非酒精性脂肪性肝病合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21和分泌型卷曲相关蛋白5水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21(FGF21)和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其临床意义。方法2020年5月~2023年3月我院诊治的NAFLD患者101例【单纯性脂肪肝(NAFL)64例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)25例和肝硬化(LC)12例】和NAFLD合并T2DM患者81例(NAFL 58例、NASH 16例和LC 7例),检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用ELISA法检测血清FGF21和SFRP5水平。结果NAFLD合并T2DM患者FBG、血清FINS、HOMA-IR和血清FGF21水平分别为(8.7±1.4)mmol/L、(28.9±5.8)μIU/mL、(11.1±2.7)和(304.8±36.0)pg/mL,均显著高于NAFLD患者【分别为(5.5±1.2)mmol/L、(20.8±4.1)μIU/mL、(5.1±1.5)和(267.6±34.5)pg/mL,P<0.05】,而血清SFRP5水平为(6.8±1.2)pg/mL,显著低于NAFLD患者【(10.3±2.2)pg/mL,P<0.05】;NAFLD合并T2DM患者血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平分别为(6.7±1.0)mmol/L、(3.7±0.6)mmol/L、(1.3±0.2)mmol/L和(3.4±0.8)mmol/L,与NAFLD患者【分别为(6.2±0.9)mmol/L、(4.1±0.5)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L和(3.2±0.7)mmol/L】比,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM合并NAFL、合并NASH和合并肝硬化患者血清SFRP5水平分别为(7.8±1.1)pg/mL、(6.4±0.8)pg/mL和(5.1±0.7)pg/mL,显著低于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(11.9±2.1)pg/mL、(9.8±1.6)pg/mL和(8.4±1.1)pg/mL,P<0.05】,而血清FGF21水平分别为(295.6±31.2)pg/mL、(316.8±32.9)pg/mL和(353.6±36.7)pg/mL,显著高于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(255.1±32.5)pg/mL、(279.5±33.4)pg/mL和(309.7±35.8)pg/mL,P<0.05】。结论NAFLD合并T2DM患者血清FGF21水平显著升高,而血清SFRP5水平显著降低,可应用于对病情严重程度的评估,值得深入研究。

旁分泌成纤维细胞生长因子在急慢性肾脏损伤中的研究进展

成纤维细胞生长因子(FGFs)作为一种多功能细胞因子,不仅在胚胎发育、血管形成和组织修复等方面发挥重要作用,还深度参与机体的稳态维持,在血糖调控和能量代谢等方面发挥巨大作用,是多种疾病的潜在候选药物。急性肾损伤和慢性肾脏病导致的肾功能障碍严重危害人们的健康并造成巨大的社会经济负担,目前仍缺少有效的干预手段。本文就旁分泌成纤维细胞生长因子在肾脏发育、急性肾损伤和慢性肾脏病中的研究进展进行综述,以期为急慢性肾脏损伤的临床诊断和治疗提供新靶标。

翼状胬肉术中应用重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶对眼表的保护作用研究

目的:观察翼状胬肉术中应用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)眼用凝胶对眼表的保护作用.方法:选取2019年1月—2021年12月于青岛大学附属威海市立第二医院行翼状胬肉切除加自体角膜缘干细胞移植术的患者60例(60眼),根据治疗方案不同将其分为观察组和对照组各30例.观察组术中应用rb-bFGF保护非手术区眼表,对照组术中使用0.9%氯化钠注射液棉片保持非手术区眼表湿润.比较两组角膜刺激症状评分、角膜上皮完全愈合时间、泪膜破裂时间(BUT)和泪液分泌试验(SIt)结果.结果:术后1、3 d,观察组角膜刺激症状评分均低于对照组;术后1个月,观察组BUT长于对照组,SIt优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).术后,观察组角膜上皮完全愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:翼状胬肉术中应用rb-bFGF眼用凝胶可以有效保护患者眼表组织,减轻患者角膜刺激症状,有利于眼表功能恢复和稳定泪膜.

