发酵土鳖虫总黄酮含量的测定及方法学考察

[目的]研究发酵土鳖虫含水醇提物中总黄酮含量的测定方法,并对其方法学进行考察。[方法]采用Na NO2-Al Cl3-Na OH比色法在510 nm处测定黄酮类化合物与显色剂所形成的络合物吸光度。[结果]所测定标准曲线线性相关性良好,r=0.999 0,线性范围在0.02-0.10 mg/m L,试验方法的精密度RSD=1.92%,重现性RSD=1.23%,样品回收率95.00%±10.00%,RSD=2.09%。样品重复测定总黄酮含量平均值为4.630 8 mg/g。[结论]方法学考察结果表明,用紫外分光光度法测定发酵土鳖虫总黄酮类化合物含量的标准曲线和线性范围、精密度、准确度和重复性等项内容都符合相关规定,该方法准确可靠,可用于含量测定。

人参蛤蟆油软胶囊中鲁斯可皂苷元检测方法学考察

目的利用紫外分光光度法对人参蛤蟆油软胶囊中鲁斯可皂苷元的含量进行定量分析,考察其检测方法。方法将人参蛤蟆油软胶囊内容物经过水溶、萃取等一系列处理,用紫外分光光度计在397nm波长下测定鲁斯可皂苷元的含量。结果经测定本方法在0.025-0.30mg范围内呈现良好的线性关系,R2=0.9990,加标回收率为98.95%~99.03%,相对标准偏差为0.39%~0.54%。结论方法学考察表明该方法简便,精密度高,重现性好,可用于人参蛤蟆油软胶囊中测定鲁斯可皂苷元含量。

中药黄连微生物检定法的方法学考察

目的建立中药黄连的微生物检定法。方法采用体外抑菌试验选定黄连微生物检定法的适用菌株和剂量范圈,建立标准曲线和药物对敏感菌株的量效曲线。构建适用于一剂量法的效应模式。结果当中药黄连的浓度在某一范围内时,其的对数剂量和抑菌效应呈线性关系,且相关性良好;结论生物检定法作为黄连的质量控制方法是可行的、合理的。

人参属中药材高分辨率熔解曲线鉴定及其方法学考察

目的:建立基于高分辨率熔解曲线鉴别人参属中药材的方法,并进行系统性方法学考察。方法:采集不同产地的人参属中药材人参、西洋参、三七以及市场上常见混伪品竹节参、珠子参、羽叶三七。所有样品提取总DNA,筛选合适的引物,构建人参属正品中药材熔解曲线。同时对不同比例混合样品进行了鉴别,对该方法的灵敏性与特异性、重复性、稳健性、检出限进行了系统性考察。结果:选择psbA-F/trnH-R引物,在模板质量浓度1.6~200 ng·μL^(-1),退火温度为54~60℃,引物浓度为0.1~0.3)μmol·L^(-1)范围内,对人参属中药材共75份样品进行高分辨熔解曲线分析人参、西洋参、三七、羽叶三七、竹节参、珠子参等均获得正确稳定的分析结果。结论:高分辨熔解曲线依据分型分析可以区分人参属中药材,并对其混伪品进行检测。在此基础上本文提出了中药分子鉴定方法学研究标准程序,为进一步规范中药分子鉴定方法学研究提供依据。

高效液相色谱法测定大鼠生物样品中人参炔醇的方法学考察

目的:建立生物样品中人参炔醇(panaxynol)的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:通过对精密度、特异性、回收率、稳定性等考察建立了测定方法,得到标准曲线。结果:生物样品中的panaxynol浓度(C)与色谱峰面积(A)均呈现良好的线性关系,回归方程的相关系数r均大于0.99;panaxynol测定方法的精密度高,重现性好,血浆和各组织样品测定的日内精密度和日间精密度RSD都小于10%;回收率较高,满足生物样品回收率在80～120%的范围,相对标准偏差均小于6%;稳定性好,-20℃冷贮放置不影响测定结果。结论:本法的稳定性、精密度、回收率、专属性和定量线性范围均达到了体内药物分析的要求。

