新疆阿魏根提取物对白细胞介素-22诱导的角质形成细胞异常增殖的作用研究

目的探讨阿魏根不同提取物对白细胞介素-22(IL-22)诱导的HaCaT细胞异常增殖的影响,为评估阿魏根提取物对银屑病HaCaT细胞作用的机制研究提供依据。方法实验分组:空白对照组,IL-22实验组,阿魏酸低、中、高剂量组(0.5、1、2 mmol/L),倍半萜类化合物低、中、高剂量组(5、10、15 mg/ml),除空白对照组外其余各组采用100 ng/ml的IL-22干预24 h后,分别加入100μl不同浓度受试物继续培养24 h,观察细胞形态。CCK8法检测各组细胞增殖。流式细胞术检测各组细胞周期。酶联免疫吸附试验法检测培养体系细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-23、IL-4的含量。结果细胞形态学显示阿魏酸对HaCaT细胞的生长状态无明显影响,而倍半萜类化合物能抑制细胞的过度增殖。阿魏酸各剂量组细胞增殖率与IL-22实验组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。而倍半萜化合物各剂量组细胞增殖率与IL-22实验组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。阿魏酸各剂量组细胞周期与IL-22组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。倍半萜类化合物不同剂量组G0/G1期、S期、G2/M期百分比与IL-22实验组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-22实验组各细胞因子水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。阿魏酸及倍半萜类化合物各剂量组TNF-α含量低于IL-22实验组,差异有统计学意义(P<0.05),阿魏酸各剂量组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),倍半萜化合物高剂量组TNF-α含量低于倍半萜化合物低剂量组(P<0.05);阿魏酸及倍半萜类化合物各剂量组IFN-γ含量与IL-22实验组比较,差异有统计学意义(P<0.05),阿魏酸及倍半萜类化合物高剂量组IFN-γ含量低于中剂量组、低剂量组,中剂量组IFN-γ含量低于低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05);倍半萜类化合物各剂量组IL-23的含量与IL-22实验组比较,差异有统计学意义(P<0.05),倍半萜类化合物高剂量组IL-23含量低于倍半萜类化合物中剂量组、低剂量组;各处理组组间IL-4含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论倍半萜类化合物可以抑制IL-22诱导的HaCaT细胞过度增殖,调节细胞周期和分化,阿魏酸对HaCaT细胞过度增殖无明显作用。

早播对新疆阿魏一年生种苗质量的影响

[目的]以新疆阿魏(Ferula sinkiangensis K.M.Shen)种子为试验材料,研究早播对新疆阿魏一年生种苗质量的影响。[方法]将种子层积处理后,分早播和常规播种2种处理,待种苗进入休眠后将根挖出,以根的重量、长度、宽度为指标评价种苗质量。[结果]早播较常规播种根重、根长、根粗分别增加251.57%、60.06%、40.52%,以根重为参考,早播种苗中有17.65%达到一级、10.29%达到二级、22.06%达到三级,而常规播种中没有能达到一级和二级的,仅有2.25%达到三级,其余未入级。[结论]适时早播能够有效提高新疆阿魏一年生种苗的质量。

新疆5种臭阿魏对小鼠宫颈癌U14细胞的体内外抑制作用研究

目的研究新疆5种臭阿魏乙醇提取物的体内及体外对鼠源性宫颈癌U14细胞的抑制作用。方法制备新疆5种臭阿魏根的乙醇提取物,MTT比色法检测5种臭阿魏乙醇提取物的不同浓度组(9.375、18.75、37.5、75、150、300μg/mL)对小鼠宫颈癌U14细胞的增殖抑制作用。建立宫颈癌U14小鼠荷瘤模型,随机分组后连续灌胃给药12 d,剥取肿瘤组织,计算各组抑瘤率。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血肌酐(Cre)、胱抑素C(Cyc C)的值。HE染色观察各组肿瘤病理组织形态。结果大果阿魏、新疆阿魏、托里阿魏、阜康阿魏、圆锥茎阿魏乙醇提取物对小鼠宫颈癌U14细胞的IC_(50)分别为50.84、59.55、133.4、181.7、202.2μg/mL,提示大果阿魏抑制作用最强,新疆阿魏次之,托里阿魏、阜康阿魏、圆锥茎阿魏的抑制作用较差。大果阿魏与新疆阿魏高、低剂量组小鼠的瘤重与模型组相比较明显减轻(P<0.05)。5种臭阿魏均有一定抑瘤作用,其中大果阿魏高、低剂量组及新疆阿魏高、低剂量组的抑瘤效果更好,抑瘤率分别为47.12%、45.19%、49.10%、40.13%。与正常对照组相比,各阿魏给药组对小鼠肝、肾功能均无明显影响,顺铂组的胱抑素C显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大果阿魏及新疆阿魏的乙醇提取物抗宫颈癌活性好。

