扩展性无创产前筛查技术在染色体拷贝数变异检测中的临床应用效果评价

目的探讨扩展性无创产前筛查技术(NIPT-plus)在染色体拷贝数变异(微缺失/微重复)检测中的应用价值。方法选取2017—2018年在甘肃省妇幼保健院医学遗传中心进行NIPT-plus检测的孕妇10187例,采用NIPT-plus检测孕妇血浆胎儿游离DNA(cffDNA)。对NIPT-plus检测为高风险的孕妇采用羊水染色体核型分析或低深度全基因组测序(CNV-seq)确诊,并随访至引产或分娩后3个月。结果采用NIPT-plus在10187例孕妇中筛查出164例高风险孕妇,其中131例为染色体非整倍体异常、33例为染色体微缺失/微重复。164例NIPT-plus高风险孕妇中,有131例接受CNV-seq检测,共确诊59例,其中染色体非整倍体异常46例、染色体微缺失/微重复13例,假阳性72例。NIPT-plus筛查5~10 Mb缺失/重复的阳性预测值、敏感性和特异性均为100.00%;筛查>10 Mb的缺失/重复的阳性预测值为62.50%,敏感性为100.00%,特异性为99.97%;筛查<5 Mb的缺失/重复的阳性预测值为42.86%,敏感性为90.00%,特异性为99.88%。结论NIPT-plus对≥5 Mb的染色体缺失/重复的检出率较高,对<5 Mb的染色体微缺失/微重复的阳性预测值较低,应进一步提高NIPT-plus对于染色体微缺失/微重复的检测性能。

无创DNA产前筛查技术在胎儿非整倍体产前筛查中的临床应用价值

目的探讨无创DNA产前筛查技术(NIPT)在胎儿非整倍体产前筛查中的临床应用价值及其假阳性原因。方法选取2017年10月至2019年6月于本院妇产科门诊就诊且自愿进行血清学筛查和NIPT检测的5143例孕妇作为研究对象,详细询问并记录孕妇年龄、孕龄、末次月经时间、孕产次和既往分娩史。结果NIPT结果显示胎儿非整倍体高风险胎儿23例,其中21-三体高风险16例,18-三体高风险4例,13-三体高风险3例。羊水细胞核型诊断结果显示21-三体15例,18-三体4例,13-三体3例。低风险结果随访中全部与NIPT检测一致。故无创胎儿染色体非整倍体基因检测方法总的灵敏度为100.00%,特异度为99.98%,假阳性率为0.02%,假阴性率为0.00%;染色体异常基因测序显示,NIPT与羊水细胞核型分析验证不一致为局限性胎盘嵌合(CPM)。结论NIPT是一种高灵敏度和高特异度的非侵入性的胎儿染色体非整倍体产前筛查手段,局限性胎盘嵌合体是影响NIPT假阳性的因素之一。

EZSCAN无创筛查技术对糖尿病及糖耐量异常的临床应用价值

目的探究EZSCAN无创筛查技术对糖尿病(DM)及糖耐量异常(IGT)的临床应用价值。方法选取葡萄糖代谢紊乱高风险人群(年龄大于或等于45岁,BMI≥25kg/m2)158例,采用EZSCAN无创筛查技术对筛查者进行糖尿病风险评估,并且对其行无水葡萄糖耐量试验(OGTT),检测其糖基化血红蛋白(HbA1c)及空腹血糖(FPG)水平。结果 158例筛查者中正常糖耐量者(NGT)96例,IGT患者39例,DM患者23例,3组患者EZSCAN值分别为(32±9)、(45±11)、(48±12)%,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析表明EZSCAN值与2h-OGTT,HbA1c及FPG具有一定的相关性(r=0.513、0.701、0.552,P<0.01)。EZSCAN对IGT诊断的切点值为37.0%,敏感度为82.2%,特异性为62.7%,AUC为0.769,其对IGT的预判效能优于HbA1c和FPG;而EZSCAN对DM诊断切点为50.0%,敏感度为53.7%,特异性为58.4%,AUC为0.531,其对DM的预判效能不如HbA1c和FPG。结论 EZSCAN无创筛查技术能对IGT及DM进行早期筛查,对IGT的筛查效果较DM更加优越,对IGT的早期诊断具有重要的临床应用价值。

