新生鼠窒息后肾组织Na^+、K^+-ATPase、TNF-α和NO的变化

目的 探讨Na+ 、K+ ATPase、TNF α和NO在新生鼠窒息后肾组织的变化及意义。方法 将2 0只 7～ 10日龄Wistar大白鼠随机分为窒息组和对照组 ,每组 10只。制成常压窒息模型。在窒息 30min复氧 12 0min时 ,并分别采用酶联免疫吸附法 (ELISA)、单一试剂法和定磷法检测肾组织肿瘤坏死因子 α(TNF α)、NO含量、Na+ 、K+ -ATPase活性。结果 窒息后复氧 12 0min时 ,肾组织TNF α、NO的含量较对照组显著升高 (P <0 0 5 ) ,而Na+ 、K+ -ATPase活性下降 (P <0 0 5 ) ,且Na+ 、K+ -ATPase的改变与TNF α和NO含量之间呈显著的负相关关系 (r =- 0 6 8和 - 0 72 ,P <0 0 5 ) ,TNF α和NO含量之间呈显著的正相关关系 (r=0 6 4 ,P <0 0 5 )。结论 窒息后肾组织Na+ 、K+ -ATPase活性下降 ,其机制可能与TNF α、NO造成细胞损伤有关。

三七总皂甙对新生鼠窒息心肌细胞凋亡的影响

目的:建立近似人类新生儿窒息的病理过程的新生鼠窒息心肌损伤模型,观察心肌细胞凋亡及使用三七总皂甙(TPNS)后心肌细胞凋亡的变化。方法:出生7天SD大鼠88只,雌雄不拘,随机分为对照组(n=8只),窒息组(n=40只),窒息+TPNS(n=40只)。将大鼠分别放入55ml的磨口瓶中,瓶内放入0.005kg的钠石灰,待大鼠安静后,窒息组,窒息+TPNS组塞紧瓶塞0.5h,取出吸氧120min后,放回母鼠身边继续喂养,分别于窒息后6h、24h、48h、72h、7天后处死;对照组放入55ml的磨口瓶中0.5h不塞瓶塞,取出吸氧120min后放回母鼠身边继续喂养,6h后全部处死。采用TUNEL法测定心肌细胞凋亡,每组各随机抽取一个标本做电镜片HE染色的光镜病理片。结果:①窒息组、窒息+TPNS组各时段的心肌病理切片有明显的心肌细胞坏死,炎性细胞浸润和出血;电镜切片下有心肌细胞线粒体普遍肿胀,细胞核肿胀,染色质边集,肌纤维融合,Z线不清,线粒体空泡,脊模糊稀疏;对照组光镜和电镜病理切片均正常;②窒息组,窒息+TPNS组各时段心肌细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01),有明显统计学差异;③窒息组各时段心肌细胞凋亡率明显高于窒息+TPNS组(P<0.05)。结论:窒息时心肌细胞凋亡率上升是心肌损伤的一种形式;使用三七总皂甙后能明显减轻心肌细胞凋亡率,提示三七总皂甙对窒息所致心肌损伤有明显保护作用。

纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:在建立新生大鼠窒息的动物模型基础上,比较纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:采用SD新生大鼠建立窒息模型2.5h,并分组进行纯氧与空气复苏。实验分为正常对照组、纯氧复苏组(PO组)和空气复苏组(RA组),均在复苏后24h和72h取心肌组织,制成石蜡切片,HE染色光镜观察心肌组织病理变化,TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数,免疫组织化学S-P法检测心肌组织Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果:HE染色光镜观察,与正常对照组相比,PO组可见大部分心肌纤维肿胀,有少许断裂,心肌间质及小静脉明显淤血,RA组心肌纤维则表现明显的片状或灶性坏死。RA组心肌细胞凋亡指数明显高于PO组,且以24h升高最显著。PO组凋亡抑制基因Bcl-2表达高于RA组,RA组促凋亡基因Bax明显高于PO组。结论:空气复苏较纯氧复苏后心肌细胞凋亡更严重,且以复苏后24h最明显,空气复苏促进Bax基因的表达上调,纯氧复苏可使凋亡抑制基因Bcl-2表达上调,提示高浓度氧对窒息复苏后心肌有一定的保护作用。

窒息新生大鼠血浆ET水平及L-Arg和L—NAME对其影响

为探讨一氧化氮（ＮＯ）的前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）和ＮＯ合成酶抑制剂Ｌ－硝基－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）对围产期窒息新生大鼠血浆内皮素（ＥＴ）的影响，采用放射免疫分析法检测窒息新生大鼠及窒息前应有Ｌ－Ａｒｇ或Ｌ－ＮＡＭＥ预处理的新生鼠血浆ＥＴ的水平。结果显示：窒息组血浆ＥＴ水平较对照组明显升高（Ｐ＜０．０１）；Ｌ－Ａｒｇ组血浆ＥＴ水平较窒息组明显下降（Ｐ＜０．０１），与对照组相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）；而Ｌ－ＮＡＭＥ组血浆ＥＴ水平明显高于对照组及Ｌ－Ａｒｇ组（Ｐ＜０．０１），与窒息组比较，无统计学意义。提示：Ｌ－Ａｒｇ能有效地降低窒息新生大鼠血浆ＥＴ的水平；Ｌ—ＮＡＭＥ则作用相反，ＮＯ合成抑制可明显增加ＥＴ水平。

纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠肺泡超微结构的对比观察

目的研究纯氧和空气复苏窒息新生大鼠后,肺泡超微结构的变化。方法选用清洁级7d龄SD大鼠(n=30),随机分为正常对照组、实验组(空气组和纯氧组),将实验组建立缺氧模型后,分别给与空气和纯氧复苏,每组又分为24h、72h两个亚组(n=5)。制作常规电镜标本,在透射电镜下观察。结果1.与正常组比较,实验组出现AECⅠ局部肿胀、胞质脱落,AECⅡ线粒体肿胀、板层小体失去正常结构及数目减少、游离面微绒毛稀少,间质细胞水肿及染色体淡染等超微病理学改变,但空气组的病理改变较纯氧组轻微;2.无论空气组还是纯氧组,其各自的72h组与24h组两个亚组比较,超微病理学改变并无明显差异。结论与空气复苏比较,采用纯氧复苏窒息新生大鼠对于肺组织超微结构损伤严重。