旋转培养仪在细胞培养中的应用

目的:探讨旋转细胞培养仪(rotarycellculturesystem,RCCS)在组织工程学中的应用及组织工程学研究中 种子细胞的扩增方法问题。方法:将多孔羟基磷灰石(poroushydroxyapatite,PHA)与骨髓基质细胞(bonemarrow stromalcells,BMSC)在旋转培养仪中进行旋转复合培养,电镜(scanelectricmicrocopy,SEM)观察细胞在PHA上 的生长和增殖情况,与培养板培养法对比。并行AKP染色。结果:普通培养板中细胞主要黏附在PHA与培养 板相接触的一侧,在载体的内部难以见到细胞分布。试验组中细胞均匀分布于材料的各个部位,细胞突起相 连,交织呈网状。试验组中细胞数量多于对照组。AKP染色与旋转培养前无变化。结论:应用旋转细胞培养仪 进行三维立体培养有利于细胞在支架上生长,提高细胞数量,改善细胞状况。对细胞分化无影响。

改良纤维蛋白胶软骨膜块在模拟微重力培养下修复关节软骨缺损

目的观察在模拟微重力条件下改良纤维蛋白胶支架软骨膜块修复关节软骨缺损的影响。方法将兔软骨细胞种植到经抑肽酶和氨甲环酸改良的纤维蛋白胶支架材料上,然后分别在旋转培养仪和培养板中培养,体外培养2周。然后将培养出的软骨膜块植入于动物关节软骨缺损模型中,并设立对照组定期进行大体、组织形态学观察、生化指标检测及组织工程学评分。结果①采用改良支架的复合物经体外培养2周,基本保持了原有塑形;②修复关节软骨效果由好至差的顺序为旋转培养组、普通培养组、单纯改良支架组、空白对照组。组织工程学评分通过统计学处理各组之间存在显著性差异(P=0.01)。结论①经过改良的纤维蛋白胶支架,其降解速率与软骨组织基质形成同步,能长时间支持体内、外软骨组织的形成,并适合旋转培养,是软骨组织工程中适宜的支架;②旋转培养仪提供的模拟微重力环境,可以提高工程化软骨的质量,为实现关节软骨损伤的修复提供有效途径。

模拟微重力对改良纤维蛋白胶软骨细胞复合物培养的影响

目的:研究模拟微重力条件对体外构建工程化软骨的影响。方法:将兔软骨细胞种植到经抑肽酶和氨甲环酸改良的纤维蛋白胶支架材料上;设旋转培养组和静态对照组,体外培养3周,对复合物进行组织学观察和生化指标检测。结果:采用改良支架的复合物经体外培养3周,软骨基本保持了原有塑形;相对于静态培养组,旋转培养组DNA、GAG的合成量增加,并在第3周出现显著性差异。结论:经过改良的纤维蛋白胶支架能较长时间支持体外软骨组织的形成;旋转培养仪提供的模拟微重力环境可提高工程化软骨的质量,为实现关节软骨损伤的修复提供有效途径。