无创产前筛查技术在高龄孕妇唐氏综合征筛查中的应用

目的探讨无创产前筛查技术(NIPT)在高龄孕妇唐氏综合征筛查中的临床应用价值。方法通过比较高龄孕妇直接行羊水穿刺诊断(直接诊断)与先行NIPT阳性者再行羊水穿刺诊断(间接诊断),观察两组间唐氏综合征检出率的差异。结果 176例高龄孕妇先进行NIPT,高风险4例,羊水诊断确诊3例,检出率1.70%;296例高龄孕妇直接行羊水诊断发现染色体异常4例,检出率1.40%。两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论与羊膜腔穿刺相比较,NIPT技术具有简便、安全、可靠等优点,且较易为孕妇所接受,为羊水诊断禁忌证或拒绝羊膜腔穿刺术的高龄孕妇提供了新的产前筛查方法。

无创胚胎染色体筛查技术对军队不孕不育夫妇助孕结局的影响

目的探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)对军队不孕不育夫妇辅助生殖结局的影响。方法选择自2017年5月至2020年10月接受辅助生殖技术治疗的455对官兵夫妇进行前瞻性观察研究,其中133对实施卵母细胞胞浆内单精子注射(ICSI)方案,根据患者夫妇意愿进行分组,愿意接受NICS治疗45例,拒绝NICS治疗88例。88例中取消鲜胚移植后行单囊胚解冻复苏移植者26例,比较该26例(ICSI组)与NICS检测后首次单囊胚冻胚复苏移植39例(NICS组)的官兵夫妇取卵周期特征及复苏周期临床结局。结果NICS组患者男方年龄、女方年龄均较ICSI组高[男方年龄(35.79±4.52)岁vs(31.69±3.10)岁,女方年龄(34.45±4.0)岁vs(29.65±2.04)岁,均P<0.001],NICS组较ICSI组抗苗勒管激素(AMH)[(3.39±2.59)ng/mL vs(5.23±3.27)ng/mL]、hCG日卵泡数(13.68±7.12 vs 17.77±8.88)、获卵数(12.37±6.72 vs 17.38±10.63)、成熟卵子数(10.95±6.21 vs 15.15±9.46)均显著降低(均P<0.05)。NICS组与ICSI组FET临床妊娠率相当(82.1%vs 80.8%)。结论军队不育夫妇实施ICSI治疗,胚胎植入前行NICS检测优选胚胎移植可改善临床结局。

无创胚胎染色体筛查技术对单囊胚冻胚复苏移植临床结局的影响

目的探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)对单囊胚冻胚复苏移植临床结局的影响。方法回顾性分析372例行体外受精-单囊胚冻胚复苏移植病例的临床资料(移植前所有囊胚形态学质量经Gardner囊胚评分法评估均为优质囊胚)。其中,75例愿意接受NICS检测并且检测结果显示囊胚染色体拷贝数正常(A组),73例愿意接受NICS检测但检测结果显示囊胚染色体拷贝数异常(予剔除),其余224例未接受NICS检测(B组)。比较两组的临床结局。结果经NICS检测的148枚形态学优质囊胚中,75枚囊胚的染色体拷贝数正常,其余73枚囊胚的染色体拷贝数异常。A组的新生儿畸形率低于B组,而活产率高于B组(均P<0.05),但两组之间的临床妊娠率、持续妊娠率、早期流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论与单纯传统囊胚评分比较,联合应用NICS技术检测胚胎染色体,能改善单囊胚冻胚复苏移植的活产率,降低新生儿畸形率。

