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全柱成像等电聚焦毛细管电泳法对双特异性Fc融合蛋白的电荷异质性分析
1
作者
袁国刚
罗顺
+2 位作者
林军
林康
昌根琼
《中国科技期刊数据库 医药》
2024年第3期0129-0132,共4页
建立全柱成像等电聚焦毛细管电泳(WCID-CIEF)分析双特异性Fc融合蛋白电荷异质性方法。方法 通过非还原毛细管电泳法观察酶处理前后峰型的变化,初步确认了该Fc融合蛋白电荷异质性唾液酸相关;结合唾液酸酶酶切和方法优化手段,建立了此融...
建立全柱成像等电聚焦毛细管电泳(WCID-CIEF)分析双特异性Fc融合蛋白电荷异质性方法。方法 通过非还原毛细管电泳法观察酶处理前后峰型的变化,初步确认了该Fc融合蛋白电荷异质性唾液酸相关;结合唾液酸酶酶切和方法优化手段,建立了此融合蛋白的WCID-CIEF分析平台;通过液相质谱法(LC-MS)鉴定了唾液酸相关N-糖构型;通过液相荧光法(LC-FLR)测定了唾液酸的含量。结果 经唾液酸酶酶切和方法优化后,此方法在2.5~7.5 mgmL-1浓度范围内线性良好,R2=0.998,回收率在96.3%~104.6%之间,准确性、专属性和耐用性均满足要求。结论 结合酶处理和方法优化手段,WCID-CIEF可较好地分析融合蛋白的电荷异质性,提供了一种简单、有效的融合蛋白质控手段,并可应用于产品放行及稳定性监测。
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关键词
全柱成像等电聚焦毛细管电泳法
双特异性Fc融合蛋白
唾液酸酶酶切
方法开发和确认
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职称材料
题名
全柱成像等电聚焦毛细管电泳法对双特异性Fc融合蛋白的电荷异质性分析
1
作者
袁国刚
罗顺
林军
林康
昌根琼
机构
江西中医药大学
长三角药物高等研究院
澳斯康生物(南通)股份有限公司
出处
《中国科技期刊数据库 医药》
2024年第3期0129-0132,共4页
文摘
建立全柱成像等电聚焦毛细管电泳(WCID-CIEF)分析双特异性Fc融合蛋白电荷异质性方法。方法 通过非还原毛细管电泳法观察酶处理前后峰型的变化,初步确认了该Fc融合蛋白电荷异质性唾液酸相关;结合唾液酸酶酶切和方法优化手段,建立了此融合蛋白的WCID-CIEF分析平台;通过液相质谱法(LC-MS)鉴定了唾液酸相关N-糖构型;通过液相荧光法(LC-FLR)测定了唾液酸的含量。结果 经唾液酸酶酶切和方法优化后,此方法在2.5~7.5 mgmL-1浓度范围内线性良好,R2=0.998,回收率在96.3%~104.6%之间,准确性、专属性和耐用性均满足要求。结论 结合酶处理和方法优化手段,WCID-CIEF可较好地分析融合蛋白的电荷异质性,提供了一种简单、有效的融合蛋白质控手段,并可应用于产品放行及稳定性监测。
关键词
全柱成像等电聚焦毛细管电泳法
双特异性Fc融合蛋白
唾液酸酶酶切
方法开发和确认
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
全柱成像等电聚焦毛细管电泳法对双特异性Fc融合蛋白的电荷异质性分析
袁国刚
罗顺
林军
林康
昌根琼
《中国科技期刊数据库 医药》
2024
0
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