新疆5种香阿魏醇提物抗胃癌作用初步研究

目的探讨新疆5种香阿魏(准噶尔阿魏、多伞阿魏、山地阿魏、全裂叶阿魏、荒地阿魏)醇提物的抗胃癌作用。方法以质量浓度分别为0,0.3,1,3,10μg/mL的香阿魏乙醇提取物干预成年血管标记绿色荧光转基因斑马鱼胚胎模型,荧光显微镜下观察斑马鱼节间血管长度并计算血管新生抑制率。以香阿魏乙醇提取物干预人胃癌细胞SGC-7901,采用划痕愈合实验检测细胞迁移情况并计算迁移率,MTT法检测细胞增殖情况并计算增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡情况并计算凋亡率,实验均设正常对照(培养基+细胞)。结果准噶尔阿魏、多伞阿魏、山地阿魏、全裂叶阿魏、荒地阿魏醇提物的模型斑马鱼胚胎节间血管新生抑制率分别为50.12%,1.14%,1.37%,7.80%,8.98%;多伞阿魏及荒地阿魏醇提物作用48 h时的细胞迁移率分别为(8.54±7.68)%及(26.88±4.95)%,均显著低于正常对照的(90.68±5.19)%(P<0.05);上述5种香阿魏醇提物对于细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为70.91,108.69,71.48,61.20,81.20μg/mL;细胞凋亡率分别为29.50%,12.30%,24.90%,33.40%,14.00%。结论新疆5种香阿魏均可有效发挥抑制血管生成、细胞迁移、细胞增殖及促细胞凋亡的作用;其中准噶尔阿魏和全裂叶阿魏醇提物的抗胃癌作用较好。

阿魏种植实用技术

阿魏是新疆一种独特的药材,有特殊蒜葱气味。阿魏分新疆阿魏和阜康阿魏2种,属伞形科阿魏属,是多年生一次开花结实植物,生长7~8年才抽茎开花,开花结实后根部腐烂植株死亡。开花的植株在4月底、5月初抽茎,5月开花结果,6月中旬以后种子成熟,采种时应选生长健壮、茎粗、乳汁产量高的植株作留种母株,采种后晒干脱粒,去除杂质,置于干燥冷凉处保存。新疆阿魏高50~100厘米,茎直立,全株披白色绒毛,根肥大,圆柱形或纺锤形,有时分叉,表皮紫黑色,有臭气,开黄色小花。

新疆阿魏乙酸乙酯部位体内外对CT-26.WT细胞的影响

目的研究新疆阿魏(Ferula sinkiangensis K.M.Shen)乙酸乙酯部位体内外对鼠源性结肠癌细胞(CT-26.WT)的影响。方法采用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测新疆阿魏乙酸乙酯部位体外对CT-26.WT细胞的抗肿瘤活性,计算细胞增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测新疆阿魏对CT-26.WT细胞的总凋亡率;建立小鼠CT-26.WT实体瘤模型,随机分为正常对照组,肿瘤模型组,阿魏低、中、高剂量组,顺铂组,给药10 d后观察小鼠脏器指数、体质量、肿瘤病理切片,计算肿瘤抑制率。结果新疆阿魏乙酸乙酯部位对体外CT-26.WT肿瘤细胞的IC50为28.23μg/m L,而顺铂为4.81μg/m L;低、中、高剂量新疆阿魏乙酸乙酯部位对CT-26.WT细胞具有促凋亡作用;对小鼠肿瘤抑制率分别为(38.26±7.82)%、(48.60±9.09)%和(66.54±12.02)%,而顺铂的抑制率为(95.18±3.02)%,新疆阿魏乙酸乙酯部位中、高剂量组脾指数均明显升高,与正常对照组相比差异有统计学意义,与模型组相比差异有统计学意义。胸腺指数和体质量与正常对照组比较无明显变化。结论新疆阿魏乙酸乙酯部位在体内外对CT-26.WT肿瘤生长具有一定的抑制作用。