EZSCAN风险评分在肾功能轻度损伤人群中的筛查价值

【目的】自主神经功能障碍是慢性肾脏病(CKD)患者常见严重的并发症,且在CKD早期就会发生。汗腺功能障碍已被视为自主神经功能紊乱的初始组成部分。通过反向离子电渗疗法和计时电流法测量电化学皮肤电导(ESC)来评估汗腺功能,可能会检测出健康体检人群中轻度肾功能不全的患者,以便给予早期干预与治疗,延缓肾功能进一步恶化。【方法】EZSCAN分数(0~100)是基于计时电流分析的专有算法计算得出的。本研究入组了2020年1月至10月浙江大学医学院附属第二医院体检中心健康体检的6 661名受试者,包括肾功能下降[估算肾小球滤过率(eGFR)<90 mL·min^(-1)·1.73 m^(-2)]的2 075(31.15%)名受试者作为病例组和肾功能正常(90 mL·min^(-1)·1.73 m^(-2)≤eGFR≤120 mL·min^(-1)·1.73 m^(-2))的4 586(68.85%)名受试者作为对照组。采用lasso回归筛选协变量,通过loess曲线和logistic回归分析风险评分与eGFR的关系。【结果】经过多变量调整后,风险评分与eGFR下降的风险相关,与risk值最低组(Q1<24)相比,Q2(25-27),Q3(28-47),Q4(48-75)的OR(95%CI)分别为1.84(1.54,2.20),2.47(2.08,2.94),2.41(2.05,2.83)。其中模型Ⅲ的ROC曲线下面积最大0.75(0.74,0.76),得出敏感度为73.98%,特异度为63%,阳性预测值为47.49%,阴性预测值为84.25%,约登指数为0.369 72,最佳截断值为25。【结论】EZSCAN是一种有效的筛选工具,可用于识别肾功能下降风险增加的健康体检人群,分数大于25应行相关实验室检测明确诊断。

无创胚胎染色体筛查技术在单囊胚冻胚复苏移植中的应用价值及其活产结局的因素分析

目的:探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)在单囊胚冻胚复苏移植中的应用价值,分析影响活产结局的因素。方法:回顾性分析2019年1月至2021年12月我院收治的197例行单囊胚冻胚复苏移植患者的临床资料,53例行NICS检查且检测结果提示囊胚染色体拷贝数正常(NICS组),26例NICS检测结果异常予以排除,118例未接受NICS检测(非NICS组)。收集临床资料并追踪妊娠结局,根据妊娠结局将患者分为活产组(75例)和非活产组(96例),采用单因素及多因素Logistic回归分析影响单囊胚冻胚复苏移植活产的因素。结果:NICS组活产率高于非NICS组(P<0.05)。单因素分析显示活产组女方年龄小于非活产组(P<0.05),基础卵泡雌激素(FSH)水平、常规试管婴儿(IVF)周期≥2个低于非活产组(P<0.05),优质胚胎数、移植日子宫内膜厚度和NICS检查比例、发育成囊胚时间为D5比例高于非活产组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示女方年龄偏大、发育成囊胚时间为D6是影响单囊胚冻胚复苏移植活产的危险因素(P<0.05),NICS检查是其保护因素(P<0.05)。结论:NICS筛查胎儿染色体异常可提高单囊胚冻胚复苏移植活产率,产妇高龄和囊胚发育速度过慢是影响活产的主要危险因素。在单囊胚冻胚复苏移植前有必要进行NICS检查,并尽量选择D5囊胚以提高活产率。

无创产前筛查技术在胎儿性染色体非整倍体中的临床应用

目的 探讨无创产前筛查(non-invasive prenatal testing, NIPT)技术在胎儿性染色体非整倍体(sex chromosome aneuploidy, SCA)的临床应用价值。方法 选择2018年1月至2020年8月在南宁市第二人民医院行NIPT的22 998例单胎妊娠孕妇为研究对象,NIPT结果提示为SCA的孕妇建议其进行介入性产前诊断行胎儿染色体核型分析或拷贝数变异测序(copy number variation sequencing, CNV-Seq)检测,并随访妊娠结局。结果 22 998例孕妇中,NIPT提示SCA有86例(0.37%),其中49例(56.98%)性染色体数目减少,37例(43.02%)性染色体数目增多。62例行介入性产前诊断,有30例阳性,总体阳性预测值(positive predictive value, PPV)为34.88%,包括性染色体数目减少7例,PPV为14.29%,胎儿核型为45,X、45,X/46,XX嵌合、46,X,del(X)(p11.2),相应PPV分别为6.12%、6.12%、2.04%,其中意外发现有2例常染色体微缺失微重复;性染色体数目增多有23例,PPV为62.16%,胎儿核型分别为47,XXY、47,XXY/48,XXXY嵌合,对应PPV分别为59.46%、2.70%。随访有40例孕妇选择继续妊娠,21例引产,部分失访。结论 NIPT对SCA的总PPV不高,NIPT提示SCA时,仍需进一步行介入性产前诊断,并结合胎儿超声影像等综合判断以及加强随访。

