基于气相色谱-质谱法的广泛靶向代谢组学方法开发

气相色谱-质谱法(GC-MS)的四极杆检测器具有扫描速率低、离子流失率高、浓度检测范围窄的特点,这些缺陷限制了该技术在代谢组学领域的广泛应用,因此亟需建立一种基于GC-MS的高覆盖率代谢组学分析方法。本文提出了一种基于GC-MS的广泛靶向代谢组学方法,广泛靶向代谢组学结合了靶向和非靶向的优点,可以实现对代谢物质的定性和半定量检测,该方法以The Fiehn library(FiehnLib)数据库中的代谢物质信息为基础,建立直链脂肪酸甲酯(FAMEs)的保留时间与FiehnLib数据库中的保留指数(RI)的关系,根据FiehnLib数据库中的保留指数计算数据库中代谢物质在具体实验条件下的保留时间;对比分析并确定保留时间的阈值为0.15 min,优化最佳扫描间隔为0.20 s;优化代谢物质的定量离子以避免出峰时间相近离子的干扰;最终构建了含有611种代谢物质的选择离子监测(SIM)方法表,这611种代谢物质覆盖了KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)中65%的代谢通路。与全扫描非靶向GC-MS方法相比,该广泛靶向GC-MS方法所检测的代谢物质数量增加20%~30%,信噪比提高15%~20%;稳定性试验结果表明,使用该方法分析样品时,84%的代谢物质保留时间的日内相对标准偏差(RSD)均小于2%,91%的代谢物质保留时间的日内RSD均小于3%;54%的代谢物质保留时间的日间RSD均小于2%,76%的代谢物质保留时间的日间RSD均小于3%;通过对常见生物样本的检测分析,证明该方法大大提升了被检测到的代谢物质的数量和信噪比,可扩展GC-MS在代谢组学中的应用范围。

固相萃取技术在环境水质监测方法开发中的应用

固相萃取技术非常适用于环境水质中痕量有机污染物的监测分析。文章从选择固相萃取柱到萃取液进入色谱分析这样一个完整的过程,并以使用该技术萃取环境水样中的硝基苯类化合物为例,具体阐述了如何使用固相萃取技术建立一个方便实用的环境水质监测分析方法。

人血浆卡马西平浓度测定的LC-MS/MS方法开发、验证及在室间质评中的应用

目的:建立并验证人血浆中卡马西平(CBZ)浓度测定的液质联用方法,并应用于室间质评样品的测定。方法:使用含0.1%甲酸溶液和乙腈进行梯度洗脱,色谱柱:Kromasil C18柱(50 mm×2.1 mm,5μm),流速:0.6 ml·min^(-1),进样量:1μl,柱温:40℃。在ESI^+电离模式下,CBZ和内标噻氯匹定(IS)的监测离子对分别为m/z 237.1>194.0和m/z 264.1>125.0。结果:卡马西平在5~1 000 ng·ml^(-1)范围内线性良好。低、中和高浓度的基质效应范围为93.23%~96.30%,回收率范围为101.27%~105.00%。结论:建立的测定CBZ血浆浓度的液质联用方法灵敏、准确、稳定,可用于CBZ的室间质评及药动学研究。

一个用面向对象方法开发应用系统的实例

结合邮政业务管理系统具体说明怎样利用面向对象的方法来分析和设计应用系统。简要地描述系统的需求，Ｃｏａｄ和Ｙｏｕｒｄｅｎ的面向对象的分析（ＯＯＡ）方法和面向对象的设计（ＯＯＤ）方法，用该方法对邮政业务管理系统ＯＯＡ模型的５个层次进行具体分析，给出了一个子系统的ＯＯＡ模型。讨论了ＯＯＤ模型的４个组成部分的设计。

亲水作用色谱法(HILIC)的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用

亲水作用色谱法解决了大多数极性化合物的色谱分离问题,其已成为包括铂类抗癌药在内的许多极性化合物的色谱分离的首选。亲水作用色谱法在极性化合物的分离与检测、药代动力学研究等的应用均日益广泛。如何高效地完成亲水作用色谱的方法开发是药物分析科学家和药代动力学科学家都面临的重要问题,然而目前还没有专门的文献对此进行系统化的整理和研究。本文以此为切入点,围绕亲水作用色谱法方法开发中的固定相选择、流动相筛选、p H值与洗脱的优化等方面,综述了亲水作用色谱(HILIC)的方法开发策略,以及其在铂类抗癌药分析中的应用。

