高效液相色谱-脉冲安培检测法测定发酵液中新霉素B组分含量

目的建立快速准确测定发酵液中新霉素B组分含量的HPLC-ECD方法。方法采用高效液相色谱-脉冲安培检测法,Agilent zorbax-SB C18（5μm,4.6×250mm）色谱柱,以25mL.L-1TFA＋6mL.L-1NaOH（50%,W/W）作为流动相,流速0.7mL.min-1;柱后衍生液0.5MNaOH溶液,流速1mL.min-1;电化学参数,E1=＋0.1V,E2=＋0.8V,E3=-0.6V。结果新霉素B在进样量0.1~2.0μg的范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9998）,平均加样回收率1.01（RSD=2.09%,n=9）。结论方法操作简便,经济快速,结果准确,可用于新霉素发酵过程的含量测定。

新霉素A、B及其衍生物抗HIV作用的研究

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)自20世纪80年代被发现以来在全世界范围内迅速蔓延,严重地威胁到人类的健康,故研制高效、低毒的抗HIV药物迫在眉睫。本文综述了新霉素A、B及其衍生物作用于HIV的3个不同途径,包括:(1)与HIV RNA上的TAR和RRE结合;(2)与gp120-gp41竞争性地和CD4,CXCR4\CCR5结合;(3)作用于HIV的171-merψ-RNA。此外,还针对这3个不同途径分别阐述了其相应的作用机制。新霉素及其衍生物抗HIV作用的研究结果为抗HIV药物的研究提供了更多的研究方向及可借鉴的研究方法。

硫酸新霉素及相关物质体外抗菌活性与毒性的研究

目的:研究硫酸新霉素及相关物质体外抗菌活性及毒性,探索可能影响硫酸新霉素安全性及有效性的因子,为合理制定有关物质限度提供依据。方法:采用常量肉汤稀释法和纸片扩散法考察硫酸新霉素及相关物质的抗菌活性;用豚鼠和斑马鱼模型评价硫酸新霉素及其成分B、C的毒性。结果:硫酸新霉素及相关物质的体外抗菌活性顺序均为:硫酸新霉素B>硫酸新霉素>硫酸新霉素C>硫酸核糖霉素>巴龙霉素>新霉胺;对豚鼠听力损伤大小排序为:硫酸新霉素>硫酸新霉素B>硫酸新霉素C;药物对斑马鱼致死率及器官毒性排序均为:硫酸新霉素>硫酸新霉素B>硫酸新霉素C。结论:硫酸新霉素及相关物质抗菌活性和毒性存在较大差异,建议在硫酸新霉素质量标准中增加对有关物质的控制,明确新霉素C、新霉胺、单杂及总杂限度,提高该药质量。

RNA适配体作为类抗性基因的可行性

【背景】抗性基因(ResistanceGene)在分子生物学研究中具有重要作用,但其基因片段较大,限制了载体中插入目的序列的长度。【目的】探究分子量较小的RNA适配体的类抗性基因作用,用于优化载体载量和扩展目的基因片段。【方法】基于tRNA支架在体内富集表达RNA适配体,筛选验证氨基糖苷类抗生素新霉素B的RNA适配体的抗性作用。【结果】构建tRNA支架重组RNA表达载体并进行体内筛选,得到A Site和Avirus这2个RNA适配体分子,能够耐受新霉素B浓度为19μg/mL(固体培养基)和30μg/mL(液体培养基)。【结论】RNA适配体可发挥类抗性基因的功能,本文策略有望用于抗性基因的优化,缩小质粒载体载量,为分子克隆技术提供新的手段。