胚胎培养液用于染色体筛查的初步研究

目的:对胚胎培养液筛查胚胎染色体进行初步探讨,为优质胚胎无创筛查体系提供数据和技术支持。方法:采集胚胎培养液86例和囊胚36例,其中56例为卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)胚胎培养液,30例为体外受精-胚胎移植(IVF-ET)胚胎培养液。采用基因测序通用文库试剂盒对囊胚及胚胎培养液进行MALBAC单细胞全基因组扩增及文库构建,运用高通量测序平台进行测序,运用ChromGoTM2.0数据分析平台检测染色体非整倍体及10M以上的片段缺失和(或)重复。结果:86例胚胎培养液中27例未检出染色体核型,其中前期收集36例标本,检出成功率41.7%;改进方法收集50例标本,检出成功率88.0%。对36例囊胚及其培养液染色体结果进行对比,IVF-ET 18例,染色体倍性一致率38.9%,非整倍体假阳性率50.0%,假阴性率0.0%;ICSI-ET 18例,染色体倍性一致率77.8%,非整倍体的假阳性率16.7%,假阴性率5.6%。结论:ICSI-ET受精方式在胚胎培养液用于胚胎染色体的筛查中优于IVF-ET;建立完善的培养液收集流程利于胚胎染色体检测。

孕妇对无创产前筛查技术预防唐氏综合征的认知情况及支付意愿分析

目的了解孕妇对无创产前筛查(NIPT)的认知现状及支付意愿情况。方法 2015年9-10月,采用自行设计的孕妇支付意愿调查表调查某省3家高通量基因测序技术临床应用试点单位的743例孕妇,调查内容包括:孕妇基本人口学特征、对NIPT的认知和支付意愿情况。结果本次现场调查共发放孕妇支付意愿调查表800份,回收743份,回收有效率92.88%。孕妇对NIPT的认知程度不高,获取信息的渠道主要是医务人员的介绍,但大多数孕妇表达了在孕早期愿意多了解相关筛查与诊断的方法。孕妇对NIPT产前筛查愿意支付的费用平均数为1 483.12元,且孕妇的支付意愿水平与年龄和收入有关。结论有必要有针对性地给予孕妇以系统的理论知识指导,提高孕妇对产前筛查知识掌握的水平,对产前筛查技术尤其是NIPT新技术的临床应用及推广有重要意义。

无创产前筛查技术在胎儿性染色体非整倍体筛查中的应用

目的探讨无创产前筛查技术(NIPT)在胎儿性染色体数目异常中的应用价值。方法选取2017年10月—2021年9月在厦门大学附属第一医院完成的NIPT检测提示性染色体异常并行产前诊断的孕妇74例为研究对象,进行羊水染色体分析和胎儿染色体微阵列(CMA)检测,并对检出的74例性染色体非整倍体患者进行回顾性分析。结果NIPT检出的74例性染色体数目异常中,28例性染色体数目减少,阳性预测值为21.43%;46例性染色体数目增多,阳性预测值为65.22%。NIPT性染色体数目异常的总体阳性预测值为48.65%。胎儿CMA预测值为92.73%。结论NIPT可作为胎儿性染色体异常的筛查手段,但筛出异常病例均需介入性产前诊断确认。