非标方法开发在环境检测领域中的应用案例

随着新型检测技术及仪器设备的发展日新月异,环境检测领域现行有效的标准检测方法已难以满足客户实际的检测需求,此时非标方法开发作为标准制定的衍生产品应时而生。本文基于环境检测领域的发展现状及市场需求,阐述非标方法开发在环境检测领域中的创新点,产生的社会效益、经济效益、可持续性作用,强调其对环保工作有力践行的重要性。同时着重论述非标方法开发中的关键控制环节,辅助环境检测机构编制本实验的非标方法管理体系,进一步构建完善我国非标方法规范管理的长效机制。

实现实验室方法开发效率的最大化

本文介绍了如何将项目管理引入实验室的建设和管理中，按项目管理的方法实施全过程的管理，提高实验室的效率。

基于双特异性抗体的全柱成像毛细管等电聚焦电泳方法开发策略

双特异性抗体是治疗性抗体领域的研究热点,抗体药物的质量控制也一直是生物制药企业和法规机构的关注重点。全柱成像毛细管等电聚焦电泳(Whole-Column Imaging Detection for Capillary Isoelectric Focusing,WCID-CIEF)是检测治疗性双特异性抗体等电点(Isoelectric point,p I)与电荷异质体的有效方法,但由于双特异性抗体分子本身的结构与理化性质复杂,通常需要针对特定分子进行方法开发或优化,以保证分析方法的专属性和良好的分离效果。本文基于双特异性抗体对全柱成像毛细管等电聚焦电泳的方法开发策略进行概述,包括添加剂、载体两性电解质种类与比例、占位剂、上样量、等电点标记物以及工作溶液稳定性等方面,以期为国内双特异性抗体研究与生产提供方法开发上的技术参考。

基于表面等离子共振技术分析蛋白之间结合活性的方法开发策略

表面等离子共振(SPR)技术是一种新型光学分析技术,可以实时、无标记检测分子间相互作用。该技术不仅可以直接反映分子结合的动态过程,还能够得到具体的速率常数及解离常数,被广泛用于分析蛋白之间结合活性。如何高效地完成基于表面等离子共振技术的方法开发及数据分析是研究人员面临的重要问题,本文围绕缓冲液的筛选、固定配体策略的选择、分析物条件的优化、再生条件的筛选等方面,综述了基于SPR技术分析蛋白之间结合活性的方法开发策略。

星表着陆缓冲装置缩比样机全工况落震试验系统设计与试验方法开发

通过调研国内关于落震试验装置的研究资料及深空探测着陆器对地面落震试验的要求,设计了一种可以实现星表着陆缓冲装置全工况落震的试验系统。采用三维建模软件对该试验系统进行了结构设计,并开发了配套的试验方法。该试验系统包括台架系统、提升系统、水平框架系统、姿态控制系统、锁止释放系统和高速摄像机6个部分,考虑可搭载的缩比原理样机最大质量和极端落震工况,采用有限元方法完成了试验系统的结构力学性能校核。结果显示其强度和刚度满足要求,验证了所设计的落震试验系统的实际可行性与操作安全性。

最新自动方法开发系统

Waters自动方法开发系统是目前科学家用于方法开发及在法规规范环境下进行方法验证的最先进的HPLC系统。该系统将Alliance系统的高精度和准度与Waters新型Empower色谱数据管理系统的灵活性和易用性结合,真正实现HPLC的自动方法开发。

用面向对象的方法开发DICOM通信软件

本文介绍了面向对象的软件开发方法和DICOM国际标准的通信部分 ,并根据DICOM标准 ,用面向对象的方法分析设计PACS系统的通信模块 ,并给出了该部分的程序控制流原理图。

检测实验室非标准方法开发过程概述

随着科技的飞速发展、检验检测产品和所用设备、仪表不断更新发展,新产品、新应用的不断涌现,客户的检测需求已经远远超出了现行有效的标准检测方法,故非标准方法开发作为标准制定的衍生产品应时而生。本文基于这一现状,阐述了非标准方法开发过程及关键控制环节,并给出非标准方法开的风险识别和控制手段,为检测实验室建立和完善开发非标准方法的过程提供指导,有助于检测实验室提升自身非标准方法开发的规范性、合规性,具有十分重要的意义。