丹参对体外培养成纤维细胞自分泌生长因子的影响

目的 探讨丹参作用于成纤维细胞 ,减轻创面过度愈合的作用机制。方法 体外培养的成纤维细胞第4～ 6代 ,经不同浓度丹参 (40、80、1 60和 32 0μg/ ml)及不同时间 (1、2、3、4和 5天 )培养后 ,加入丹参 (浓度 60μg/ ml)作用后 ,采用 ELISA法和放射免疫法测定其自分泌转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )及表皮生长因子 (EGF)的变化规律。 结果 丹参可抑制成纤维细胞自分泌 TGF- β1 ,且随浓度的增大及作用时间的延长而增强 ,具有统计学意义 (P<0 .0 5) ;但对EGF的自分泌无抑制作用 (P>0 .0 5)。 结论 丹参可选择性抑制 TGF-β1 的自分泌 ,抑制成纤维细胞的增殖及减少细胞外基质的沉积 。

人成纤维细胞生长因子-21分泌型表达及鉴定

利用基因工程手段,将人成纤维细胞生长因子-21(hFGF21)与分泌信号肽相融合,构建得到能够分泌表达FGF21蛋白的表达载体。将该表达载体导入到Rosetta(blue)宿主细胞中,在分泌信号肽的引导下,在细胞周质中表达。经IPTG诱导表达可获得分子量为21 kD的蛋白,Western-Blotting证明该蛋白为FGF21蛋白。经SDS-PAGE证明获得了可溶性的FGF21蛋白。该方法简化了纯化工序,提高了成品率,使大规模生产重组人成纤维细胞生长因子-21(rhFGF21)成为可能。

原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞自分泌转化生长因子β1浓度检测及对转化生长因子β1增殖的调节

背景:体外实验常采用外源性转化生长因子β1刺激来观察细胞增殖变化,易忽略细胞本身自分泌转化生长因子β1的影响。目的:检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞(L929)自分泌转化生长因子β1的浓度和细胞增殖的变化。方法:Elisa试剂盒检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞各时相点细胞内和培养上清中生长转化因子β1水平。结果与结论:纤维肉瘤细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而升高,原代成纤维细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而降低;两种细胞培养上清转化生长因子β1浓度均随时间而上升,但纤维肉瘤细胞显著高于原代成纤维细胞(P<0.01),峰值时达到原代成纤维细胞的20倍;两种细胞增殖曲线在72h内均随时间而显著增高(P<0.01),同一时间点比较,纤维肉瘤细胞明显高于原代成纤维细胞。提示自分泌转化生长因子β1具有促进细胞增殖的作用,不同的自分泌水平可能是影响原代成纤维细胞这种正常细胞和纤维肉瘤细胞肿瘤细胞对于外源转化生长因子β1反应不同的重要原因。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液治疗白内障术后干眼症的效果

目的探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor,rb-bFGF)滴眼液对白内障术后干眼症患者泪液分泌、角膜损伤和氧化应激指标水平的影响。方法选取接受白内障手术并出现干眼症的患者120例作为研究对象,用随机数字表法分为观察组和对照组,每组60例。对照组用聚乙二醇滴眼液治疗,观察组在此基础上加用rb-bFGF滴眼液治疗。比较2组治疗前和治疗后泪液分泌量[SchirmerⅠ试验(SchirmerⅠtest,SIT)]、角膜损伤程度[角膜荧光素染色(fluorescein staining of the cornea,FL)评分]、泪膜破裂时间(tear film break up time,BUT)和氧化应激指标[超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)和过氧化脂质(lipid peroxide,LPO)],并对临床疗效及安全性进行评价。结果观察组的总有效率高于对照组(P>0.05)。治疗后,2组SIT、FL评分、BUT和氧化应激指标均改善(P<0.05),且观察组改善效果更佳(P<0.05)。2组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论rb-bFGF滴眼液治疗白内障手术后干眼症疗效确切,可显著促进患者泪液分泌,减轻角膜损伤,延长泪膜破裂时间,改善氧化应激指标的水平。

体外培养人成纤维细胞转化生长因子-β_1自分泌规律的研究

目的 探讨体外培养人成纤维细胞转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )的自分泌规律。方法 应用健康人包皮环切术所得包皮 ,通过体外成纤维细胞传代培养共 12代 ,运用 EL ISA法 ,分别检测不同代次成纤维细胞 TGF-β1 浓度 ,并测定第 6代成纤维细胞在不同时间培养上清液中 TGF-β1 的浓度。结果 自第 3代开始 ,成纤维细胞培养上清液可检测到 TGF-β1 ,并逐渐升高 ,至第 6代达分泌高峰 (45 0 ng/ L ) ,第 11、12代不能测到 ;而第 6代成纤维细胞 ,培养上清液中 TGF-β1 含量以第 5天的检测值最高 (6 80 ng/ L ) ,是第 1天检测值 (2 80 ng/ L )的 2 .5倍。结论 成纤维细胞 TGF-β1 自分泌能力 ,是由弱到强再逐渐减弱的过程 。