无创胚胎染色体筛查技术在染色体易位携带者胚胎植入前遗传学诊断研究进展

体外受精-胚胎移植(IVF-ET)辅助技术所获得的胚胎在39-65%以上存下染色体异常,而良好发育潜能的正常胚胎是成功妊娠乃至分娩的关键。如果能在胚胎植入前进行遗传学检测,将染色体正常的胚胎植入宫腔内,可有效提高反复移植失败或高龄患者的妊娠率以及分娩结局。然而,获取卵裂期胚胎细胞或胚囊滋养层细胞均属于有创操作,不仅降低胚胎质量,且存在0.6%-1.1%的流产风险,因此人们一直致力于早期、安全且精准的方式来排查胚胎染色体异常。近几年来,胚胎培养液中游离的DNA的发现为胚胎遗传学物质的无创检测提供可能。但关于无创胚胎染色体检测染色体易位应用研究鲜有报道,为此本文就对无创胚胎染色体筛查技术在染色体易位携带者胚胎植入前遗传学诊断研究进展做一综述,旨在为染色体易位携带者胚胎植入前遗传学诊断提供可靠依据。

囊胚培养液中游离DNA的重要染色体整倍性研究

目的探讨利用培养液中游离DNA检测对应囊胚的13、15、16、18、21、22号染色体整倍性的效率。方法本研究共纳入239枚囊胚,所有的胚胎均来源于PGT-A周期。囊胚活检的滋养层细胞采用SNP芯片检测胚胎的整倍性;培养液游离DNA采用无创胚胎染色体筛查(NICS)方法检测整倍性;采用盲法比较两者的结果。计算NICS在检测13、15、16、18、21、22号染色体整倍性的敏感性、特异性、诊断效率、阳性预测值和阴性预测值。结果239枚囊胚中的209枚有NICS结果,NICS检出率为87.5%(209/239)。NICS方法在检测13、15、16、18、21、22号染色体的特异性、效率比较高,均>90%,NICS结果的阴性预测值超过97%;但是敏感性波动较大(33%~100%),阳性预测值较低(<50%)。结论NICS方法可以检测囊胚整倍性。当NICS结果显示这些重要染色体(13、15、16、18、21、22号染色体)为整倍体时,对应囊胚该条染色体整倍性几率高;但是当NICS结果显示这些重要染色体为非整倍体时,对应胚胎并不一定为非整倍体。

NICS与PGD检测胚胎染色体罗氏易位一致性的研究

目的探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)与植入前遗传学诊断(PGD)检测胚胎染色体罗氏易位结果的一致性,为临床产前筛查提供理论借鉴。方法选取2018年5月至2021年3月在云南大学附属医院行体外受精-胚胎移植不孕妇女的临床资料84例进行研究,其配偶生殖功能正常,从胚胎营养液中提取样本分别行NICS、PGD检测,并进行比较分析。结果染色体异常主要集中在8、16、22号染色体上。NICS、PGD在检测染色体结构异常和染色体数量异常方面的阴性率与阳性率比较差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为65.168、32.747;37.249、34.161,P<0.05);NICS、PGD在检测染色体结构异常和染色体数量异常方面具有一致性(Z=-0.243,P=0.808;Z=-1.000,P=0.317)。NICS、PGD在检测正常或者易位染色体和完全新发染色体异常的阳性率与阴性率鉴别检查比较差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为17.155、9.972、15.786、6.364,P<0.05)。NICS、PGD在检测染色体罗氏易位类型方面具有一致性(Z=0.059,P=0.808)。受试者工作特征(ROC)曲线分析诊断效能显示:NICS和PGD的AUC(Z=-1.000,P=0.317)、灵敏度(χ^(2)=2.000,P=0.157)、特异度(χ^(2)=2.000,P=0.157)比较差异均无统计学意义。结论 NICS、PGD检测胚胎染色体罗氏易位均有效,适用于临床。

佛山NIPT阳性高龄与非高龄孕妇侵入性产前诊断结果分析

目的比较无创产前筛查(NIPT)阳性结果的孕妇,在高龄孕妇组与非高龄孕妇组间侵入性产前诊断结果的差异。方法对NIPT阳性结果的孕妇进行侵入性产前诊断,抽出的羊水或脐血培养行常规染色体G显带核型分析。结果NIPT阳性结果高龄孕妇组59例,非高龄孕妇组64例,通过侵入性产前诊断确诊染色体异常的高龄孕妇组45例,检出率76%;非高龄孕妇组31例,检出率48%。两组间比较差异有统计学意义(χ2=10.073,P=0.002)。结论 NIPT存在一定比例的假阳性,在佛山地区NIPT阳性结果对于高龄孕妇比非高龄孕妇准确度更高。