微生物法测定阿奇霉素干混悬剂含量的方法学考察

目的对微生物法测定阿奇霉素干混悬剂含量的方法学进行考察。方法以短小芽孢杆菌为测定菌[CMCC]63202,使用培养基Ⅰ号(PH7.8)及PH7.8磷酸盐灭菌缓冲液,在35～37℃条件下培养16～18小时,采用该微生物法测定阿奇霉素干混悬剂的含量并对方法学进行建立和验证。结果抑菌圈直径(Y)对阿奇霉素溶液浓度(C)对数值的线性回归方程为Y=6.0373lgC-4.008(r=0.9970),空白辅料及空白溶剂对测定无任何干扰,平均回收率为97.90%,RSD为1.03%,精密度RSD为0.8%,三批阿奇霉素干混悬剂含量分别为101.4±1.1、99.31±1.0和100.4±1.2。结论本实验为微生物法测定阿奇霉素干混悬剂含量的方法学建立及验证提供了参考。

温阳解郁颗粒薄层鉴别方法学研究

目的:制定温阳解郁颗粒的薄层色谱鉴别方法。方法:采用薄层色谱法对处方中桂枝、附子、甘草药味进行定性鉴别,并对其进行方法学验证。结果:桂枝、附子、甘草的薄层色谱方法,具有斑点清晰、分离度好、阴性无干扰的特点。结论:本法操作简便、结果可靠、重复性好,可作为桂枝、甘草、附子的薄层鉴别方法,并用于温阳解郁颗粒的质量控制。

醋酸地塞米松搽剂的含量测定及方法学考查

目的采用HPLC法测定醋酸地塞米松搽剂中醋酸地塞米松的含量测定并进行方法学考察。方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水(70∶30)为流动相,检测波长为240nm,柱温:25℃,流速:1.0mL/min,理论板数按醋酸地塞米松峰计算为7423,醋酸地塞米松峰和其它物质的分离度均>1.5。结果醋酸地塞米松的检测量为10～80μg范围内时呈良好线性关系,标准曲线:y=0.3075x+0.0318(r=0.9999),平均回收率为:99.00%,RSD=0.47%。结论该方法快速、简便、可靠、准确度高、重复性好,处方中其他成分对测定亦无干扰,分离效果好,可用于醋酸地塞米松搽剂的含量测定。

大鼠血液样品中海鞘醇检测方法的建立

目的:建立具有抗乙肝病毒活性的新化合物海鞘醇(5α,8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-烯-3β-醇,SC)的体内检测方法。方法:采用正相色谱,环己烷-丙酮(60:40)溶液为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),蒸发光散射检测器,通过测定SD大鼠血浆中SC的含量来建立SC体内HPLC检测方法,并进行方法学的考察。结果:SC在3.2～64.0μg·mL^(-1)范围内,呈良好二阶三项式关系,相关系数r=0.9999,回归方程为:Y=0.021X^2-0.065X+0.287,血浆回收率试验证明,高低浓度回收率平均可达81.5%。结论:此方法稳定可靠,可以作为海鞘醇甚至其他甾醇类化合物的体内检测法。

发酵天龙粉中总黄酮含量测定方法研究

[目的]:研究发酵天龙粉中总黄酮含量的测定方法。[方法]:通过醇水提取发酵天龙粉中总黄酮类化合物,采用紫外分光光度法测定天龙粉中总黄酮含量。[结果]:测得发酵天龙粉中总黄酮含量为0.8193 mg/g,相对标准误差(RSD)为0.89%(n=5),实验方法的精密度RSD=0.64%,重现性RSD=2.47%,样品回收率95.00%±5.00%,RSD=2.64%。[结论]:用紫外分光光度法测定发酵天龙粉总黄酮类化合物含量,其精密度、重现性、回收率均良好,所用方法简单准确,可用来测定发酵天龙粉中总黄酮类化合物的含量。

全自动固相萃取与液质联用方法测定人体血浆中坦索罗辛血药浓度

目的:为临床研究坦索罗辛人体药物代谢动力学建市一种特异、灵敏、快速、重现性好的同相萃取(SPE)联合 LC-MS/MS 定晶分析方法。方法:使用200 μL含待测药物的血浆,加入内标 AB289和稀释液混匀,使用 MCX 96 well 的 SPE 柱进行自动化样品前处理。HPLC 色谱柱为 XTerra RP18(2.1mm×50 mm,3.5 μm);流动相为甲醇-乙腈-10 mmol·L^(-1)醋酸铵(pH5.0)(50:20:30);进样毋10 μL;室温下测定。质谱榆测方式为 ESI^+,MRM 扫描,监测坦索罗辛 m/z 409.2→228.2,内标 m/z423.2→285.1。分析时间2.2 min。结果:在0.10～25.00ng·mL^(-1)的范围内本法线性良好(r>0.999),最低定量限为0.10ng·mL^(-1),以 RSD 表示的日内与日间精密度<5%,以相对偏差 RE 表示的准确度<±10%,萃取回收率在89.2%～87.4%(n=5)。所有稳定性考察项目结果均符合要求。结论:本法在国内首次尝试将自动化的 SPE 样品处理技术引入批量的坦索罗辛血浆样品前处理中,建立了一种可以适用于临床试验分析需求的生物样品定最方法。