成纤维细胞生长因子23在血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进症中的作用

目的研究血清成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）在维持性血液透析继发性甲状旁腺功能亢进症患者磷和维生素D 代谢中的作用及相关调控机制.方法：采用酶联免疫分析（ELISA）法对60 例维持性血液透析（MHD）继发性甲状旁腺功能亢进症患者（血透组）及20 例健康志愿者（对照组）进行血清全段FGF23 及1,25-（OH）2D3 水平测定.血透组患者测定血清白蛋白、钙、磷、血红蛋白、肌酐、尿素氮、全段甲状旁腺激素（iPTH）水平.结果：血透组FGF23 水平明显高于对照组〔（272.47±76.53）比（24.27±5.72）ng/ml,（P〈0.01）〕,而血清1,25-（OH）2D3 水平明显低于对照组〔（1361.28±3.91）比（4238.35±5.51）fmol/L,（ P〈0.01）〕,pearson 相关性分析显示,FGF23 与透析龄（r=0.275, P〈0.05）,血磷（r=0.296, P〈0.05）,血钙（r=0.323, P〈0.05）,血iPTH（r=0.721,P〈0.01）呈正相关,而与血1,25-（OH）2D3（r=-0.478, P〈0.01）呈负相关.FGF23与年龄、性别、血白蛋白及血红蛋白指标无相关性.结论：维持性血液透析继发性甲状旁腺功能亢进症患者FGF23 水平明显上升,而1,25-（OH）2D3 水平明显降低.FGF23的调控是由血磷、透析龄、血钙、iPTH、1,25-（OH）2D3 共同作用的结果.

人碱性成纤维细胞生长因子(hu-bFGF)在毕赤酵母中的分泌表达

通过PCR技术从pMD18-T/hu-bFGF质粒中扩增出hu-bFGF基因,并将其克隆到pGEM-T Easy克隆载体中。经测序鉴定后,目的基因通过XhoI和XbaI酶切后,以正确的阅读框插入到pGAPZ-αA的编码-αfactor信号肽序列的下游,构建成pGAPZ-αA/hu-bFGF重组分泌表达载体。表达载体用BlnI线性化处理后电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,转化子经Zeocin抗性筛选、菌落PCR鉴定、SDS-PAGE复筛获得分泌表达hu-bFGF的工程菌。Western Blot结果表明:重组蛋白能够与兔抗人bFGF抗体发生特异性反应,具有良好的抗原性。对工程菌培养条件的优化表明:以麦芽糖为碳源、培养基起始pH值为6.5、培养96 h时重组蛋白的表达水平最高。

血管内皮生长因子对体外培养的人Tenon’s囊成纤维细胞的纤维化及其富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白表达的作用

目的·探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对体外培养的人Tenon's囊成纤维细胞(humanTenon's fibroblast,HTF)的纤维化及其富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)表达的作用。方法·取斜视手术患者的Tenon's囊组织进行培养,并采用免疫荧光技术对获得的HTF进行鉴定。采用不同浓度的VEGF刺激培养HTF,并依据刺激条件将HTF分为4组,即0 ng/mL组、25 ng/mL组、50 ng/mL组和100 ng/mL组。采用蛋白质印迹和实时定量PCR分析SPARC、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein 9,MMP-9)的表达以及胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路磷酸化活性的改变。采用细胞活力测定实验(MTS法)和划痕实验检测HTF的增殖和迁移能力。结果·通过免疫荧光技术及倒置相差显微观察可以鉴定,所培养的原代细胞为HTF。在VEGF刺激作用下,与0 ng/mL组相比,其他3组HTF中的SPARC、collagen-Ⅰ和MMP-9蛋白及其mRNA表达均有所增加,HTF中ERK通路的磷酸化活性均有所上调,HTF细胞的增殖及迁移能力亦均有所增加,且在50 ng/mL组中影响最大。结论·VEGF在促进HTF纤维化的过程中伴随着细胞基质蛋白SPARC的上调,提示SPARC可能是这一过程的潜在调控位点。

透明质酸钠和碱性成纤维细胞生长因子治疗术后干眼症临床观察(英文)

目的:探讨干眼症患者手术后使用不含防腐剂的透明质酸钠和碱性成纤维细胞生长因子滴眼液的疗效。方法:对行眼部手术的干眼症患者132例(149眼),所行手术,眼局部用药情况、手术前、手术后药物治疗2,4wk基础泪液分泌实验和泪膜破裂时间实验的变化情况进行分析:根据病情停用抗生素激素滴眼液,术后第4wk停用透明质酸钠和碱性成纤维细胞生长因子,术后第5wk行基础泪液分泌实验和泪膜破裂时间实验。结果:对眼科手术前、术后药物治疗2,4wk基础泪液分泌、泪膜破裂时间进行比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:干眼症患者术后使用不含防腐剂的透明质酸钠和碱性成纤维细胞生长因子滴眼液治疗,有较好疗效。

