毛花甙丙抑制氧诱导乳鼠视网膜新生血管的实验研究

目的探讨毛花甙丙对乳鼠氧诱导视网膜病变模型中视网膜新生血管的抑制作用。方法将20只生后第7天的C57乳鼠经体积分数75%±1%的氧诱导5 d后,分别给予左眼玻璃体内注射0.50μg(10眼)和0.10μg(10眼)毛花甙丙注射液,右眼注射相同剂量的磷酸盐缓冲液做对照,在生后第17天时进行视网膜铺片染色,计算视网膜新生血管面积和视网膜无灌注区面积,双眼间做配对样本t检验。结果给予0.05μg和0.10μg毛花甙丙玻璃体内注射后视网膜新生血管的面积分别为(1.09±0.32)mm^2和(0.92±0.40)mm^2,明显低于对照眼的(1.84±0.59)mm^2和(2.03±0.35)mm^2(均为P<0.05);0.05μg、0.10μg毛花甙丙注射后视网膜无灌注区面积分别为(1.40±0.44)mm^2和(1.07±0.40)mm^2,明显低于对照眼的(2.00±0.65)mm^2和(1.83±0.46)mm^2(均为P<0.05)。同时0.10μg毛花甙丙治疗效果优于0.05μg。结论毛花甙丙对氧诱导视网膜病变乳鼠模型中视网膜新生血管的生长具有抑制作用,同时还能促进视网膜无灌注区的修复。

siRNA靶向Rac1真核表达载体的构建与效应检测

目的构建、纯化并鉴定Rac1特异性siRNA的真核表达载体,并在HeLa细胞中初步检测其转染率及对Rac1基因的抑制率。方法体外合成含针对人、鼠的Rac1特异基因序列的siRNA链,定向克隆至pSUPER质粒中,对重组质粒进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。将抽提的质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜观察转染效率,荧光定量RT-PCR法鉴定其抑制Rac1基因表达的效果。结果利用RNAi技术成功构建抑制Rac1表达的小干扰RNA重组载体,并成功转染到HeLa细胞中(载体转染率达到70%以上)。在mRNA水平对Rac1基因的表达产生明显抑制作用(抑制率为87%以上)。结论成功构建了针对Rac1的siRNA真核表达载体,为进一步研究Rac1的功能奠定了基础。