甲苯咪唑对旋毛虫幼虫及其寄生肌肉的组织学与组织化学观察

目的 观察甲苯咪唑对旋毛虫幼虫及其寄生的骨骼肌的作用。方法 观察沙鼠感染旋毛虫后的幼虫移行期和成囊期经甲苯咪唑治疗 (即感染后 2 0d、5 0d)幼虫及其寄生肌肉组织的组织学和组织化学的变化。结果 甲苯咪唑治疗后幼虫虫体不完整 ,出现空泡 ,5 0d治疗组囊壁结构明显破坏 ;幼虫SDH、NADH -TR、ATPase活性降低 ,LDH活性增高 ,两治疗组肌肉组织SDH、NADH -TR、ATPase均高于相应对照组 ,而LDH活性低于对照组。结论 甲苯咪唑可以破坏旋毛虫囊包的囊壁 ,损伤虫体 ;可抑制旋毛虫幼虫的有氧代谢 ;治疗后肌肉组织有氧代谢增强 ,而无氧糖酵解减弱。

旋毛虫幼虫收集方法的探讨

本文对旋毛虫幼虫的收集方法进行了研究,结果表明,1%胃蛋白酶和1.5%盐酸的消化液在18～20h 37℃可将感染有旋毛虫的小白鼠、大白鼠及家兔等动物肌肉完全消化。肌肉与消化液的合适比例为1:10(w/v)。收集幼虫时,改良贝氏法和分液漏斗法优于水洗自然沉淀法和离心沉淀法。本文还讨论了影响收集旋毛幼虫的一些因素。

氧自由基与阿苯达唑对旋毛虫幼虫作用关系初探

目的 探讨氧自由基与阿苯达唑对旋毛虫幼虫作用的关系。方法 应用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定用药组及未用药组旋毛虫幼虫和病鼠肝组织、血清中超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)含量的变化。结果 用药组病鼠体内旋毛虫幼虫中SOD和MDA的含量均有明显升高 ,与未用药组相比有显著性差异。病鼠用药后肝组织和血清中SOD和MDA含量略有升高 ,没有显著性差异。结论 阿苯达唑增强氧化损伤作用 ,有助于杀伤旋毛虫幼虫 。

霍乱毒素B亚单位和旋毛虫幼虫抗原诱导黏膜免疫结果分析

目的探讨黏膜佐剂霍乱毒素B 亚单位（CT-B ）在激发旋毛虫感染的黏膜免疫中的作用。方法24只NI H 小鼠随机分为4 组，每组6 只。CT-B 免疫组：每只小鼠于0 、7 、14 d 用含幼虫抗原100 μg 、C T-B 10 μg 的免疫原200 μl 经口灌服；正常对照组；免疫后感染组：免疫方法同CT-B 免疫组，末次免疫后第7 天，每只小鼠用200 条旋毛虫进行感染；单纯感染组：不免疫，与免疫后感染组同时进行感染。CT 蛳B 免疫组与正常对照组在免疫后第7 天、免疫后感染组与单纯感染组在感染后第7 天分别取血检测Ig A 、Ig G 1 、Ig G 2 b ，刮取肠黏液检测sIgA ，检测肠道成虫数，并收集每鼠雌虫，在体外检查其生殖力。结果与单纯感染组相比，CT-B 免疫后感染组肠道成虫数明显减少，雌虫生殖力明显降低，成虫与新生幼虫减虫率分别为88.2%和72.4%。CT-B 免疫组小鼠肠黏液sIg A 、血清Ig A 较对照组小鼠明显提高(0 .2 9 ±0 .04 vs 0.09 ±0.02，0.21 ±0.06 vs 0.08 ±0.01，P <0.001)；而两组Ig G 1 和Ig G 2 b 水平无显著性差异(P>0.05)。CT-B 免疫后感染组小鼠肠黏液sIg A 、血清Ig A 较单纯感染组小鼠相比有显著性差异(0 .5 5 ±0 .28 vs0.08 ±0.15，0.33 ±0.06 vs 0.10 ±0.10，P <0.001)。

中性粒细胞、免疫血清及补体对体外培养旋毛虫幼虫杀伤作用的研究

目的：了解中性粒细胞对旋毛虫是否有杀伤作用。方法：用体外培养方法观察了小鼠腹腔中性粒细胞、中性粒细胞与免疫血清及补体对旋毛虫新生幼虫的杀伤作用。结果与结论：单纯中性粒细胞或其与正常血清对幼虫无杀伤作用；中性粒细胞在抗体及补体参与下，对幼虫杀伤作用明显增强；感染鼠和正常鼠中性粒细胞在抗体参与下对幼虫均有杀伤能力。