新疆阿魏蘑菇提取物抗肿瘤实验研究

目的 : 探讨新疆阿魏蘑菇提取物对体外培养的肿瘤细胞生长的抑制作用及其有效成分。方法 : 采用肿瘤细胞体外培养技术 ,观察阿魏蘑菇不同剂量的水提物和醇提物 ( 1 0 -1、1 0 -2 、1 0 -3 、1 0 -4、1 0 -5、1 0 -6kg/L)对体外培养的人肝癌细胞株 ( Q3 )、人胃癌细胞株 ( MGC- 80 3)、人宫颈癌细胞株 ( Hela)、小鼠肺腺瘤细胞株 ( SPC- A- 1 )细胞存活及蛋白合成的影响。以大鼠肝细胞( BRL)为正常对照细胞株 ,同时设立空白对照、阴性对照及溶剂对照。受试物与细胞共培养 2 4 h,观察细胞存活量及活细胞蛋白含量的变化 ;采用系统定性测试方法 ,对阿魏蘑菇中可能存在的抗肿瘤有效成分进行测定。结果 : 阿魏蘑菇水提物、醇提物 1 0 -1kg/L剂量对各类型肿瘤细胞的生长及蛋白合成均有明显抑制作用 ;醇提物不同剂量组对肿瘤细胞生长及蛋白合成可产生不同程度的影响 ,对正常肝细胞的存活量无影响 ,且可促进肝细胞的蛋白合成。阿魏蘑菇中可能有糖类、皂甙、蛋白质、多肽、氨基酸、有机酸、生物碱、挥发油、三萜或甾醇、带双键的萜类等有效成分。结论 : 阿魏蘑菇提取物的抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞生长及蛋白合成有关 ,阿魏蘑菇中确切的功效成分及其与抗肿瘤作用之间的关系有待进一步探讨。

HPLC法测定新疆阿魏不同部位阿魏酸的含量

建立新疆阿魏中不同部位阿魏酸的高效液相色谱含量测定方法。采用PLATISIL ODS （250 mm×4.6mm，5μm）色谱柱，甲醇-0．1％冰醋酸水溶液（35：65）为流动相，流速1．0mL/min，检测波长320nm，柱温30℃。测得阿魏酸进样量在0．440-5．396μg／mL（r=0．9997）范围内与峰面积有良好的线性关系，平均回收率达97．8％，RSD为1．79％（n=9）。新疆阿魏胶、根、茎和叶中的阿魏酸含量分别为0．2600、0．0362、0．0225和0．0275mg／g，胶中阿魏酸的含量远高于根、茎和叶。该方法简便、准确、重复性好，可用于新疆阿魏中不同部位阿魏酸含量的测定。

新疆准葛尔盆地阿魏资源调查

对新疆准葛尔盆地进行野生阿魏资源调查,结果分析表明:确定新疆准葛尔盆地南缘主要有新疆阿魏、大果阿魏和荒地阿魏,依据3种阿魏的种类、分布、生长环境、蕴藏量等方面的综合分析,3种阿魏种群数量处于濒危状态,并提出合理开发利用新疆阿魏资源建议。

珍稀药用植物新疆阿魏种子萌发特性研究

研究了新疆阿魏种子吸水规律及不同光照、温度浸种、低温层积、赤霉素(GA3)处理对新疆阿魏种子萌发的影响。结果表明:新疆阿魏种子存在生理休眠;光照对该种子萌发无显著影响;4℃低温层积40d可以整体解除种子休眠;500～1500mg/LGA3浸种48h可以加快20℃下发芽速度,1000mg/LGA3处理效果最好,处理后6天种子萌发。

新疆阿魏化学成分研究

目的:研究新疆阿魏的化学成分。方法:95%乙醇提取,有机溶剂萃取,硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:得到7个化合物,鉴定为fekrynol(1),fekolone(2),farnesiferol B(3),isosamarcandin(4),episamarcandin(5),farnesiferol C(6),伞形酮(7)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

响应面试验优化新疆阿魏根多糖微波辅助提取工艺及其体外抗氧化活性

为了获得微波提取新疆阿魏根多糖的最佳工艺,以及新疆阿魏粗多糖的体外抗氧化活性,采用响应面法优化新疆阿魏水溶性多糖的微波提取工艺,在单因素试验的基础上选取液料比、提取温度、提取时间、微波功率进行试验设计,以所得多糖质量与苯酚硫酸法测得的多糖含量百分数的乘积作为优化指标,并检测新疆阿魏根多糖体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的活性。结果:最优工艺条件为液料比120∶1(m L/g)、提取时间13 min、提取温度80℃、微波功率600 W,多糖实际得率为6.93%,接近于理论值。新疆阿魏根多糖对DPPH自由基有很好的清除作用,当质量浓度为1 000μg/m L时,新疆阿魏根多糖对DPPH自由基的清除率为91.67%,作用接近于VC的清除作用。

新疆阿魏种子化学成分的研究(Ⅰ)

目的:分析新疆阿魏种子的化学成分。方法:通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、重结晶等技术分离纯化,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:从新疆阿魏种子中分离得到6个化合物,分别鉴定为豆甾醇(1),豆甾醇-3-O-葡萄糖苷(2),柯拉多宁(3)(colladonin),Sinkianone(4),阿魏酸(5),7-羟基香豆素(6)。结论:化合物1、2、3、5、6为首次从该植物中分离得到。

