无创产前DNA检测技术的临床应用研究进展

我国是出生缺陷高发国家,有效的产前筛查技术是降低出生缺陷的关键。无创产前DNA检测(NIPT)是运用新一代DNA测序技术对母体外周血浆中胎儿游离DNA片段进行测序,并将测序结果进行生物学分析,进而得到胎儿的遗传信息。目前被广泛应用于临床进行产前筛查。本文现就NIPT的诞生、临床应用筛查胎儿染色体非整倍体、微缺失/微重复综合征、单基因疾病及局限性和未来发展方向进行综述。

无创产前DNA检测技术在筛查妊娠双胎染色体异常中的应用研究

目的探究并分析无创产前DNA检测技术在筛查妊娠双胎染色体异常中的应用价值。方法选取2022年12月—2023年12月期间在周口市妇幼保健院接受无创产前DNA检测技术筛查的双胎妊娠孕妇200例作为此次研究对象,抽取研究对象外周血液样本并进行前瞻性研究,对研究对象的无创产前DNA检测检测结果提示为低风险的197例妊娠双胎孕妇进行随访,记录年龄、孕周以及绒毛膜性、妊娠方式及无创产前DNA检测结果、临床核型、分娩方式、妊娠结局、检测结果、T21高风险病例及不适用人群。结果(1)无创产前DNA检测结果显示妊娠双胎染色体异常的有3例,21-三体高风险(T21)、18-三体高风险(T18)和微缺失各1例,且3例阳性检出者均接受了羊水穿刺,穿刺结果显示有1例为真阳性,染色体异常类型为微缺失,其余2例为假阳性。研究后,无创产前DNA检测筛查妊娠双胎染色体异常的联合阳性预测值(PPV)为33.33%(1/3)。(2)在无创产前DNA检测筛查中,微缺失的联合阳性预测值为100%(1/1)。(3)随访结果分析:显示双胎妊娠染色体异常阳性的孕妇选择减胎手术,另2例经证实为假阳性的孕妇未做其他干预,足月妊娠后分娩,且娩出的新生儿表型均无异常。对无创产前DNA检测结果提示为低风险的197例妊娠双胎孕妇进行随访。结果显示:分娩正常表型双胞胎的足月妊娠孕妇189例,占比95.94%(189/197);不良妊娠结局:2例早产,2例低体重儿,1例脐疝,1例多囊肾,共6例,占比3.05%(6/197),但未有智力障碍、染色体异常容貌等不良妊娠结局;另2例流产,占比1.02%(2/197)。(4)分析无创产前DNA检测假阳性结果的原因:相关研究表明,导致此技术在妊娠双胎染色体异常筛查时出现假阳性的主要原因包括母体肿瘤、染色体拷贝数变异以及限制性胎盘嵌合等。(5)21-三体高风险(T21)、18-三体高风险(T18)和13-三体高风险各1例,通过染色体核型检查过后显示双胎之一为T21;剩余197例孕妇检测结果呈低风险,且染色体核型均未发生异常表现,经无创产前DNA检测结果分析:ART阳性率为3.16,假阳性率为1.05,其敏感度为100%,特异度为99%,检出率100%;血清学筛查(1∶1000~1∶270)阳性率为1.10%,敏感度、特异度、检出率均为100%;年龄≥35岁阳性率为7.69,敏感度、特异度、检出率均为100%。无漏诊病例,T18、T13暂未出现阳性病例,T21均正确识别检测。因此,若无创产前DNA检测的筛查结果与羊水穿刺结果不一致时,还需要医务工作者对孕妇及家属做好安抚和解释工作,还应结合其他检测结果合理引导染色体异常高风险孕妇进行羊水穿刺检验,以便进一步明确有无异常。结论作为一种筛查技术,无创产前DNA检测在妊娠双胎染色体异常时的阳性预测值有限,筛查的效果不够理想,在妊娠双胎染色体异常筛查中还需慎重选择此技术。