旋毛虫幼虫移行期对大白鼠致病作用的探讨

目的 :探讨旋毛虫幼虫感染大白鼠后的致病作用及幼虫移行期所致心、脑、肺的病理变化及超微结构的改变。方法 :将 30只大鼠随机分成 5组 ,对照 1组 ,实验 4例 ,每组 6只 ,实验组每只大鼠经口感染旋毛虫幼虫 80 0条 ,于感染后 1 2天、2 4天、38天、55天分别用 1 %戊巴比妥钠腹腔麻醉处死作解剖 ,肉眼观察心、脑、肺的病变 ,然后制成组织切片。结果 :在光镜及透射电镜下观察 ,大鼠经口感染后不同时间心、脑、肺等组织均有不同程度的炎性病变及超微结构改变。并在心肌间质内可见游走幼虫。结论 :心、脑、肺的病理变化最严重 ,超微结构改变明显。心肌炎、脑炎。

阿苯哒唑对鼠体内旋毛虫幼虫蛋白质、氨基酸及元素含量的影响

目的 :探讨阿苯哒唑对旋毛虫幼虫的驱虫机理。方法 :将感染旋毛虫的小鼠分为对照组和服用阿苯哒唑药物的实验组 ,分别对两组鼠肌肉中提取的旋毛虫幼虫进行了蛋白质、氨基酸及所含元素的检测。结果 :实验组和对照组氨基酸含量的变化表明 :用药前后小鼠的 18种氨基酸含量中 ,分别有 5种氨基酸的含量发生了显著性变化 ;实验组和对照组蛋白质含量的变化表明 :实验组蛋白质含量较对照组含量有明显减少 ;通过比较两组元素含量表明 :10种宏量及微量元素中有 8种元素含量有显著性变化。结论 :阿苯哒唑对鼠体内旋毛虫幼虫主要营养和能量来源的的蛋白质、氨基酸及元素含量有明显的影响 。

犬旋毛虫幼虫在大白鼠、小白鼠、犬体内的分布

旋毛虫病是由毛首目、毛形科的旋毛形线虫引起的人畜共患寄生虫病．可感染包括人在内的１２０多种哺乳动物，可导致人类死亡，因此肉品卫生检验也将旋毛虫病列为首要项目．１材料和方法１．１试验材料虫种：由中国人民解放军农牧大学寄生虫室提供的传代小鼠（长春犬ＩＳＳ...

砧板肉屑中旋毛虫幼虫活性与感染性观察

目的观察砧板上肉屑中旋毛虫幼虫的活性与感染性。方法将100条旋毛虫幼虫感染小鼠40 d的骨骼肌剪为小米粒大小(重约0.007g)的肉屑,平均分为5份,在木质砧板上室温(约25℃)下放置0、2、4、6和8 h,消化后收集幼虫并观察幼虫的活性。将30只雄性昆明小鼠随机分为3组(每组10只),将砧板上放置0、4、8 h肉屑中的旋毛虫幼虫经口感染小鼠,每组小鼠感染300条。感染后40 d剖杀,将全身肌肉消化后收集肌幼虫,测定其生殖力指数(reproductive capacity index,RCI)。结果在砧板上放置0、2、4、6和8 h肉屑中旋毛虫幼虫的死亡率分别为0、0.60%、15.17%、55.63%和79.18%(X^2=46.949,P<0.01);幼虫死亡率随肉屑放置时间的延长而升高(X^2=42.241,P<0.01)。在砧板上放置0、4、8h肉屑中的旋毛虫幼虫接种小鼠后40d,其生殖力指数分别为229.47、135.62和125.01,3组间的差异无统计学意义(F=2.205,P>0.05)。结论在砧板上放置4h和8 h肉屑中的旋毛虫幼虫仍具有感染性。

