细胞浸润、炎性反应及肺水肿,其中乌司他丁高剂量治疗组尤为明显。与高氧对照组比较,乌司他丁治疗组治疗21 d时,肺组织SOD、MDA表达水平变化不大。结论乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤模型有保护作用,可能主要通过抗炎性反应实现,且其抗炎性作用呈剂量依赖性。

不同断脐时间对新生儿血氧含量的影响研究

不同断脐时间对新生儿血氧含量的影响研究。方法:对照组给予新生儿早断脐,在胎儿娩出后的10s之内对其进行断脐,实验组给予新生儿晚断脐,在胎儿娩出脐带内血管停止搏动之后再进行断脐。结果:两组新生儿断脐后的心率、血压、血氧饱和度无统计学意义(P>0.05)。实验组新生儿断脐后细胞比容、血红蛋白、红细胞指标优于对照组,新生儿断脐后实验组胆红素、达峰时间均优于对照组,晚发感染发生率少于对照组,家属满意度明显优于对照组(P<0.05)。结论:与新生儿早断脐相比较,新生儿晚断脐可提高新生儿血氧含量,维持各项生理指标处于正常生理状态,避免局部感染,提高新生儿的生命质量及家属满意度。

阻断促红细胞生成素抑制小鼠视网膜新生血管生成

目的：建立C57BL/6小鼠氧致血管增生性视网膜病变模型（oxygen induced retinopathy,OIR）,探讨阻断促红细胞生成素（Erythropoietin,EPO）对视网膜新生血管的抑制作用。方法：取鼠龄7d（P7）的健康C57BL/6小鼠置于75%±2%氧气浓度的密闭氧舱中5d,鼠龄12d（P12）时返回正常空气环境以建立氧诱导鼠视网膜新生血管模型;新生小鼠于P12~P16隔日给予玻璃体腔内注射0.5μL含有25ng（A组）,50ng（B组）,250ng（C组）可溶性EPO受体的PBS液以及不含EPO受体的PBS液（D组）。于P17时分批处死各组小鼠,小鼠眼球以4%多聚甲醛固定,制成病理切片,进行视网膜组织形态病理学观察计数突破内界膜新生血管细胞核数,了解视网膜新生血管增生程度。结果：计数病理切片突破内界膜新生血管细胞核数目,各组玻璃体内EPO受体注射组较PBS注射组新生血管细胞核数明显减少,差异有统计学意义（P〈0.01）。并且各不同浓度EPO受体组间新生血管细胞核计数差异亦有统计学意义（P〈0.01）,随着EPO受体浓度增高,突破内界膜新生血管内皮细胞数减少。结论：可溶性EPO受体玻璃体腔内注射能够阻断EPO的促新生血管生成作用,有望成为治疗眼部新生血管性疾病的新方法。

Role of microglial polarization in age-related macular degeneration

Microglia,originating from primitive macrophages in the yolk sac,serves as both immune system defenders and regulators of homeostasis.These cells exhibit two primary polarization states:conventionally activated(M1)and alternatively activated(M2).The polarization of microglia plays a crucial role in influencing inflammatory disorders,metabolic imbalances,and neural degeneration.This process is implicated in various aspects of ocular diseases,especially age-related macular degeneration(AMD),including inflammation,oxidative stress and pathological angiogenesis.The distinct functional phenotypes of microglia impact disease progression and prognosis.Thus,regulating the polarization or functional phenotype of microglia at different stages of AMD holds promise for personalized therapeutic approaches.This comprehensive review outlines the involvement of microglia polarization in both physiological and pathological conditions,emphasizing its relevance in AMD.The discussion underscores the potential of polarization as a foundation for personalized treatment strategies for AMD.

沐舒坦与固尔苏治疗新生儿肺透明膜病39例疗效分析

目的比较沐舒坦与固尔苏联合鼻塞式持续气道正压给氧(nCPAP)治疗新生儿肺透明膜病临床疗效。方法自2006年1月～2007年7月收住NICU的39例新生儿肺透明膜病患儿,将其分为两组,沐舒坦组20例予沐舒坦30mg/kg/日,分3次或4次,用5%或10%葡萄糖稀释静滴;固尔苏组19例予固尔苏100ml～150g/kg/次,气管内给药。两组患儿在相同综合治疗的基础上均联合nC-PAP,观察两组患儿治疗前后呻吟、呼吸困难、发绀、血气分析、X线胸片变化,并比较两组疗效。结果1)两组患儿治疗后pH、PaO2、PaCO2/FiO2的值逐渐升高(P<0.01),而PaCO2、FiO2的值逐渐降低(P<0.01)。2)治疗6h、12h后两组患儿各呼吸指标间差别仍有显著性意义(P<0.01);而治疗24h后各呼吸指标间差别则无显著性意义(P>0.05)。结论沐舒坦与固尔苏联合nCPAP给氧治疗新生儿肺透明膜病均有较好的疗效,而固尔苏起效快,沐舒坦作用较慢,临床上用药时可根据病情及家属经济条件选择使用。

产前诊断胎儿窘迫的新生儿出生后生物化学监测价值的研究

目的 对产前诊断胎儿窘迫的新生儿出生后即刻行脐带血酸碱度及末梢血血氧饱和度检测,探讨不同程度胎儿窘迫导致新生儿缺氧及酸中毒情况.方法 取我院2013年4月15日至2014年11月30日足月临产孕妇150例,分成三组,A组：轻度胎儿窘迫组50例,胎监（CST）及羊水性状轻度异常;B组：重度胎儿窘迫组50例,CST及羊水性状明显异常;C组：正常对照组50例,CST及羊水性状无异常,新生儿出生后用脉搏血氧仪检测末梢血血氧饱和度,用SIEMENSRAPIDLAB248检测仪检测脐动脉血pH值.结果 Apgar评分＞7分有131例,80.15％新生儿脐动脉血pH值≥7.2,17.56％新生儿的血pH值在7.0 ～ 7.2间,2.29％新生儿的血pH值≤7.0; Apgar评分4～7分有16例,62.50％新生儿脐动脉血pH值≥7.2,25.00％新生儿的血pH值在7.0 ～ 7.2间,12.50％新生儿血pH值≤7.0; Apgar评分≤3分的3例新生儿脐动脉血 pH值均≤7.0;表明无窒息新生儿中也有19.85％发生酸中毒（pH＜7.2）;轻度窒息新生儿酸中毒的发生率为37.50％,重度窒息新生儿均有严重酸中毒;Apgar评分与血氧饱和度：Apgar＞7分的血氧饱和度：1分钟为（64.27±12.78）％,5分钟为（92.18±5.89）％,10分钟为（95.34±4.54）％;Apgar评分4～7分的血氧饱和度：1分钟为（59.48±12.07）％,5分钟为（80.47±6.48）％,10分钟为（92.64±6.48）％;Apgar评分≤3分的廊氧饱和度：1分钟为（48.87±14.68）％,5分钟为（76.45±7.28）％,10分钟为（83.74±8.06）％,窒息的新生儿出生1分钟与无窒息新生儿血氧饱和度相比无统计学意义（P＞0.05）,但窒息的新生儿血氧饱和度上升较慢,无窒息与窒息新生儿5分钟、10分钟血氧饱和度差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 脐动脉血pH值是一个客观的指标,Apgar评分结合脐动脉血pH＜7.2可提高新生儿窒息诊断的检出率,减少漏诊;连续无创监测血氧饱和度（SPO2）是评价新生儿复苏效果的可靠方法.