DNA无创产前检测及彩色多普勒超声检查在高危孕妇胎儿 染色体异常筛查中的应用价值

目的探讨DNA无创产前检测(NIPT)及彩色多普勒超声(简称彩超)检查在高危孕妇胎儿染色体异常筛查中的应用价值。方法选取2020年1月至2022年12月于该院接受产前检查的5862例高危孕妇作为研究对象,均接受NIPT、彩超检查,以羊水穿刺结果或分娩结局作为诊断胎儿染色体异常的金标准,比较NIPT、彩超检查及二者联合检查对高危孕妇胎儿染色体异常的诊断效能。结果5862例高危孕妇中共检出167例胎儿染色体异常,检出率为2.85%。167例胎儿染色体异常中胎儿染色体数目异常161例,构成比为96.41%;胎儿染色体结构异常6例,构成比为3.59%。彩超检查共诊断出119例孕妇胎儿染色体异常,经一致性分析,彩超检查诊断胎儿染色体异常的灵敏度为0.713,特异度为0.884,准确率为87.96%,Kappa=0.215,P<0.05。NIPT共诊断出133例孕妇胎儿染色体异常,经一致性分析,NIPT诊断胎儿染色体异常的灵敏度为0.796,特异度为0.945,准确率为94.05%,Kappa=0.408,P<0.05。彩超检查联合NIPT共诊断出158例孕妇胎儿染色体异常,经一致性分析,二者联合检查诊断胎儿染色体异常的灵敏度为0.946,特异度为0.986,准确率为98.50%,Kappa=0.775,P<0.05。结论NIPT与彩超检查用于筛查高危孕妇胎儿染色体异常均具有一定价值,二者联合检查可获得更高的灵敏度、特异度和准确率,能有效降低漏诊及误诊风险。

无创产前DNA检测在性染色体非整倍体筛查中的效果评价

目的探讨无创产前DNA检测(NIPT)技术筛查胎儿性染色体非整倍体(SCAs)的准确性,为临床应用NIPT筛查SCAs提供参考。方法追踪随访175例NIPT提示SCAs高风险的孕妇及其胎儿,荧光原位杂交(FISH)检测孕妇外周血性染色体,羊水穿刺检测胎儿染色体核型及染色体拷贝数变异(CNVs)。结果175例孕妇外周血染色体核型为46,XX者160例,47,XXX者4例,性染色体嵌合者11例。羊水穿刺结果发现胎儿性染色体正常者133例,4例核型为45,X0,4例为47,XXX,18例为47,XXY,5例为47,XYY,3例为46,X,del(X),1例为46,X,psu idic(X),嵌合者7例。胎儿CNVs结果除性染色体嵌合比例与染色体核型结果略有差异外,其余基本一致,未发现新的CNV异常。结论NIPT用于产前筛查SCAs具有较高的临床应用价值和发展前景,但其准确性还有待提高。

无创产前DNA检测与传统产前诊断在产前诊断中的临床对比研究

讨论产前诊断中实施无创产前DNA检测与传统产前诊断的临床价值。方法 按回顾分析法选取2019年1月1日—2019年12月31日无创高风险在我院接受羊水穿刺孕妇实施传统产前诊断为对照组,并选取2019年1月1日—2019年12月31日在我院接受无创DNA检测孕妇为实验组,实验组为3405例,对照组为3405例,分别比较两组的诊断价值。结果 无创DNA检测结果显示阳性为20例,其中13-三体异常检验阳性具有7例,实施羊水染色核型诊断中具有0例为13-三体染色体异常;18-三体异常检验阳性具有3例,实施羊水染色核型诊断中具有0例为18-三体染色体异常;21-三体异常检验阳性具有10例,实施羊水染色核型诊断中具有6例为21-三体染色体异常,2例为正常;性染色体异常26例,其中23例实施羊水染色核型诊断中具有13例正常,10例为性染色体异常;3号染色体异常检验阳性具有1例,实施羊水染色核型诊断中具有1例为3号染色体异常;8号染色体异常检验阳性具有1例,实施羊水染色核型诊断中具有1例为8号染色体异常;11号染色体异常检验阳性具有1例,其拒绝进一步检查。结论 羊水穿刺对高风险人群染色体具有显著产前诊断价值,能够为遗传咨询、优生优育奠定重要参考依据,已成为产前诊断中不可替代的技术。而无创产前DNA检测能够精准检测染色体数量异常,且具有创伤小、安全性高等优势,已成为产前筛查的首选项目。

