第22种氨基酸和无义密码子的重新诠释

遗传密码字典的破译 ,通用性作为遗传密码的基本特点之一被人们认可 .近年来的研究发现了一些例外 .除线粒体使用一组密码子其含义有别于核基因之外 ,原先被认为仅用作终止信号的无义密码子在某些情况下可重新诠释 ,编码特定的氨基酸 .在揭示了硒代半胱氨酸由UGA编码后 ,最近的研究表明 ,在某些古细菌和真细菌中 ,无义密码子UAG可重新诠释 ,编码组成蛋白质的第 2

终止密码子位点及无义突变介导的mRNA降解途径抑制对抗早发性无义突变药物atalruen通读效率的影响

目的探讨终止密码子上下文结构和无义突变介导的m RNA降解途径(NMD)抑制对抗早发性无义突变(PTC)药物atalruen通读效率的影响。方法利用聚合酶链反应(PCR)定点突变的方法构建双荧光哺乳动物表达载体的早发性无义突变体p Ds Red-EGFPmtag-Y596X和p Ds Red-EGFPmtag-Y653X,转染哺乳动物细胞COS7,抗早发性无义突变药物atalruen,结合si RNA-upf1、放线菌酮(CHX)共同作用转染细胞,采用实时荧光定量PCR反应检测突变体上红色荧光蛋白(Ds Red)和绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,测定通读效率。结果PTC突变体p Ds Red-EGFPmtag-Y653X对atalruen的促通读敏感性显著大于p Ds Red-EGFPmtag-Y596X;si RNAupf1和CHX抑制NMD对atalruen的促通读效率没有显著影响。结论 PTC位点的+4位核苷酸对于atalruen的促通读效率十分关键,该位置是胞嘧啶(C)的突变体敏感性要显著大于腺嘌呤(A);atalruen与常见促通读氨基糖苷类药物不同,不能协同NMD途径的抑制来促进早发性无义突变的通读。

无义密码对线粒体密码进化的影响

遗传密码的起源与进化是理论生物学研究的一个基本问题.以线粒体密码为例,讨论密码进化关系构建的不同规则,分析密码进化中重要影响因素——无义密码子的再定义及其逆过程.终止信号与氨基酸间的距离是密码进化关系构建中的关键,在密码进化中无义密码子突变可以频繁进行,存在干涉现象,且进化倾向于无义密码子减少的方向.

Coffin-siris综合征1例并文献复习

目的探讨Coffin-siris综合征(CSS)患儿的临床特征和基因特点。方法收集2018年2月至2019年2月在中山大学附属第六医院儿科确诊的1例CSS患儿的临床表现、实验室检查及基因检测等临床资料,并以“Coffin-siris综合征”、“ARID1B”、“Coffin-siris syndrome”为关键词,对中国知网、万方数据知识服务平台及PubMed 2010年1月至2019年11月收录的论文进行检索。总结CSS患儿的临床表现及基因特点。结果CSS患儿具有独特的面部特征,特定的骨骼四肢畸形,发育和认知迟缓,智力障碍,听力及言语障碍等。ARID1B基因突变,几乎都是自身新发突变,致病变异体几乎都是截断的。本例患儿检测到ARID1B基因杂合变异c.2248C>T(p.R750*),为无义突变,其父母没有携带这个变异,提示突变属于自身新发突变。结论CSS主要是由ARID1B基因变异导致,几乎为自身新发突变,尚未发现明显的基因型-表型相关。本例患儿ARID1B基因杂合变异c.2248C>T(p.R750*),属于自身新发突变,国内未见相关基因报道,可以丰富我国CSS的基因突变谱。

常染色体显性遗传视锥-视杆营养不良一家系的基因突变检测

视锥视杆营养不良（CORDD）为高度临床异质性和遗传异质性眼病,以视锥细胞受损为主,伴不同程度的视杆细胞损伤[1-3].目前,已明确的CORD致病基因已有25个[1-3].其中,常染色体隐性遗传基因 13个;常染色体显性遗传基因10个;X连锁遗传基因 2个.本研究对1个南方汉族常染色体显性遗传CORD家系的视锥视杆同源盒（CRX）基因突变谱进行了测序验证.现将结果报道如下.

痣样基底细胞癌综合征一家系PTCH1基因突变分析

目的 对痣样基底细胞癌综合征一家系进行PTCH1基因突变分析.方法 提取先证者（Ⅱ5）及Ⅱ1、Ⅱ3、Ⅲ4的DNA,以50例健康人为对照.应用聚合酶链反应（PCR）、DNA直接测序明确突变位点,根据突变位点设计特异性引物,用PCR来检测突变位点从而进一步确定该家系的致病原因.结果先证者PTCH1基因的1条等位基因第14号外显子上2137位胞嘧啶C被胸腺嘧啶T替代（c.2137C＞T）,即CAG→TAG,导致终止密码产生（Q714X）,Ⅲ4也检测到相同突变.健康对照者中未检出该突变.结论PTCH1基因的无义突变（c.2137C＞ T）可能是引起该患者临床症状的特异性突变.

二氢乳清酸脱氢酶突变对米勒综合征患者体内蛋白及功能的研究

目的基于已知临床突变类型,即G202A、R346W和R135C,观察突变后相应蛋白功能变化。方法建立可稳定表达米勒综合征致病突变型G202A、R346W和R135C的宫颈癌细胞系。通过免疫组织化学和线粒体分层定位研究相应蛋白的线粒体定植功能、蛋白稳定性和酶活性。结果二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)3种突变蛋白线粒体定植功能均未受影响,表达后均存在于线粒体内膜内。突变体G202A和R34W的蛋白稳定性降低;突变体R135C、蛋白稳定,但基底诱导酶活性受损致相应线粒体内酶活性缺失。结论 DHODH功能受损可能与米勒综合征症状相关联。