维持性血液透析患者成纤维细胞生长因子23水平及其与C反应蛋白相关性研究

成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）23是新近发现的一种相对分子质量约32000的分泌性蛋白。现已明确，FGF23可以通过抑制近端肾小管2a型钠／磷转运蛋白活性来抑制磷的重吸收，其外周血水平随肾功能减退不断升高。

成纤维细胞生长因子23在慢性肾病脏中的检测意义

2000年Yamashita等首先在小鼠体内证实了表达于丘脑腹外侧核的一个分泌蛋白FGF23.随后常染色体显性低磷酸盐性佝偻病（Autosomal dominant hypophosphatemic rickets,ADHR）协作组首次报到了ADHR与FGF23的关系,考虑本病的发生与相关基因缺失引起FGF23的过表达有关.2001年,Shimada等证实导致肿瘤相关骨软化症（Tumor-induced osteomalacia,TIO）肿瘤分泌FGF23过多的关系.十多年来,FGF23作为新发现的磷代谢调节因子备受关注,美国的慢性肾功能衰竭队列（CRIC）研究揭示了FGF23水平对慢性肾脏病（CKD）患者的预后有独立预测作用.针对FGF23的干预治疗可能是延缓CKD进展的重要措施.

成纤维细胞生长因子23与血液透析患者钙、磷代谢紊乱的研究进展

慢性肾衰竭患者存在钙、磷代谢紊乱，既往的研究多集中在甲状旁腺激素-维生素D轴对血磷、钙、甲状旁腺激素（PTH）的调节作用，近来发现骨骼作为一个内分泌器官产生的成纤维细胞生长因子23（Fibroblast growth factors 23，FGF23）作用于肾脏调节钙、磷代谢，由此形成的骨-肾激素轴发挥不同于甲状旁腺激素-维生素D轴的调节磷、维生素D平衡的重要作用。

成纤维细胞生长因子受体在乳腺癌中的研究进展

近年来越来越多的研究发现乳腺癌中存在成纤维细胞生长因子受体（FGFRs）基因扩增／过表达或突变，有些与放化疔、内分泌治疗耐药有关，有些与三阴性乳腺癌有关，并通过大量体外及体内实验发现抑制FGFRs可降低乳腺癌细胞增殖、肿瘤生长及远处转移。本文就FGFRs的结构、信号转导通路、各分子亚型与乳腺癌的关系以及作为治疗靶点的前景作一综述。

成纤维细胞生长因子对内分泌和生殖的调控作用

本文叙述成纤维细胞生长因子的分子特征、分布和合成部位,讨论它在脑下垂体和性腺等器官内的作用,以及转化生长因子β对它的调控。

肿瘤间质细胞分泌成纤维生长因子10促进结肠癌细胞侵袭

目的确定结肠肿瘤间质细胞的旁分泌因子FGF10对肿瘤细胞侵袭的影响。方法体外分离培养结肠肿瘤间质细胞,ELISA检测其FGF10的表达,并与结肠癌细胞系HCT116和SW480共培养。同时设添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系作为试验对照组。Real-time-PCR检测HCT116细胞侵袭相关基因的表达变化。Western blot法检测共培养后结肠癌细胞系中上皮-间质蛋白表达变化。显微镜下计数透过Matrigel包被Transwell膜的细胞数量检测细胞的侵袭能力。结果结肠肿瘤间质细胞高表达FGF10生长因子。结肠癌细胞系HCT116和SW480与TAFs共培养系统中,HCT116和SW480细胞中Twist、Snail、Slug、ZEB1基因的表达上调,Vimentin蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下降,侵袭能力较正常培养细胞显著增强。同时添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系表现出同样的表型变化。结论肿瘤微环境中肿瘤相关间质细胞分泌的FGF10能够增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力。

截短型转化生长因子-βⅡ型受体在皮肤成纤维细胞的过度表达

目的 研究截短型转化生长因子 -β(TGF-β) 型受体在皮肤成纤维细胞的过度表达对 TGF-β1 自分泌的抑制作用。 方法 组织块法体外培养正常皮肤成纤维细胞 ,加入重组人 (rh) TGF- β1 (5ng/ ml)或含截短型 TGF- β 型受体基因的重组腺病毒 (50 pfu/ cell) ,并用 Northern印迹观察其对 TGF-β1 的基因调控。 结果 rh TGF-β1 能上调TGF-β1 和 I型前胶原的基因表达。截短型 TGF-β 型受体的过度表达能减少细胞 TGF-β1 的基因表达。 结论 截短型TGF- β 型受体的过度表达可以通过阻断 TGF- β1 的信号转导来抑制皮肤成纤维细胞 TGF- β1 的自分泌。