RP-HPLC法同时检测新麦纤散中5种有效成分含量

[目的]建立同时检测新麦纤散中5种成分:三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷和茯苓酸含量的方法。[方法]采用反相高效液相色谱(reversed phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)梯度洗脱法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷、茯苓酸的含量。色谱条件:phenomenex-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈和0.1%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长为203nm。[结果]三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷、茯苓酸分别在0.65~16.25μg·mL^(-1)(r^2=0.9996),0.42~10.50μg·mL^(-1)(r^2=0.9997),0.08~2.00μg·mL^(-1)(r^2=0.9998),0.37~9.25μg·mL^(-1)(r^2=0.9986),0.16~4.00μg·mL^(-1)(r^2=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.53%、99.02%、98.55%、95.43%、97.66%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为1.27%、0.54%、0.53%、1.48%、0.81%。[结论]RP-HPLC梯度洗脱法操作简便,结果准确,精密度高,重现性好,能同时测定新麦纤散中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷、茯苓酸的含量,可为完善新麦纤散的质量控制方法提供科学的依据。

新麦纤散对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织ATF-4/CHOP表达的影响

目的:观察新麦纤散对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠结肠组织活化转录因子-4(Activating transcription factor-4,ATF-4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达的影响,探究其治疗UC的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组、新麦纤散低、中、高剂量组,每组10只,5%DSS用以诱导UC模型。美沙拉嗪组灌胃美沙拉嗪缓释颗粒混悬液0.42 g/(kg·d),新麦纤散低、中、高剂量组分别灌胃新麦纤散混悬液1.5、3、6 g/(kg·d),其余组大鼠予等体积生理盐水灌胃,连续治疗2周。观察大鼠一般情况,评估病理组织学损伤,采用Western Blot和RT-PCR法分别检测结肠组织ATF-4、CHOP蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠病理损伤评分显著升高,结肠组织ATF-4、CHOP蛋白和mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,美沙拉嗪组、新麦纤散低、中、高剂量组大鼠结肠病理损伤评分显著降低,结肠组织ATF-4、CHOP mRNA表达减少;美沙拉嗪组和新麦纤散中、高剂量组ATF-4、CHOP蛋白表达减少;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:新麦纤散对UC大鼠有较好的疗效,抑制结肠组织ATF-4、CHOP蛋白和mRNA的表达,减少细胞凋亡可能是其作用机制之一。

新麦纤散对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜炎症及相关免疫因子表达的影响

麦纤散是郑红斌教授运用麦芽纤维防治溃疡性结肠炎（UC）这一访日留学研究成果，结合临床经验配伍而成。本实验旨在探讨在此基础上酌加白及组成的新麦纤散对UC大鼠结肠黏膜炎症及血清白介素（IL）-34、IL-35的影响。

新麦纤散对DSS诱导UC大鼠的治疗作用及机制分析

目的：观察新麦纤散对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）大鼠蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）/真核翻译起始因子-2α（eIF-2α）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的调控作用,探究其对UC的疗效和作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组、新麦纤散低、中、高剂量组,每组10只,采用葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）成功诱导UC模型后,美沙拉嗪组给予美沙拉嗪缓释颗粒混悬液0.42 g·kg^（-1）·d^（-1）,新麦纤散低、中、高剂量组分别给予新麦纤散混悬液1.5,3,6 g·kg^（-1）·d^（-1）,其余组给予等体积生理盐水,连续灌胃14 d。评估UC大鼠疾病活动指数（DAI）,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清NF-κB表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）分别观察结肠组织PERK,eIF-2α蛋白和mRNA的表达。结果：与正常组比较,模型组DAI评分和血清NF-κB水平显著升高（P〈0.05）,结肠组织PERK,eIF-2α蛋白和mRNA水平均升高（P〈0.05）;与模型组比较,新麦纤散组DAI评分减少,血清NF-κB水平降低（P〈0.05）,新麦纤散中、高剂量组PERK,eIF-2α蛋白和mRNA的表达均降低（P〈0.05）。结论：新麦纤散对UC大鼠有较好的疗效,其作用机制可能与抑制PERK/eIF-2α/NF-κB信号通路的激活有关。