豌豆根瘤菌与新疆中华根瘤菌原生质体的属间融合研究

以青霉素和氯霉素分别作为RhizobiumleguminosorumUSDA2 370和SinorhizobiumxinjiangnesisCCBAU110的抗药性标记。利用原生质体融合技术 ,成功地获得了USDA2 370和CCBAU110的属间融合菌株。该融合菌株可分别在双亲寄主植物上结瘤。融合菌株在细胞形态、大小、菌落特征及蛋白质电泳图谱上与亲本菌株均有所不同。融合菌株与USDA2 370的DNA同源性为 5 6 6 % ,而与CCBAU110的DNA同源性为 10 2 %。

DNA同源性分析最终确定新疆中华根瘤菌(Sinorhizobium xinjiangensis)为一独立种

针对S .xinjiangensis分类地位的争议 ,从新疆再次分离获得 34株快生大豆根瘤菌 ,在 16SrDNAPCR-RFLP分析和SDS全细胞蛋白电泳分群的基础上 ,进行了 16SrDNA全序列相似性和DNA同源性分析 .所测 4个菌株和S .fredii模式菌株USDA 2 0 5的 16SrDNA全序列有很高的相似性 .而DNA同源性分析说明新分离的菌株代表与原定的S .xinjiangensis为一个DNA同源群 .其模式菌株CCBAU 110与S .fredii的 2株参比菌株USDA194、2 0 48之间的DNA同源性分别为 31.5 %和 2 8.7% .S .fredii的模式菌株USDA 2 0 5与新分离的菌株代表及原定的S .xinjiangensis的模式菌株和 2个参比菌株之间的DNA同源性为 2 0 .8%～ 39% ,远低于 70 % .属于种水平上的差异 .按照国际细菌分类委员会以DNA同源性≥ 70 %且△Tm≤ 5℃作为定种的标准 ,S .xinjiangensis是Sinorhizobium属中不同于S .fredii的一个独立的种 .表 3参 2