新磷氮霉素A生产菌Streptomyces auratus AGR0001的遗传操作研究

目的建立新磷氮霉素A产生菌金黄色链霉菌AGR0001(Streptomyces auratus AGR0001)的遗传操作体系,为阐明其生物合成的调控和后修饰机制,并通过遗传改造提高其产量和获得更多的新化合物奠定基础,同时可为其它链霉菌的遗传操作研究提供新的参考。方法筛选了S.auratus AGR0001生长、产孢的最佳培养基,检测了其对11种不同抗生素的敏感性,探索了将外源DNA导入该菌的最适方法。结果 ISP4和MS培养基分别是S.auratus AGR0001的最佳产孢和生长培养基;该菌对壮观霉素等7种抗生素敏感,对氨苄和羧苄西林具有抗性,对萘啶酮酸和阿伯拉霉素在低浓度有抗性,而在高浓度敏感;使用PEG介导的原生质体转化、电转菌丝体、接合转移等方法均能将外源DNA导入S.auratus AGR0001中。利用接合转移将携带透明颤菌血红蛋白基因vhb(Vitreoscilla hemoglobin)的自杀型质粒p SET152导入S.auratus AGR0001中并整合至其染色体上进行表达,提高了发酵液的抗真菌活性。结论建立了S.auratus AGR0001的遗传操作体系。

新磷氮霉素A对几种病原菌的室内毒力测定及田间药效

[目的]明确新磷氮霉素A对几种病原菌的药效。[方法]采用菌丝生长速率及田间药效常规法测定该化合物在不同质量浓度下对病原菌的室内毒力及田间药效。[结果]新磷氮霉素A对百合灰霉病菌、烟草赤星病菌抑制效果较好,其次是尖孢镰刀菌,EC50值分别为28.91、64.92、512.16 mg/L,但烟草赤星病菌对新磷氮霉素A的敏感性较强;10%新磷氮霉素A 150 mg/L对百合灰霉病、烟草赤星病有较好的田间防治效果。[结论]为新磷氮霉素A防治几种病原菌的大田防治提供了剂量筛选依据。