新疆阿魏菇粗提物抗肿瘤效应研究

研究新疆阿魏菇粗(水、醇)提物中可能的抗肿瘤有效成分,探讨粗提物抗肿瘤作用的分子生物学机制。方法: 采用天然植物化学分离、分析及鉴定技术,对阿魏菇醇提物进行了有效成分的初步分离、鉴定;运用形态学观察、流式细胞技术及RT-PCR技术,从诱导肿瘤细胞凋亡角度探讨粗提物抗肿瘤机制。结果: 1. 分离所得组分1号、2号及3号结晶可能为同一种物质─山梨醇,4号组分为一氨基酸混合物;2. 分离组分的体外抗肿瘤作用明显低于粗提物;3. 荧光染色实验结果显示,不同剂量的阿魏菇粗提物分别作用12及24 h后,四种类型肿瘤细胞的凋亡细胞百分比均明显高于阴性对照组(P<0.05, P<0.01);4. 流式细胞术及RT-PCR实验结果,(1)阿魏菇醇提物及水提物作用后,Q3、Hela细胞P53蛋白表达水平明显上调,尤以Q3细胞醇提物作用24h最为明显;(2)以-actin的表达及表达量作为内对照,四种类型肿瘤细胞均出现P53蛋白表达水平的提高,p53基因、fas基因mRNA表达水平亦上调(P<0.05, P<0.01)。结论: 阿魏菇粗提物可能通过诱导促进肿瘤细胞凋亡基因(p53基因、fas基因)的转录及表达而发挥抗肿瘤作用,至于p53、fas基因通过何种途径促进肿瘤细胞凋亡,尚待进一步探讨。

新疆阿魏抗肿瘤活性部位筛选

目的筛选新疆阿魏抗肿瘤的活性部位。方法采用溶剂法将新疆阿魏分离成不同极性部位,磺酰罗丹明B法检测各部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析各部位诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结果新疆阿魏石油醚部位无抗肿瘤活性,新疆阿魏乙酸乙酯部、正丁醇部对人结肠癌细胞HCT116、人结肠腺癌细胞Caco-2、人肝癌细胞Hep G2、小鼠肾癌细胞MFC均有不同程度的增殖抑制和促凋亡作用,甲醇部位活性较弱。结论乙酸乙酯、正丁醇部位有较强的抗肿瘤活性,可确定为新疆阿魏抗肿瘤活性部位。

新疆阿魏乙酸乙酯部位质量控制方法研究

目的 建立新疆阿魏乙酸乙酯部位质量控制方法.方法 采用高效液相色谱法测定新疆阿魏乙酸乙酯部位的阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C 含量.色谱柱为Waters XTerra RPC18（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长324 nm,柱温30 ℃,进样量10 μL.结果 阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C 分别在0.05～1.0、0.132～2.64、0.118～2.36 mg/mL 范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.34%、98.96%、99.24%.新疆阿魏乙酸乙酯部位的阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C 含量分别为33.4、76.5、72.3 mg/g.结论 该方法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可为新疆阿魏乙酸乙酯部位的质量控制提供参考.

新疆阿魏挥发油成分气相色谱-质谱分析

采用水蒸气蒸馏法从新疆阿魏中提取挥发油成分,测得新疆阿魏挥发油的含量为1.0%。用气相色谱-质谱法(GC/MS)对新疆阿魏的挥发性成分进行了分离鉴定,分离出38种成分,共确认了其中36种成分,占检出量的92.32%。采用峰面积归一化法确定了各成分的相对含量,其中主要成分为2,3-二甲基-3-己醇(18.34%)、2-乙硫基-丁烷(8.00%)、丙基丁基二硫醚(6.95%)、十八烷基三烯(6.64%)、乙酸乙酯(6.21%)、油酸(5.10%)。

新疆阿魏菇提取物对4种肿瘤细胞p53表达的影响

目的:研究新疆阿魏菇提取物影响体外培养的肿瘤细胞 p5 3表达 ,从细胞凋亡角度探讨其抗肿瘤机制。 方法 :采用肿瘤细胞体外培养技术及流式细胞技术 ,观察不同剂量的阿魏菇水提物及醇提物对体外培养的 4种类型肿瘤细胞 p5 3表达的影响。结果 :受试物对 4种类型肿瘤细胞均具有较强的杀伤作用 ,尤其以 0 .1g/ ml剂量组为明显 ;经受试物处理后 ,4种类型肿瘤细胞均观察到细胞核固缩 ,DNA浓缩并向核膜靠拢形成浓染致密颗粒 ,并有典型凋亡小体出现。提示 ,受试物可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用 ;流式细胞仪检测结果显示 ,受试物处理后 ,4种类型肿瘤细胞 p5 3表达水平均有不同程度的上调 ,尤其以醇提物作用 2 4 h后影响 Q3细胞p5 3表达水平最为明显。 结论 :阿魏菇提取物中的各组分可协同作用诱导肿瘤细胞促凋亡基因的表达 。