不同浓度的盐溶液及浸泡时间对旋毛虫幼虫囊包的影响

目的:探讨不同浓度的盐溶液及浸泡时间对旋毛虫幼虫囊包的影响。方法:旋毛虫幼虫感染150只健康小鼠,随机分为30组,每组5只小白鼠,配制0.85%、2.85%、4.85%、8.85%、12.85%、16.85%的不同浓度的盐溶液,每只小鼠饲喂40条经不同浓度盐溶液及浸泡时间处理的旋毛虫幼虫,饲养小鼠50天后解剖,观察旋毛虫囊包活性。结果:旋毛虫幼虫囊包经盐溶液和不同浸泡时间处理后,解剖后镜检发现囊包的情况如下:浸泡1小时后0.85%、2.85%、4.85%、8.85%、12.85%、16.85%全部都发现有旋毛虫囊包,浸泡3小时和6小时后0.85%、2.85%、4.85%、8.85%均发现囊包,剩余两组未发现囊包,浸泡12小时后0.85%、2.85%、4.85%发现囊包,2.85%、4.85%、8.85%未发现囊包,浸泡18小时后都未发现囊包。结论:较高浓度和(或)较长浸泡时间对旋毛虫幼虫囊包有杀灭作用。

瓦房店市饭店食用犬肉的旋毛虫幼虫感染情况调查

近年来,有的地区发生了因食犬肉引起的旋毛虫病。为防止旋毛虫病在我市发生或流行,我们对市内一家朝鲜族饭店屠宰的新鲜犬肉进行了旋毛虫幼虫感染情况的调查。检查标本均取膈肌的不同部位,置两张载物玻片之间轻轻压平,低倍镜(10×10)检查旋毛虫幼虫囊包有无。幼虫囊包阳性者再进行测量和摄影。

旋毛虫幼虫抗原制备,纯化与实验研究

旋毛虫病是一种人兽共患疾病，它严重地威胁人类的健康，并在畜牧业经济上造成巨大损失。其病原体为旋毛线虫，简称旋毛虫。由于旋毛虫是一种多细胞的寄生虫，且不同发育期虫体的生物组成和生理代谢的不同，其抗原成份复杂、变异性较大。故对临床及家畜的早期诊断以及可行性研究，都具一定困难。因此，制备一种特异性强、敏感性高的旋毛虫抗原，提高快速、准确的诊断方法事在必行。本文应用免疫亲和层析技术，提取虫体Ｃ３抗原。

大蒜汁对旋毛虫幼虫杀灭效果研究

目的通过比较经不同浓度大蒜汁浸泡含旋毛虫肌幼虫的肉块对小鼠感染力的影响,来评估大蒜汁对旋毛虫幼虫的杀灭效果。方法 30只昆明小鼠分为5组,喂食经不同浓度的大蒜汁(浓度分别为100.00%、50.00%、25.00%、12.50%)和生理盐水浸泡半小时含有旋毛虫肌幼虫的肉,饲喂30d后剖杀小鼠,观察和计数肌幼虫数。结果小鼠饲喂经100.00%、50.00%、25.00%、12.50%浓度大蒜汁和生理盐水浸泡半小时含有旋毛虫肌幼虫的肉后,在单位肌肉中检出旋毛虫肌幼虫数为0条、10条、60条、140条和235条。结论含旋毛虫肌幼虫的肉经一定浓度的大蒜汁浸泡后其旋毛虫肌幼虫的感染力会降低。

旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原诱导的肠道免疫保护作用研究

目的 研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(Trichinella spiralis muscle larvae excretory-secretory, Ts-Es)诱导小鼠肠道保护性免疫能力以及免疫调节作用。方法 54只BALB/c小鼠随机分为3组,空白对照组、旋毛虫感染组(Ts)、旋毛虫Ts-Es抗原免疫组(Ts-Es)。空白组小鼠腹腔注射PBS;抗原免疫组小鼠腹腔注射0.1 mL的Ts-Es抗原与等量弗氏完全佐剂;旋毛虫感染组腹腔注射PBS和弗氏完全佐剂,每隔7 d注射1次,共3次,末次注射后7 d旋毛虫感染组和Ts-Es抗原免疫组用400条/mL旋毛虫感染性幼虫灌胃攻击感染。解剖取材,检查肠道成虫及肌肉幼虫减虫率,用HE染色法观察肠道病理变化,RT-qPCR法检测小肠中目的基因mRNA表达水平。结果 与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组成虫和肌幼虫减虫率分别为49%(t=8.109,P<0.05)和67%(t=8.090,P<0.05);与空白对照组相比旋毛虫感染组小肠T-bet(t=5.25,P<0.05)、GATA3(t=2.50,P<0.05)、RORγ-t(t=4.71,P<0.05)、IFN-γ(t=3.17,P<0.05)、IL-4(t=2.60,P<0.05)、IL-5(t=3.05,P<0.05)、IL-17A(t=4.88,P<0.05) mRNA表达量升高,Foxp3表达量没有统计学差异(t=1.55,P>0.05);与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组T-bet(t=4.23,P<0.05)、RORγ-t(t=4.30,P<0.05)、IFN-γ(t=3.02,P<0.05)、IL-17A(t=3.17,P<0.05) mRNA表达量下降;GATA3(t=3.96,P<0.05)、Foxp3(t=2.76,P<0.05)、IL-4(t=5.16,P<0.05)、IL-5(t=3.69,P<0.05)、IL-10(t=2.61,P<0.05) mRNA表达量升高;与空白对照组相比Ts-Es抗原免疫组GATA3(t=6.4,P<0.05)、Foxp3(t=4.32,P<0.05)、IL-10(t=2.6,P<0.05)、IL-4(t=7.26,P<0.05)、IL-5(t=6.3,P<0.05) mRNA表达量升高均有统计学差异;RORγ-t(t=0.41,P>0.05)、T-bet(t=1.02,P>0.05)、IFN-γ(t=0.09,P>0.05)、IL-17A(t=1.80,P>0.05) mRNA表达量无统计学差异;肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转,肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转。结论 Ts-Es抗原免疫小鼠后可诱发转录因子GATA3,Foxp3相关的混合型免疫应答,并抑制旋毛虫感染引起的T-bet、RORγ-t所介导的炎症型免疫反应,抑制炎型细胞因子的释放,诱导宿主产生抗旋毛虫感染的免疫保护效果。

中性粒细胞体外杀伤旋毛虫肌幼虫的实验观察

目的探讨感染旋毛虫大鼠中性粒细胞(Neu)在免疫血清协助下对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用。方法采用体外CO2培养法,按分组设计在96孔细胞培养板的板孔中加入Wistar雄性大鼠血液中的Neu、旋毛虫肌幼虫、血清(对照血清或经不同条件处理的血清)及含有10%灭活小牛血清的R/MINI-1640培养液,连续培养2d。显微镜下,在12、24、36、48h等时相观察大鼠Neu、免疫血清及补体对旋毛虫肌幼虫的影响。结果无论是感染鼠或正常鼠的单纯Neu或正常血清对旋毛虫肌幼虫均无杀伤作用。在免疫血清及补体参与下,Neu对幼虫的杀伤作用明显增强,同时灭活补体和IgE与仅灭活补体的免疫血清效果相似。结论在体外培养的条件下,感染鼠或正常鼠的单纯Neu或正常血清均无杀伤旋毛虫肌幼虫的作用,感染旋毛虫大鼠的Neu在免疫血清及补体的协助下对旋毛虫肌幼虫具有较强的杀伤作用。免疫血清在灭活IgE前后对Neu杀伤靶虫作用不明显,说明Neu介导的ADCC效应主要依赖的是IgG,并非IgE。

旋毛虫新生幼虫T668重组抗原对小鼠的保护性免疫

目的 研究旋毛虫新生幼虫T6 6 8重组抗原的免疫原性 ,制备基因工程疫苗。方法 以旋毛虫新生幼虫期特异性基因T6 6 8在大肠杆菌中的表达蛋白为抗原免疫小鼠 ,每间隔 10d免疫 1次 ,共免疫 3次。末次免疫后 10d ,每只小鼠攻击感染 2 0 0条旋毛虫感染性肌幼虫 ,感染后 5周用消化法检查肌幼虫 (ML)负荷。结果 T6 6 8重组抗原免疫组肌幼虫减虫率明显高于佐剂组和对照组。结论 T6 6 8重组抗原能诱导小鼠产生一定程度的保护性免疫 ,且可激发特异性体液免疫。

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46～58kD蛋白的纯化

证实了以转移于硝酸纤维膜（NC，paper）的标准蛋白为参照标准（Marker）用SDS－PAGE结合电洗脱技术，分离纯化靶蛋白的可行性。用该技术分离井纯化了旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（TsL1－ES）中具免疫原性的抗原组份－46～58kD蛋白，获得近2mg具有明显免疫反应性的高纯度的靶蛋白组份。为进一步研究该特异性抗原组份的诊断价值和保护性免疫作用提供了先决条件。