光裸方格星虫(Sipunculus nudus)生物扰动对混养系统沉积物及间隙水中营养物质的影响

采用养殖水化学测定方法分析沉积物中有机质和营养盐含量变化,研究方格星虫生物扰动对混养系统中沉积物的生态效应。混养试验在20个养殖桶内(水体积550 L)进行,方格星虫(1.2±0.1 g)养殖在桶底沙层中,其放养密度为0、50、100和150条/桶;鲻(24.5±0.5 g)的放养密度为3尾/桶,养殖在水体中的网箱中(直径0.8 m、高度0.6 m)。试验共分4个处理组(T0、T50、T100和T150),每个处理组各设5个重复。结果显示,与对照组(T0)相比,方格星虫组底层(6–8 cm)沙中有机质含量有所增加,但未达到统计学显著差异(P>0.05)。随着试验的进行,4个试验组的间隙水中硝态氮(NO3-N)、氨氮(NH4-N)以及活性磷(SRP)浓度均呈现出升高的趋势。试验结束时,T100和T150组各层间隙水的NO3-N浓度均低于T0组(P<0.05),且底层间隙水的NO3-N浓度随方格星虫密度的增加而降低;T0组表层NH4-N浓度高于方格星虫组,而底层氨氮却显著低于高密度方格星虫组(T100和T150)(P<0.05)。结果表明,方格星虫的生物扰动在一定程度上可以促进沉积物表层的有机质向底层转移,从而影响间隙水中氮、磷营养盐的转化和释放。方格星虫的生物扰动在精养池塘中的底质修复作用仍需进一步研究。

光裸方格星虫(Sipunculus nudus)对3种不同底质的适应能力

在室内养殖系统中开展光裸方格星虫(Sipunculus nudus)对3种不同底质适应能力的研究。3个底质处理组分别为海沙组(S-s)、对虾池塘底质组(S-sp)和鱼塘底质组(S-fp),各设5个重复;方格星虫[(2.58±0.23)g]的养殖密度为5条/缸。结果显示,3个处理组中,方格星虫的存活率均高于90%;3个处理组中,方格星虫的排泄物主要由粒径(R)小于0.4 mm的物质组成,其中R<0.224 mm的物质占较大比例,在S-s、S-sp和S-fp组中分别达到47.70%、85.95%和69.99%。试验结束时,S-fp组的方格星虫表现出一定程度的生长,而S-s和S-sp组体重稍有下降。研究结果表明,方格星虫成体对于底质的还原状态具有较大的耐受范围,而对于较小粒径(R<0.224 mm)的物质具有较高摄食需求;同时,底质中的有机质含量也是影响其生长的因素之一。

光裸方格星虫(Sipunculus nudus)人工繁殖及生物学的初步研究

对经济海产动物光裸方格星虫(SipunculusnudusLinnaeus)若干繁殖生物学作初步研究.主要报导,干露5～8h,成熟星虫亲体可排放精、卵并达成受精和正常胚胎发育,它是行之有效的人工催产方法.产卵(精子团)于体腔与排卵(活动精子)于体外是两个必经的先后生殖过程.体腔液中的精、卵必需通过肾管(兼有排泄和生殖的功能器官)的再成熟,排放才能受精及发育.取自厦门及其附近海域的生殖种群雌雄性比为1:1.2.中细沙质泥的底质为亲体暂养的适宜底质.耐饥饿实验结果表明,43h内亲体仍有50%存活,并且仍可作亲体使用.测定5批体壁干湿重关系,其直线回归为y=0.1810x-0.0078(R2=0.9366,),回归系数与个体大小、季节不呈相关.

光裸方格星虫(Sipunculus nudus L.)生殖细胞及胚胎发育

１９９０年３月至１９９１年２月， 每月采样１～２次， 每次取３０条个体， 在显微镜下观察雌雄生殖细胞的发育和形态特征。计数雌性个体体腔卵细胞。１９９０年６月～７月取体重≥１３ ｇ 的个体， 解剖取肾管中的精卵进行人工授精，观察胚胎发育进程。取部分担轮幼虫于１０ Ｌ容器中（水温２７５℃～２９℃， 海水比重１０１７～１０１９） 培养， 观察早期个体发育。结果表明，光裸方格星虫雄性生殖细胞以细胞团形式存在，卵细胞以单个游离存在。卵细胞分５个发育期。各期卵细胞相对含量的周年变化表明光裸方格星虫属分批产卵类型，产卵期为４月～９月。光裸方格星虫的精卵只有经肾管收集后才具受精能力。受精卵约经３ ｈ 发育为担轮幼虫， 经２４ ｈ 左右发育为海球幼虫。担轮幼虫为卵黄营养型。海球幼虫为浮游生物营养型， 摄取单细胞藻类或有机碎屑为食， 浮游生活２～３周后变态为稚星虫。

