新蛋白C7orf42促进大鼠肝细胞BRL-3A增殖

目的探讨未知功能蛋白C7orf42对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖的影响。方法基因干涉下调C7orf42表达后,用MTT、Ed U掺入法检测C7orf42对BRL-3A细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期进程以及Reat-time PCR和Western blotting检测细胞增殖相关基因表达。结果 MTT法检测表明,转染C7orf42干涉片段后48h,干涉组比阴性对照组细胞活力降低11%(P<0.05);Ed U掺入法检测表明,实验组的Ed U阳性细胞比率比对照组降低了13%(P<0.05);流式细胞术检测表明,干涉组比阴性对照组S+G2/M期的细胞数降低12%(P<0.05);Reat-time PCR检测表明,干涉C7orf42表达后细胞增殖相关基因JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达分别下调26%、31%、37%和14%(P<0.05);Western blotting检测表明,干涉C7orf42表达后细胞增殖相关蛋白JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达分别下调59%、54%、18%和27%(P<0.05)。结论 C7orf42可能通过上调细胞增殖相关蛋白JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达,促进体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖。

应用新蛋白源的对虾配合饵料水中稳定性的研究

采用标准法和快速测定法对应用新蛋白源的对虾配合饵料的水中稳定性进行了测定 ,从而初步评价配合饵料的质量。试验结果表明 ,采用两种方法测定对虾配合饵料的水中稳定性大小顺序相同。用酶解新蛋白源替代 2 / 3鱼粉的配合饵料水中稳定性最好 。

蛋白质组学中新蛋白质鉴定的研究方法和策略

当前,基于生物质谱进行蛋白质鉴定的技术已经成为蛋白质组学研究的支撑技术之一.产生的数据主要使用数据库搜索的方法进行处理,这种方法的一大缺陷是不能鉴定数据库中未包含的蛋白质,因此如何充分利用质谱数据对蛋白质组研究的意义很大,而新蛋白质鉴定更是其中一个重要的内容.新蛋白质鉴定是蛋白质鉴定的一个方面,新蛋白质的定义按照序列和功能的已知程度分为3个层次;以蛋白质鉴定的方法为基础,目前新蛋白质鉴定的方法可分为denovo测序和相似序列搜索结合的方法以及搜索EST、基因组等核酸数据库的方法2大类;两者各有利弊.存在各自的问题和相应处理的策略.不同的研究者可以根据具体目的应用和发展不同的鉴定方法,同时新蛋白质的鉴定也将随着蛋白质组学研究的发展而更加完善.

磺基异硫氰酸苯酯化学辅助方法对新蛋白质进行从头测序

利用基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间(MALDI-TOF-TOF)质谱结合磺基异硫氰酸苯酯化学辅助的方法对一种从拟青霉(Paecilomyces bainier)分离纯化到的新人参皂苷Rb1水解酶的部分肽段进行了从头测序.共获得了这个新蛋白质8条肽段的序列,一些磺化后信噪比非常低的肽段也获得了比较完整的序列.同时通过从头测序分析确定了一对甲硫氨酸非氧化和氧化肽段的序列.结果表明,磺化后的肽段离子化效率大大增强,在PSD(源后裂解)过程中只有肽键断裂产生的C端的碎片离子系列(y离子系列)出现在质谱图中,图谱背景清晰,信噪比高,单纯的y离子系列使得图谱解析变得非常容易.将这8条序列在NCBI(美国国立生物技术信息中心)数据库中进行BLAST(蛋白质序列比对工具)检索印证这种β-葡萄糖甘酶是一个新蛋白质,发现的两条相对保守的序列为进一步研究奠定了基础.

心肌特异性新蛋白激酶p93和peroxiredoxin3的相互作用

为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用 ,采用酵母双杂交技术 ,选择 p93N端第 10 1～ 372位氨基酸构建诱饵质粒 ,筛选成人心脏cDNA文库 ,寻找与之相互作用的蛋白质 ,结果得到蛋白peroxiredoxin 3(PRX 3) .采用体外结合实验和免疫共沉淀等方法 ,证实了原核和真核表达的 p93确实可与PRX3相互作用 ,通过双重荧光共定位 ,为二者的相互作用提供了定位依据 .研究提示p93可能参与心肌细胞中与PRX3有关的各种生理病理过程 ,如生长、分化、发育、凋亡。

SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究

旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。

新蛋白食品的开发与利用

传统的蛋白食品以动物性蛋白质为主,但这些蛋白食品增长的速度远远不能达到人口增长的需要,解决人类食品危机的关键就是开发和利用新蛋白食品。所谓新蛋白食品就是用传统上不大使用的新原料或新的加工方法,制作出蛋白质含量高的新食品。新蛋白食品的开发,有效地利用了资源,提高了经济效益,而且使蛋白食品的营养价值得到提高,因此具有划时代的意义。另外,新蛋白质添加到食品中,还可以改变食品的功能,组合蛋白质更可以改变某一蛋白质的不足。如果用新蛋白质做为野战食品的原料,

哈密瓜、黄瓜免疫诱导产生的新蛋白

近年来应用病原体或非病原体诱导物(Elecitor)作为诱导因子已成功地使多种植物获得对病害的整体免疫。我们应用瓜刺盘孢(Colletotrichum lagenarium)、瓜类疫霉(Phytopathora melonnis)、黄瓜细菌性、角斑病(Pseudomonas lachrymans)

全球新蛋白及能量原料的开发(待续)