无创产前基因检测技术对产前筛查指标异常孕妇的应用价值

本研究的主要目的是评估无创产前基因检测技术(NIPT)在产前筛查中对于指标异常孕妇的实际应用价值。方法 通过对比500例孕妇(分为观察组和对照组,每组250例)分别采用无创产前DNA检测和唐氏筛查的结果,结果 发现无创产前DNA检测的阳性率(0.04%)显著低于唐氏筛查(0.12%)。同时,无创产前DNA检测的诊断准确率(96.00%)明显高于唐氏筛查(88.00%),且差异具有统计学意义(X2=10.8664,P=0.0064)。因此,无创产前基因检测技术为产前筛查提供了一种更为准确、可靠的方法,对确保母婴健康具有重要意义。无创产前DNA检测组并发症率为0%,明显低于唐氏筛查组4%,差异具有统计学(X2=10.2064,P=0.0064)。结论 无创产前基因检测技术对于诊断21-三体综合征和18-三体综合征,具有较高的诊断准确率,假阳性率低,无并发症,具有很高的临床应用价值。

外周血无创DNA检测技术在产前诊断中的应用价值

研究产前诊断中使用外周血无创DNA检测技术的价值。方法 选择500例孕妇,经2022年1月-12月随访,随机进行唐氏筛查和外周血无创DNA检测,分别设定为对照组和观察组各为250例,并分析诊断的各项情况。结果 无创产前DNA检测对产前筛查高风险和高危因素检测几率高;观察组的阳性率分析(21-三体综合征、18-三体综合征)均较对照组高;观察组的诊断准确率高于对照组;观察组的并发症情况、诊断费用较对照组少,差异明显(P<0.05)。结论 外周血无创DNA检测技术应用于产前诊断价值高,能有效解决传统产前诊断不足,且该技术容易使产妇接受,适合推广和应用。

556例产前无创DNA检测结果呈假阳的孕产妇受检指征及部分病例胎盘组织和母血染色体分析

目的对556例产前无创DNA检测结果呈假阳的孕产妇的临床检测指征及部分病例的胎盘组织和母血进行染色体核型分析,以总结更优的检测指征,明确假阳性原因。方法NIPT结果假阳性孕产妇556例,均进行产前胎儿染色体核型分析确诊,其中34例孕产妇留取胎盘组织和母血进行假阳性原因验证。回顾性分析NIPT结果假阳性的孕产妇人群受检指征及结果异常原因。结果NIPT结果假阳性人群中,高龄、唐筛高风险、唐筛临界风险、NT增厚、超声软指征异常、超声结构异常、双胎/IVF-ET妊娠、错过血清学筛查时机、自愿要求、介入手术禁忌以及除外上述指征的其他分别为235、16、105、3、2、3、17、1、157、0、17例,构成比分别为42.27%、2.88%、18.88%、0.54%、0.36%、0.54%、3.06%、0.18%、28.24%、0.00、3.06%。生后假阳性原因验证结果:母体染色体嵌合17例(50.00%),母体染色体拷贝数异常10例(29.41%),限制性胎盘嵌合(指染色体异常仅发生在形成胎盘的细胞系中而未发生在形成胎儿的细胞系中)7例(20.59%)。其中NIPT检测结果性染色体异常的假阳性原因主要是母体染色体嵌合[87.5%(14/16)],常染色体异常的假阳性原因是母体染色体拷贝数异常[44.44%(8/18)]。结论NIPT筛查假阳性的人群以高龄孕妇为主,NIPT结果假阳性的主要原因是母体染色体异常和限制性胎盘嵌合。