方格星虫体壁明胶的理化特征及功能特性分析

以方格星虫为原料,分析体壁明胶(Sipunculus nudus body gelatine,SNBG)的结构与功能特性。热水法提取SNBG,分析其氨基酸组成,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、质谱法、紫外光谱法、傅里叶红外光谱、扫描电子显微镜等对SNBG结构进行表征;通过测定SNBG的等电点、热变性温度、乳化活性指数(emulsifying activity index,EAI)、乳化稳定性指数(emulsion stability index,ESI)、起泡能力(foam capacity,FC)、泡沫稳定性(foam stability,FS)和持油性(oil holding capacity,OHC)研究其功能特性,并测定其DPPH自由基清除率与抑制酪氨酸酶活力。结果表明,热水提取SNBG富含甘氨酸(22.41%)、脯氨酸(6.62%)和疏水性氨基酸(27.89%),具有Ⅰ型胶原的亚基结构,且产生更多的小分子肽,纤维网状结构较少,出现不规则孔隙,形成光滑片状结构交联;光谱结果显示,SNBG在230 nm处有最大的紫外吸收峰,具有部分三螺旋结构,热水提取过程中大部分解折叠为α螺旋和无规则卷曲结构;此外,SNBG的热变性温度为42.70℃,等电点为4.37;10 mg/mL的SNBG,pH值为6时,EAI、ESI、FC、FS和OHC分别为99 m^(2)/g、40 min、60%、5.88%和12.67 g/g;SNBG在1~5 mg/mL质量浓度范围内,抗氧化活性与抑制酪氨酸酶活力呈浓度依赖关系,并且5 mg/mL的SNBG对DPPH自由基清除率和酪氨酸酶抑制率分别为30.46%和78.61%。综上所述,SNBG部分三螺旋结构解旋以光滑片状结构交联,具有抗氧化和抑制酪氨酸酶活力且功能特性较好,该研究可为SNBG在食品及化妆品领域的应用提供理论依据。

PEF结合酶法提取方格星虫(Sipunculus nudus)多糖工艺条件

为了优化提取方格星虫(Sipunculus nudus)多糖工艺实验条件,采用PEF酶法提取方格星虫多糖,依据料液比、浸提温度、酶底比、PEF电场强度、浸提时间、脉冲数对多糖提取率的影响,以响应曲面法优化方格星虫多糖提取的最优工艺条件,通过紫外可见分光光度计测定多糖吸光度进而计算提取率。结果表明:各因素对方格星虫多糖提取率的影响程度为:料液比>电场强度>提取温度>提取时间;最优工艺条件为:料液比(g/mL) 1︰7,浸提温度50℃,酶底比为2.5%,电场强度30 kV/cm,脉冲数为12,浸提时间2 h;多糖最大提取率为6.45%。

方格星虫的质量检测方法及质量控制标准

目的:建立方格星虫干品质量检测标准,为其质量检测和科学开发利用提供参考。方法:参照2020版《中国药典》(四部)对来自3个不同产地的30批方格星虫干品进行性状、显微鉴别和薄层色谱(TLC)鉴别研究,检测活性物质氨基酸和总糖质量分数,检测其杂质、水分、总灰分、酸不溶灰分、重金属、水溶性浸出物质量分数,利用高效液相色谱法(HPLC)测定方格星虫的黄曲霉毒素质量分数。结果:方格星虫体壁似蚯蚓纵横交错成格状,显微观察可见先端淡棕色钝圆刚毛;在精氨酸、丙氨酸和甘氨酸处呈TLC特征色谱;氨基酸质量分数检测占比最高的依次为谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸;总糖质量分数不低于2%;方格星虫供试品杂质、水分、总灰分和酸不溶灰分分别不超过3%、11%、10%和2%;水溶性浸出物质量分数不低于38%;黄曲霉毒素质量分数不超过10μg/kg。结论:本研究建立的方格星虫质量检测标准方法稳定,可为方格星虫药材质量控制提供参考。

方格星虫胚胎与幼体发育的研究

研究了方格星虫Sipunculusnudus胚胎与幼体发育。实验用亲虫于1999—2001年每年的5—8月分别采自北海市白虎头、大冠沙及高德海区。用人工授精法获得胚胎,用自然受精法获得幼体并观察其发育状况。研究表明,在25℃水温下,从受精卵到孵化出海球幼体(Pelagosphericlar va),胚胎发育需50—52h;在水温28—29℃下,需38—40h。在水温28—29℃下,从初孵出的海球幼体到附着变态期幼体,需13—15d。附着幼体经过7—10d发育后才完成变态,成为稚虫。