工业化猪禽生产分别贡献了全球猪肉和禽肉产量的55%和71%,预计到2030年这种体系在增长的肉类产量中占比将超过70%,这将导致对动物饲料的巨大需求,特别是在拉丁美洲和亚洲。目前78%饲料谷物用于规模化的单胃动物生产。随着人口增长和耕地面积减少,加上水资源短缺和持续的气候变化将进一步加剧食用和饲用粮的竞争。我们急需一种特别是能够使饲料资源不与人类食品资源发生竞争的转换模式。本文将提供几种新型的不用于食用的资源,比如生物燃料产业的副产品、昆虫粉、树叶粉、农工业副产品的蛋白分离物、使用废水生产的单细胞蛋白、海藻以及蛋白水解物,这些新型原料有可能减少谷物在饲料工业中的使用,并降低饲料和食物供给的竞争。这些饲料资源预计将使养猪产业更具有可持续性。

苏州上方山牧场新蛋白体系扩大试验报告

苏州上方山牧场新蛋白体系扩大试验报告上海市奶牛研究所（２００４３４）金遐良，朱小军江苏省苏州上方山牧场陆火林我们于１９９２年１２月至１９９３年６月在上海嘉定区安亭奶牛场和上海第九牧场进行蛋白质新体系验证试验的基础上，于１９９３年９月至１１月为帮助外省...

阻止组胺分泌的新蛋白质

美国得克蕯斯大学医学部研究人员发现了一种限制组胺分泌的新蛋白。组胺是变态反应(如枯草热,哮喘和荨麻疹)的主因。此蛋白称为组胺释放抑制因子(HRIF),阻止促细胞释放组胺的反应。研究人员说,注射HRIF有助于逆转变态反应或缓解患者。

新蛋白制剂输液——重组人血浆蛋白

新蛋白制剂输液——重组人血浆蛋白保木昌德等过去所指的蛋白制剂是指血浆成分制剂，现今市场能购到的精制人血浆成分蛋白大致上有白蛋白制剂、免疫球蛋白制剂、凝血因子制剂。其中就应用率和数量而言，以白蛋白制剂、静脉用的人免疫球蛋白制剂、凝血因子中的第Ⅷ因子制剂...

家禽饲料新蛋白源——楝树籽饼粕粉

印度成功地开发出一种优质蛋白饲料——楝树种籽饼粕粉,它是楝树种籽榨油后的副产品,以前曾用作肥料和作物杀虫剂。现在印科学家研究开发出一种优质蛋白粉,用作鸡的饲料,可取代50％花生饼粕粉。

MPLA衍生物的设计、合成及作为RBD⁃hFc新冠疫苗佐剂的活性研究

目的设计合成单磷酸脂质A(monophosphoryl lipid A,MPLA)的衍生物,考察其作为新冠病毒疫苗佐剂的开发潜力及C⁃1或C⁃6′位取代基对其活性的影响。方法以商业易得的葡萄糖胺为起始原料,经糖基化、缩合、磷酰化和氢化等反应完成目标化合物的合成。以临床应用的铝佐剂为阳性对照,将所得化合物与RBD⁃hFc重组蛋白新冠疫苗合用,于第0天和第14天经肌肉注射免疫小鼠。然后,分别在初次免疫后的第14、28、42、90天采血,通过检测抗体滴度与亚型、抗体血清抑制RBD结合ACE2的能力及中和抗体水平评价了目标化合物作为佐剂的免疫活性。结果合成得到5个MPLA的衍生物,产物及中间体结构经NMR和HRMS确证;生物活性测试结果表明,化合物1具有比铝佐剂更优的佐剂活性,化合物3和4的活性与铝佐剂相当。结论MPLA衍生物具有作为新冠病毒疫苗佐剂的开发潜力;初步构效关系分析表明,将MPLA的C⁃1位羟基以甲氧基和氨基替换会降低其活性,而将其C⁃6′的羟基以氨基取代可以提高活性。

重组新冠病毒S蛋白三聚体免疫原性研究

目的检测重组新冠病毒S蛋白三聚体是否具有免疫原性。方法将不同剂量的重组新冠病毒S蛋白三聚体搭配同剂量铝盐+CpG1080混合佐剂制成候选疫苗,免疫C57BL/6小鼠。采用ELISA和ELISpot的方法,分别检测小鼠血清中抗S蛋白三聚体的IgG抗体水平和脾细胞中分泌特异性IFN-γ的T细胞水平。结果在免疫后的小鼠血清中检测到了较高水平的抗S蛋白三聚体的IgG抗体滴度,同时在脾细胞中也检测到了分泌特异性IFN-γ的T细胞数量增加。结论重组新冠病毒S蛋白三聚体具有良好的免疫原性。

新大豆蛋白质食品开发(一)

前言 根据联合国粮食与农业组织(FAO)推荐,每人每天蛋白质的平均需要量为70—75g。如果按这个数字推算,全世界食用蛋白质年需要量为9—12千万吨。但目前实际供给量仅为7—8千万吨。这就是说,世界食用蛋白质年短缺量为2—3千万吨。

蚯蚓新钙结合蛋白(NCBP)的二级结构及Ca^(2+)、Tb^(3+)离子的影响

应用红外光谱技术定量测定了水化膜中蚯蚓新钙结合蛋白（ＮＣＢＰ）的二级结构及在不同比例Ｃａ２＋、Ｔｂ３＋离子的作用下其二级结构的变化。结果表明，ＮＣＢＰ中α－ｈｅｌｉｘ含量较低而β－ｓｈｅｅｔ的含量较高，且随不同比例金属离子的加入，１６２９ｃｍ－１处β－ｓｈｅｅｔ峰的变化较明显。同时发现，ＮＣＢＰ具有钙结合蛋白家族特征的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ现象，但不具有激活ＰＤＥ靶酶的活性，初步认为，ＮＣＢＰ含有与Ｃａ２＋浓度相关的特殊的结构和功能。另外，高浓度下Ｔｂ３＋的结合引发ＮＣＢＰ的分子间聚合。

人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 .