超声测量前额空间比联合无创产前DNA筛查早孕期胎儿染色体异常的临床价值

目的应用超声测量前额空间比(PFSR),探讨其联合无创产前DNA检测(NIPT)在早孕期胎儿染色体异常筛查中的临床应用价值。方法选取在我院接受早孕期羊水穿刺染色体核型检测的高危孕妇80例,均行产前超声检查及NIPT,以羊水穿刺染色体核型检测结果为金标准,比较超声测量PFSR、NIPT及两者联合应用筛查早孕期胎儿染色体异常的诊断效能。结果80例高危孕妇中,羊水穿刺染色体核型检测筛查胎儿染色体异常11例,其中21-三体综合征6例,18-三体综合征2例,13-三体综合征2例,Turner综合征1例。超声测量PFSR筛查早孕期胎儿染色体异常的灵敏度、特异度及准确率分别为63.64%、86.96%、83.75%;NIPT的灵敏度、特异度及准确率分别为72.73%、88.41%、86.25%;两者联合应用的灵敏度、特异度及准确率分别为90.91%、98.55%、97.50%,均高于单一方法,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论超声测量PFSR联合NIPT能提高筛查早孕期胎儿染色体异常的诊断效能,具有较好的临床应用价值。

孕妇血浆游离DNA无创产前筛查检测失败及相关妊娠结局

孕妇血浆游离DNA(cell-free DNA,cfDNA)无创产前筛查(noninvasive prenatal screening,NIPS)是胎儿常见染色体非整倍体最有效的一种产前筛查方法,国内外已广泛开展。值得注意的是,该技术存在无法避免的检测失败,且近几年的一些研究报道发现,这种检测失败可能与胎儿染色体非整倍体和妊娠相关并发症发生存在一定相关性。目前,这方面的报道文献还相对有限,临床意义尚未完全明确。本文将回顾研究报道,探讨无创产前筛查检测失败原因及与胎儿染色体非整倍体、妊娠并发症相关性,探索在检测失败后对孕妇进行临床咨询和妊娠管理指导的理论依据。

低胎儿DNA浓度样本重采血行无创产前检测成功的相关因素分析

目的探讨影响低胎儿DNA浓度样本重采血复测成功的相关因素。方法回顾性收集2018年1月至2020年12月期间在南京医科大学附属苏州医院做NIPT检测,且首次检测因胎儿DNA浓度低检测失败的单胎孕妇的临床资料,根据重采血复测后是否获得有效结果分为成功组和失败组,分析其母体特征、NIPT检测结果,采用多因素Logistics回归分析影响重采血复测成功的因素。结果因胎儿DNA浓度低首次NIPT检测失败的的样本157例,重采血复测后有94例(59.87%)样本检测成功获得结果,63例(40.13%)仍因胎儿DNA浓度低检测失败,最终检测失败率0.138%(63/45500)。比较重采血后成功组和失败组样本信息发现:两组样本的重采血孕周和首次检测的胎儿DNA浓度有显著性差异(P<0.05),孕周>19周或首次检测胎儿DNA浓度>3%的样本重采血再检测获得有效NIPT结果的成功率更高。结论重采血可以降低NIPT检测失败率。重采血孕周和首次检测的胎儿DNA浓度是影响重采复测成功的主要因素。临床医生可以结合这两个参数,给孕妇咨询时选择重采血NIPT检测、其他筛查还是介入性产前诊断提供参考意见。

子宫肌瘤孕妇无创产前DNA检测的结果分析

目的探究子宫肌瘤对孕妇无创产前DNA检测结果的影响。方法回顾性分析中山大学附属第一医院2020年4月1日至2021年12月31日的3876例孕妇的无创产前DNA检测的结果,对比分析361例子宫肌瘤患者和同期3515名健康人群的检测结果。结果无创产前DNA检测在UM组中的阳性率为3.32%(12/361),明显高于对照组的阳性率0.68%(24/3515),差异具有统计学意义(χ^(2)=24.82,P<0.05),且UM组的假阳性率2.79%(10/359)也明显高于对照组0.31%(11/3502),差异具有统计学意义(χ^(2)=36.76,P<0.05)。NIPT在UM组中的灵敏度、阴性预测值高达100%,但特异度为97.21%(349/359)低于健康人群组的99.69%(3491/3502),且阳性预测值为16.67%(2/12),明显低于对照组的54.17%(13/24),在18号染色体和XXX中的阳性预测值低至为0;UM组的假阳性结果也是以18号染色体三体和XXX为主。结论无创产前DNA检测在子宫肌瘤孕妇的胎儿染色体非整倍体检测中具有较高的应用价值,但其存在假阳性率偏高及阳性预测值低的问题,阳性结果需结合产前诊断、临床表现进行综合判断。