方格星虫营养成分分析及抗疲劳作用研究

方格星虫（Sipunculus nudus）属于星虫动物门，星虫科，方格星虫属动物，俗称沙虫。个体较大，肉嫩味美，加工成品“沙虫干”是我国著名的海产珍品之一，深受消费者欢迎。我国多种药典中记载了其食用和药用价值，有些地区用其代中药冬虫夏草。目前国内对方格星虫主要研究其食用功效及繁殖生物学，章超桦等测定了沙虫干80％乙醇抽提液中呈味及功能成分。

方格星虫的繁育、养殖及研究开发进展

方格星虫(Sipunculus nudus)是中国重要的经济类底栖动物,具有重要的食用价值和药用价值。由于近年来过度捕获造成自然资源匮乏,亟待养殖技术和繁育技术的提高以满足食用和药用研究需求。关于方格星虫的研究目前多集中在繁殖发育、营养和药用价值等方面。目前方格星虫的繁育技术已经初步成功,其养殖规模有望扩大,但是其生产方式和池塘养殖技术仍有待深入研究。文章综述了有关方格星虫分类、养殖生态、繁育、营养及其增养殖技术等方面的研究,以期为方格星虫养殖产业的发展与研究开发提供参考。

方格星虫提取物的抗辐射作用

目的研究方格星虫提取物的抗辐射作用。方法将50只ICR雄性小鼠随机分为对照组、模型组及低、中、高3个方格星虫提取物组,灌胃给药,每天1次,给药第15d,以60Coγ射线进行全身照射一次,照射剂量为5Gy,照后继续给药14d。测定小鼠外周血白细胞、血小板和血细胞计数,脾指数、胸腺指数、骨髓有核细胞计数、血清SOD活性和MDA含量,以及睾丸指数、精子数、精子畸形率等。结果与模型组比较,方格星虫3个剂量组白细胞数、红细胞数、骨髓有核细胞数升高显著;胸腺脾和睾丸指数显著升高;精子数上升,精子畸形率下降,SOD活力增高,而MAD含量下降。结论方格星虫提取物具有显著的抗辐射作用。

方格星虫延缓衰老作用研究

目的 :研究方格星虫提取物的延缓衰老作用。方法 :SD大鼠口服给药 30d后 ,采用硫代巴比妥酸显色法 (TBA法 )测定受试大鼠血清丙二醛 (MDA)含量 ,采用羟胺法测定血清SOD活性。采用果蝇生存试验测定方格星虫提取物对OregonK野生型黑腹果蝇生存时间的影响。结果 :方格星虫提取物经口给予SD大鼠不同剂量的方格星虫提取物 30d后 ,大鼠血清MDA含量显著降低 ,血清SOD活性显著增强。方格星虫提取物显著延长雌雄果蝇的平均寿命 ,显著延长雄果蝇的最高寿命。结论 :方格星虫提取物具有明显的延缓衰老作用。

方格星虫多糖分离纯化及性质鉴定

以方格星虫(Sipunculus nudus)体壁和血液为试验材料,经胰蛋白酶水解,Sevage法去除蛋白质,乙醇沉淀得到粗多糖,透析并冷冻干燥后分别得到方格星虫体壁多糖(SWP)和血液多糖(SBP)。经凝胶渗透色谱分析,SWP和SBP均为单一组分,相对分子质量分别为284 528和198212。红外光谱分析表明,两种多糖结构相似,不含硫酸基团,均含有葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。SBP含有乙酰氨基,而SWP不含乙酰氨基,它们是以α-糖苷键或β-糖苷键连接的呋喃多糖。

方格星虫多糖体外抗乙型肝炎病毒活性的研究

以Hep G2.2.15细胞为研究模型,选用拉米夫定为阳性对照药物,采用Taqman荧光定量PCR检测细胞上清HBV DNA,ELISA检测培养上清液HBsAg、HBeAg水平的变化。采用MTT法观察它们对细胞生长的影响。发现方格星虫多糖的4个剂量组(250,125,62.5,32.3 mg/L)和所观察的时间点(3、6、9 d)对HBV DNA、HB-sAg、HBeAg表现出剂量与时间依赖的抑制作用(P<0.05)。方格星虫多糖对HBV DNA抑制的半数抑制浓度为49.48 mg/L,对Hep G2.2.15细胞半数细胞毒性浓度为250 mg/L,治疗指数为5.06。认为方格星虫多糖对培养2215细胞中呈剂量与时间依赖的抑制作用,具有较好的应用前景。