鹿哈胶囊中总氮量测定方法研究

采用《中国药典》氮测定法测定鹿哈胶囊中总氮量,以总氮量作为制剂中的质量控制指标。鹿哈胶囊总氮量在24.98mg^29.89mg显良好的线性关系,平均回收率98.26%,RSD 1.06%。该方法适于鹿哈胶囊的总氮含量测定。

白薇薄层鉴别的方法改进

目的根据现有药典标准,改进白薇的薄层鉴别方法,更加有效的控制续断药材质量。方法用硅胶G板为薄层板,甲苯-二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(15∶5∶7∶0.5)为展开剂。以白薇对照药材为对照品,对白薇药材进行薄层色谱鉴别条件的研究。结果薄层色谱斑点较多且清晰、分离度好、耐用性好,能有效鉴别白薇药材。结论改进方法与药典相比,改进方法专属性强,展开斑点多且清晰,可替代现有标准用于白薇药材的鉴别。

利奈唑胺注射液含量测定方法验证

目的:考察利奈唑胺注射液的含量检验方法是否能准确、可靠,并获得客观实际的数据或结果。方法:按照利奈唑胺注射液质量标准及中国药典的要求对利奈唑胺注射液含量检验方法进行验证,本次验证的项目包括系统适用性、专属性、线性、准确度、重复性及范围、耐用性。结论:从分析的结果看,使用高效液相色谱法检测利奈唑胺注射液的含量具有很高的准确性,值得推广。

多西他赛体外HPLC检测方法的建立

目的:本实验旨在建立一种多西他赛的体外含量测定方法。方法:通过对多西他赛最大吸收波长进行检测,液相色谱实验条件进行筛选;组织系统适应性实验与方法专属性实验,线性关系,精密度、溶液稳定性和加样回收率等实验,建立了多西他赛体外含量测定方法。结果:以乙腈︰水(65︰35)溶液为流动相,230nm为检测波长,在上述色谱条件下多西他赛浓度在10~70μg/mL之间线性关系良好,标准曲线为y=43.071x+12.571(r;=0.9995),加样回收率为101.8%,RSD%为1.05%,10h内多西他赛溶液室温稳定性RSD值为0.47%。结论:本实验所建立的高效液相色谱法精密度高、重现性好、稳定性及回收率都达到了药物分析的要求,可用于多西他赛的体外含量检测。

三黄片一测多评的方法学研究

目的:探索三黄片多组分色谱峰定位方法,同时建立其多组分一测多评的含量测定方法。方法:以三黄片为研究对象,在不同色谱柱和色谱仪器上,研究保留时间法、双标法以及对照提取物法对盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素、大黄酚4种待测成分色谱峰定位的准确性。同时,建立一测多评法测定三黄片中4种主要有效成分含量的分析方法。结果:用保留时间法或双标法峰定位时,其待测成分峰相对保留时间与理论相对保留时间差在不同色谱柱上RSD均大于5%,而对照提取物法峰定位时,在不同条件下均可快速准确定位样品中待测成分色谱峰。进而采用一测多评法测定三黄片中4种主要有效成分的含量,结果 3批不同厂家生产的三黄片中4种主要有效成分一测多评法测定值与外标法测定值间无显著差异,相对误差均小于5%。结论:对照提取物法在不同色谱仪器和色谱柱上均能快速准确定位样品中待测成分色谱峰,准确性好。故本试验采用对照提取物法进行色谱峰定位,一测多评法测定三黄片中盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素、大黄酚4种有效成分含量,此方法准确、可行。

紫外分光光度法测定人参叶茶中人参总皂苷的方法学研究

目的研究紫外分光光度法测定人参叶茶中人参总皂苷含量的可行性。方法通过精密度、重复性、稳定性及加标回收率等方面的考察确定此方法是否可行。结果本方法相关性良好,R2=0.999,线性范围在0.05～0.50 mg,加标回收率为96.8%～97.9%,实验结果良好,稳定性RSD=0.86%。结论紫外分光光度法快速、准确,可以作为测定人参叶茶中人参总皂苷含量的测定方法。