高通量无创DNA产前检测技术对胎儿染色体疾病的诊断价值

目的探讨高通量无创DNA产前检测(NIPT)技术在胎儿染色体疾病中的应用价值。方法孕12～26+6周的孕妇3 477例,抽取其外周血行NIPT检查,对NIPT检出染色体非整倍体高风险孕妇行羊水细胞核型分析,对比NIPT检测结果与羊水细胞核型分析结果的差异。结果 (1) 3 477例孕妇,NIPT检出染色体非整倍体高风险34例(0. 98%),其中21-三体高风险10例,18-三体高风险2例,13号染色体高风险2例,性染色体异常20例,不同年龄段孕妇染色体异常阳性检出率比较,差异有统计学意义(P <0. 05);> 40岁组的异常染色体阳性检出率高于35～40岁、<35岁组(P <0. 05)。(2) 34例高风险孕妇中,有31例行羊水穿刺细胞核型分析检查,结果确诊胎儿染色体异常20例,NIPT诊断假阳性11例。(3) NIPT检测21-三体、18-三体、47,XXX/XXY和47,XYY类型的胎儿染色体非整倍体异常的灵敏度均为100%,特异度均大于99%。结论 NIPT检测对21-三体(除嵌合体)、18-三体以及性染色体三体型(47,XXX/XXY/XYY)有较高的灵敏度和特异度,但对性染色体(45,XO)异常检测的准确性仍有待从技术上进一步提高,NIPT结果异常的孕妇仍需羊水穿刺行核型分析确诊。

荧光原位杂交技术对无创DNA产前检测阳性病例的诊断价值

目的:探讨荧光原位杂交检测技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)对无创DNA产前检测(noninvasive prenatal testing,NIPT)阳性病例的诊断价值。方法:对22例NIPT阳性病例的未培养羊水利用FISH技术进行胎儿13、18、21、X和Y染色体数目的检测,同时将所有病例的羊水或脐血细胞培养行常规染色体G显带染色体核型分析。应用Kappa检验比较FISH和染色体核型分析检测结果的一致性并进行分析。结果:22例样本FISH检测结果中,18例检测出胎儿染色体非整倍体异常,包括13-三体2例、21-三体11例、18-三体1例、XXY/XY嵌合型1例、XXY型1例、XXXXY型1例、XYY型1例,余下4例未发现染色体数目异常。FISH检测结果与染色体核型分析结果一致性极强(κ=1)。结论:NIPT存在假阳性结果,阳性病例必须进行进一步产前诊断,FISH技术具有快速,简便,准确的技术特点,是快速确诊的有效手段。

无创DNA检测技术在产前胎儿非整倍体筛查中的应用

目的:探讨无创DNA检测技术在孕妇产前临床检测中的应用。方法:对276例孕妇进行胎儿无创DNA产前检测,包括高龄(年龄≥35岁)、唐筛结果为高风险或单项指标异常、超声软指标异常者。结果:276例中,267例检测为低风险,9例检测为高风险。高风险包括5例提示21-三体综合征、2例提示18-三体综合征、1例提示13-三体综合征、1例提示胎儿性染色体DNA含量不足。9例异常者经羊水和脐血穿刺检测证实与无创DNA结果吻合,准确率为100%。结论:无创DNA产前检测针对胎儿21-、18-、13-三体综合征筛查,具有简单安全、可靠等优点,较血清学筛查有着无可比拟的优越性。这项技术大大减少了有创产前诊断人数,将作为一种筛查技术大规模应用于临床,是未来发展的趋势。