方格星虫酶解物成分分析及其抗氧化作用

用木瓜蛋白酶对方格星虫(Sipunculus nudus)进行酶促水解,并对酶解物冻干粉的成分进行了分析,其中粗蛋白质量分数为69.02%,多肽质量分数为60.60%,肽的平均链长为3.73个氨基酸残基,肽分子的平均相对分子质量为447.6;游离氨基酸占5.27%。氨基酸分析结果显示,方格星虫酶解物含有17种氨基酸(色氨酸未测),其中人体必需氨基酸含量较高,占总氨基酸数的30.62%。方格星虫酶解物中还含有P、Fe、Mg、Mn、Zn、Cu、Se等至少12种矿质元素,以及含有抗氧化作用的营养成分,并通过动物试验证明了方格星虫酶解物具有显著的抗氧化作用。方格星虫酶解物可用于食品添加或用作功能性食品。

盐度和规格对光裸方格星虫耗氧率及排氨率的影响

为研究盐度和规格对光裸方格星虫呼吸代谢的影响,采用实验生态学方法,研究了不同盐度梯度(15、20、25、30和35)对3种规格S(2.11±0.60)g、M(6.31±0.85)g和L(8.80±1.40)g光裸方格星虫耗氧率和排氨率的影响。结果显示,盐度对耗氧率和排氨率影响均显著,盐度和规格的交互作用对耗氧率和排氨率影响极显著。盐度在15~25时,耗氧率(OR)和排氨率(AR)均随着盐度的增加而升高,盐度为25时达峰值,之后随着盐度的增加而降低。耗氧率和排氨率与盐度呈一元二次函数关系,OR和AR与盐度的关系可表示为y=–ax2+bx–c。对于耗氧率,a值的范围是0.030~0.044,b值的范围为1.525~2.252,c值的范围为11.824~20.132;对于排氨率,a值的范围是0.009~0.012,b值的范围为0.455~0.593,c值的范围为4.369~5.275。光裸方格星虫的O/N值范围为4.06~14.28。研究表明,光裸方格星虫代谢的最适盐度为25,且对盐度变化的适应能力较强,可通过调整生理代谢水平来适应低盐或高盐环境。

方格星虫酶解工艺优化及酶解物免疫活性

【目的】优化方格星虫(Sipunculus nudus L.)酶解工艺条件,探讨其酶解液对细胞免疫活性的影响。【方法】在确定实验用酶和单因素实验基础上,利用响应面设计建立数学模型,以水解度为响应值,进行3因素3水平的响应面分析,得到最适酶解条件。以小鼠脾淋巴细胞的增殖、小鼠腹腔巨噬细胞生成NO量和吞噬能力来评价酶解液对免疫细胞的促进作用。【结果】以动物水解蛋白酶和风味蛋白酶组合用酶效果最佳,方格星虫酶解的适宜条件为pH 7.0、加酶量5 000 U/g、液料比3∶1,55℃酶解5.2 h,其水解度为38.92%;以此条件得到的酶解液进行实验,酶解液质量浓度为0.9 mol/mL时,小鼠脾淋巴细胞的增殖率为30.57%,小鼠腹腔巨噬细胞生成NO能力为56.2μmol/L,吞噬能力D(540 nm)值均明显高于阳性对照组(P<0.01)。【结论】方格星虫酶解液对细胞免疫具有促进作用。

裸体方格星虫甲醇提取物的化学成分研究

目的对裸体方格星虫(Sipunculus nudusLinnaeus)甲醇提取物的化学成分进行分离鉴定。方法采用溶剂萃取,硅胶柱色谱及半制备HPLC等分离手段对其甲醇提取物的化合物进行分离,通过理化性质及波谱学手段对所得化合物进行化学结构鉴定。结果与结论分离并鉴定了4个化合物:胆甾醇(1)、硬脂酸(2)、环(丙氨酸-脯氨酸)(3)、脱氧胸苷(4),这4个化合物均为首次从裸体方格星虫中分离得到。

方格星虫多糖抗菌活性的初步研究

目的研究方格星虫多糖的抗菌活性。方法以方格星虫体壁作为试验材料,经沸水抽提、乙醇沉淀和sevage法去蛋白后得到粗多糖,再经G-50葡聚糖凝胶柱层析纯化。采用硫酸-苯酚法测定多糖的含量,以含不同浓度的方格星虫多糖(50,37.5,25,12.5mg/ml)培养基,分别接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草杆菌培养12、24、36、48h,观察并记录其生长情况。结果不同方格星虫多糖浓度(25～50mg/ml)对三种试验菌的生长均有抑制作用,浓度越高抗菌活性越强。结论方格星虫多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌埃希菌、枯草杆菌有明显的抗菌活性。