新鲜分离的与预培养的成年肝细胞对胆红素代谢和细胞活性的差异比较

目的探讨新鲜分离的成年动物肝细胞(adult animal hepatocytes,AAH)与预培养24h的AAH对人体胆红素代谢活性的差异,为体外生物人工肝支持系统(extracorporeal bioartificial liver support system,EBLSS)寻求最佳的肝细胞材料应用方案。方法福建省龙岩市第二医院采用机械分离法获得3个月龄的雄性小白鼠肝细胞,设新鲜分离组与预培养组,两组培养液均用含20%胎牛血清、5U胰岛素/ml的高糖型DMEM培养基。新鲜分离组在获取肝细胞后即加入胆红素血清作共培养3h后离心取上清液送检,预培养组对肝细胞作预培养24h再加入胆红素血清继续共培养3h后离心取上清液送检;设不含肝细胞的胆红素血清作对照;用贝克曼全自动生化分析仪检测两组总胆红素、直接胆红素、间接胆红素的变化;以相同的方法作3次重复实验后分析评估。结果新鲜分离肝细胞组使总胆红素、间接胆红素分别下降33.91%、39.29%,而直接胆红素变化不大;预培养组使总胆红素、间接胆红素分别下降8.00%、5.40%。两组总胆红素变化的比较P<0.01(t=3.707),间接胆红素变化的比较P<0.01(t=4.734)。以上实验在完全相同的条件下重复3次,实验结果均显示新鲜分离的AAH对胆红素的代谢活性优于预培养的AAH。结论新鲜分离的AAH对胆红素的代谢活性优于预培养的AAH,在EBLSS使用时以新鲜分离的AAH为佳。

PHA及rhIL－2对新鲜分离肝癌细胞体外实验观察

本文从本院外科８例肝脏病人，合并肝门静脉高压行肝叶切除的肝组织，分离培养肝癌细胞。其中４例见肝癌细胞生长。对其中１例新鲜分离肝癌细胞中加入植物血凝素（ＰＨＡ）及重组人白细胞介素－２（ｒｈＩＬ－２），培养３天后发现，原来成片成堆生长的肝癌细胞逐渐减少，细胞结构破坏，７－９天后在细胞消失，周围淋巴细胞增多。未加ＰＦＡ及ｒｈＩＬ－２３例肝癌细胞生长旺盛，而周围淋巴细胞却逐渐减少消失。提示：ＰＨＡ及，ｒｈＩＬ－２对肝癌细胞周围淋巴细胞有刺激生长作用，对自体肝癌细胞有抑制作用。