产前无创DNA检测在胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的应用价值研究

目的:研究产前无创DNA检测在胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的应用价值。方法:选取2020年1月至2022年8月期间于仙桃市妇幼保健院产科行产前无创DNA检测的830例孕妇作为研究对象。抽取孕妇的外周静脉血,行胎儿游离DNA检测,经PCR扩增后以高通量测序技术进行胎儿染色体非整倍体疾病的患病风险预测。对于高风险者,建议行羊水穿刺或人染色体核型分析,然后给予跟踪随访,记录这些孕妇的妊娠结局。结果:830例孕妇中,产前无创DNA检测结果显示存在高风险的孕妇有24例。此24例孕妇中,21-三体综合征、16-三体综合征、18-三体综合征、性染色体异常者分别有10例、6例、4例、4例,占比分别为41.67%、25.00%、16.67%、16.67%。24例产前无创DNA检测结果为高风险的孕妇均行羊膜腔穿刺术,其中22例孕妇确诊,产前无创DNA检测的准确率高达91.67%(22/24)。22例确诊孕妇中,21-三体综合征、16-三体综合征、18-三体综合征、性染色体异常胎儿分别有10例、5例、4例、3例,占比分别为45.45%、22.73%、18.18%、13.64%。结论:将产前无创DNA检测应用于胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的准确率较高,值得在临床上推广应用。

无创DNA产前检测技术发现特殊特纳综合征孕妇1例

在产前进行的胎儿染色体非整倍体的无创DNA检测技术,主要是通过对大规模平行测序技术进行运用,进行一个既有深度又有效率的测序,对象是针对母体外周血液中的游离DNA,这对提取胎儿染色体信息是一种非常有效的方法。随着无创产前基因检测技术（NIPT）日益成熟,科研探索方面的不断深入,该技术的应用领域也在逐步扩大。现对1例来该院进行NIPT检测的特殊病例作一分析。

无创胎儿DNA检测假阳性对产前诊断的影响分析

无创胎儿DNA检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)假阳性是导致增加额外的产前诊断和孕妇依从性降低的重要原因,还可能带来非必要的引产。本文就无创胎儿DNA检测假阳性对产前诊断的影响分析进行综述,通过分析NIPT假阳性的原因,在临床应用中结合不同孕妇的个体情况,为个体化、规范化的产前诊断提供指导和理论依据。

无创DNA产前筛查技术在胎儿非整倍体产前筛查中的临床应用价值

目的探讨无创DNA产前筛查技术(NIPT)在胎儿非整倍体产前筛查中的临床应用价值及其假阳性原因。方法选取2017年10月至2019年6月于本院妇产科门诊就诊且自愿进行血清学筛查和NIPT检测的5143例孕妇作为研究对象,详细询问并记录孕妇年龄、孕龄、末次月经时间、孕产次和既往分娩史。结果NIPT结果显示胎儿非整倍体高风险胎儿23例,其中21-三体高风险16例,18-三体高风险4例,13-三体高风险3例。羊水细胞核型诊断结果显示21-三体15例,18-三体4例,13-三体3例。低风险结果随访中全部与NIPT检测一致。故无创胎儿染色体非整倍体基因检测方法总的灵敏度为100.00%,特异度为99.98%,假阳性率为0.02%,假阴性率为0.00%;染色体异常基因测序显示,NIPT与羊水细胞核型分析验证不一致为局限性胎盘嵌合(CPM)。结论NIPT是一种高灵敏度和高特异度的非侵入性的胎儿染色体非整倍体产前筛查手段,局限性胎盘嵌合体是影响NIPT假阳性的因素之一。

无创产前DNA检测与传统产前诊断在产前诊断中应用的比较分析

对比分析无创产前DNA检测与传统产前诊断在产前诊断中的应用效果。方法:选取100名2019年02月~2020年02月来我院进行产前筛查的孕妇,按照产前检测的方法分为对照组(传统产前诊断)和观察组(无创产前DNA检测)。观察和对比两组孕妇的产前筛查高风险、高危因素选择干预措施的情况、阳性检出情况、结果准确度以及并发症发生情况,孕期内进行电话随访。结果:观察组孕妇筛查高风险和高危因素选择干预法明显高于对照组(P<0.05);对照组孕妇的阳性检出率明显高于对照组(P<0.05);两组孕妇检测结果的准确度以及并发症发生率没有明显差异(P>0.05)。结论:无创产前DNA检测以及传统产前诊断在筛查高风险和高危因素选择干预法以及阳性检出率方面均具有一定的差异性,当前传统产前诊断在对孕妇进行产前诊断中仍具有十分明显的优势,但是无创产前DNA检测由于不需要进行侵入性的操作,在临床中得到了大部分孕妇的青睐。随着分子生物学不断的发展,无创产前DNA检测有希望成为非侵入性产前诊断的新技术,在临床上进行广泛推广。