4株志贺菌无抗生素压力下连续传代90次的耐药表型及CRISPR／Cas系统变化

目的 分析无抗生素压力下连续传代90次的4株志贺菌耐药表型及成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）基因变化。方法 对临床分离的4株耐药谱不同的志贺菌进行无抗生素压力连续传代90次，传代结束后用琼脂稀释法检测传代前、后志贺菌最小抑菌浓度；用PCR对CRISPR位点进行扩增并测序，CRISPR Finder和Clustal X 2.1分析CRISPR位点的变化。结果 经无抗生素压力传代90次后，4株志贺菌对某些抗生素的敏感性有不同程度的增加：mel-sf1998024/zz对氨苄西林、头孢氨苄、头孢噻肟、氯霉素的耐药性降低，mel-s2014026/sx对诺氟沙星、甲氧苄啶的耐药性降低，mel-sf2004004/sx对氨苄西林、头孢呋辛、头孢噻肟、氯霉素、甲氧苄啶的耐药性降低，mel-sf2013004/bj对氯霉素的耐药性降低；志贺菌mel-sf1998024/zz和mel-sf2013004/bj经无抗生素压力传代后，CRISPR3位点3＇的重复-间隔序列丢失，其中间隔序列匹配基因的编码产物是Cas蛋白。结论 志贺菌在无抗生素压力下，可降低或丢失对某些抗生素的耐药性。部分志贺菌CRISPR3位点的结构发生了变化，CRISPR3位点与cas基因可能存在共进化。