基于响应面法的甲磺酸二氢麦角碱缓释片释放度分析方法的开发

目的采用响应面法优化甲磺酸二氢麦角碱缓释片释放度的HPLC测定色谱条件。方法用单因素研究获得对响应值(分离度)影响较大的因素后,再以响应面法对相关参数进行优化,依据Box-Behnken中心组合实验设计原理,采用在三因素三水平对色谱条件的参数进行优化研究,对结果进行分析统计。结果建立色谱条件模型R=-0.17A^(2)-0.0005B^(2)-0.0099C^(2)-3.098×10^(-15) AB-0.004AC-0.001BC+0.52A+0.064B+0.939C-19.91。依据软件计算获得最佳试验参数,经试验检验,响应结果和软件计算结果基本一致,所得方法经方法学验证,专属性符合要求,线性范围为0.61~18.37μg·mL^(-1),线性回归方程为A=24403.6575C-4873.3249,相关系数r为0.9999,平均回收率为95.4%(RSD为0.66%),重复性的RSD为1.10%。结论依据软件计算获得最佳试验参数,经试验检验,响应结果和软件计算结果基本一致,所得方法经方法学验证,专属性符合要求。

低渗透油藏开发管理方法现状及实践

低渗透油藏的开发管理,对石油行业的可持续性发展具有重要意义。在油田开发利用和科学管理中,低渗透油藏资源丰富、具有开发潜力大,但因储量丰度低、产量低、成本大等,增加开发与管理的现实难度。基于此,以XX油田为研究对象,从技术层面出发,探讨低渗透油藏开发管理方法,结合当前运行现状,提出一些实践探索经验及优化建议,为相关研究提供借鉴。

整车动力经济性开发方法

整车动力经济性是车辆性能中的核心属性,动力性与驾驶感受紧密相连,直接关系到客户试驾时的感受,以至于关系到成单成功率的结果;经济性性能与社会的环保、节能相关,追求优良的经济性将会是一个永恒的话题。本文阐述了动力经济性目标设定方法,从车型本身去设定性能条目,目的是开发符合客户及市场口味的产品;后阐述了动力选型计算的方法与工具使用,为行业开发提供了基本思路。

基于云“微服务”装配软件开发方法的研究

实现一种基于云支撑、微服务环境平台为核心的装配式软件开发方法,在基于云的微服务架构下,以拆分与装配为基本手段实现从微服务到系统软件的过程,通过微代码加载到云容器,构建微服务实体对象,再加以配置组装,从而完成应用系统的开发测试与部署及运行。本软件开发方法研究将有助于快速开发基于云计算的应用软件,也有助于将传统软件快速升级成云环境应用软件。

硒元素功能以及富硒农产品开发

本论文旨在探讨硒元素与人体健康的关系,并进一步研究人体对于硒元素的需求。通过文献综述和实证研究,评估硒元素对农产品开发的影响,并探讨其中的机制。同时,关注富含硒元素的农产品的开发潜力和应用前景,以期为富硒农产品的推广与发展提供新的思路和方法。

质量源于设计(QbD)在药物分析方法开发中的应用研究进展

质量源于设计(quality by design,QbD)是一种始于预先定义的目标,采用科学和风险管理的方法来增加对产品和过程的理解并用于过程质量控制的系统方法。QbD主要用于制药工艺开发过程,但其核心思想与分析方法开发过程具有相通之处,因而分析方法质量源于设计(analytical quality by design,AQbD)应运而生。应用AQbD时,需首先定义分析方法目标(analytical target profile,ATP),并根据目标对关键方法属性(critical method attributes,CMAs)和关键方法参数(critical method parameters,CMPs)进行全面评估,结合实验设计(design of experiment,DOE)和统计分析建立分析方法设计空间(design space,DS),并基于设计空间制定方法控制策略(control strategy),通过系统化、结构化、层层递进的方式建立分析方法,以提高分析结果的准确性和可靠性。目前,AQbD已应用于HPLC、UPLC、CE、ELISA、UPLC-MS、LC-MS/MS和GC-MS/MS等分析方法的开发过程。本文综述了AQbD基本组成部分、实施路径、在分析方法开发中的应用和未来发展趋势,以期对药物分析和药品质量控制工作提供借鉴。