福建省稻瘟病菌田间种群无毒基因的变异检测

稻瘟病严重威胁福建省水稻生产。稻瘟病菌田间种群无毒基因的变异监测是实现优质抗稻瘟病水稻品种合理布局和轮换、有效预防因抗性丧失导致的稻瘟病爆发成灾的重要措施。本研究以福建省3个水稻主产区采集并分离的113个稻瘟病菌单孢菌株为材料,检测其无毒基因的变异情况。首先,利用24个已知抗性的水稻单基因系对它们进行致病性测定,分析致病频率、毒力频率、无毒基因的存在频率和无毒基因的组合频率。结果显示,福建省建阳、宁化和上杭3个水稻主产区的稻瘟病田间菌株对24个水稻单基因系的致病频率分别为12.50%~95.83%、29.17%~100%和4.55%~86.36%。3个水稻主产区菌株均对Pik^(s)、Pib、Pi3和Pi12表现为强毒性,而建阳和宁化菌株还对其他12个抗性基因表现为强毒力(毒力频率≥70%),包括Pia、Pii、Piz、Pita、Pit、Pis^(h)、Pi5、Pi7、Pi19、Pi20、Pita^(2)和Pi11。其次,本研究还设计了8个无毒基因Avr-Pita、Avr-Pib、Avr-Pik、Avr-Piz-t、Avr-Pii、Avr-Pi9、Avr-Pi54和Avr-Co39的特异性引物,对单孢菌株进行基因型鉴定。结果显示,所有菌株均未检测到Avr-Co39,表明这些稻瘟菌株中均不携带该无毒基因。此外,Avr-Pib的出现频率也很小,仅为37.17%,但是该比例仍远超致病性测定中推测的Avr-Pib所占比例,表明检测到的Avr-Pib中很大一部分存在突变。为此,对Avr-Pib基因部分扩增产物进行测序,发现这些菌株的Avr-Pib在启动子区发生了缺失、插入和替换等突变。此外,部分菌株的Avr-Pik或Avr-Piz-t也存在启动子单核苷酸变异,而上杭菌株Avr-Pi9和宁化菌株Avr-Piz-t则均存在编码区的突变。这些位点的突变均可能导致无毒基因功能的缺失。研究还表明,携带Pi1、Piz5、Pi9和Pik、Pik^(h)、Pik^(m)位点的水稻品种仍适合在福建地区种植。

无毒稻瘟菌株AM16诱导水稻稻瘟病抗性研究

利用病原菌无毒或弱毒菌株诱导植物抗病性是植物病害生物防控的重要研究方向。前期研究中,鉴定了一株对所有测试水稻都不致病的无毒稻瘟菌株AM16。本研究通过AM16菌株与致病稻瘟菌株对峙培养试验结果表明,AM16菌株对致病稻瘟菌株生长无拮抗作用。利用AM16培养液处理水稻幼苗,能显著增强水稻植株的稻瘟病抗性,处理后48~72 h抗性最强。温室和大田试验结果表明,喷施AM16培养液能增强分蘖期和抽穗期水稻植株的抗瘟性,防效在40%以上。进一步研究发现,AM16培养液处理的水稻植株,体内防御相关酶PPO、PAL、SOD、POD、APX和CAT活性有不同程度的上升,SA和JA通路关键基因(Os PAL1、Os NPR1和Os AOS2)和防御相关基因(Os Chit1、OsPR10b、Os PR1a和OsPR1b)表达上调。该研究为AM16菌株在稻瘟病生物防治中的开发利用奠定了重要基础。

无毒环保仿生黏合剂制成

如果没有黏合剂,现代人类文明的大部分,包括手机、汽车、家具、墙壁和送到家门口的包裹,都会散架。然而,这些黏合剂的问题就在于,它们不可持续。美国普渡大学的一个化学家团队希望用一种完全可持续的新黏合系统来改变这一点。受贝类动物启发,他们开发出一种更坚固、更可持续的新型胶水。研究结果9月13日发表在《自然》杂志上。

新型无毒浸金药剂“DBH”在吉林省白山市板庙子金矿的应用研究

以吉林省白山市板庙子金矿原生贫硫化物型金矿石为研究对象,在炭浸工艺中采用新型环保无毒“DBH”药剂为浸金剂,在最佳工艺条件下,取得了87.98%的金浸出率,接近传统氰化浸金工艺的浸出率。可见“DBH”浸金剂在炭浸工艺中替代氰化钠浸出该矿石中金矿物是可行的。本次研究工作取得成果对该矿无毒浸金及矿山绿色转型发展提供了重要参考。

应用组培技术繁育香石竹无毒苗的试验

采用微茎尖组培技术可以大量繁育香石竹的无病毒生产用苗株，在增殖培养中选用不加激素的MS培养基、小容积容器及透气封口膜处理容器瓶口，均可有效地降低培养过程中的玻璃化株率；生根培养基的配方以MS＋NAA0．05mg／L为最适用，香石竹组培生根苗的繁育系数9个月可以达到1167倍。本试验以指示植物苋色藜汁液磨擦接种法鉴定所繁育的香石竹苗有无环斑、斑驳病毒。

与马铃薯晚疫病菌无毒基因Avr1连锁的AFLP标记

以具有和不具有无毒基因Avr1表现型的马铃薯晚疫病菌株80029(AVR1)和88133(avr1)以及其杂交F1代50个菌株群体为试材,限制性内切酶PstI和HhaI为酶切组合,采用荧光AFLP技术和混合分组分析法(BSA),通过256对引物筛选得到了5个与Avr1连锁的候选AFLP标记并进行了菌株个体验证,遗传分析表明5个标记中有2个标记与Avr1连锁且在F1代中共分离,无交换重组发生。

纯天然≠无毒性:中草药引起的肝损伤不可忽视

中草药在我国乃至世界范围内的应用历史悠久,合理选用确实具有治疗疾病、增强体质和延年益寿的功效.但在众多传媒广告及江湖游医等的误导下,公众常常认为中草药“纯天然、无毒副作用”.然而,正应了一句俗语“是药三分毒”,近10多年来中草药引起的肝损伤（herbal-inducedliverinjury,HILI）报道屡见不鲜,已成为临床上常见的肝病之一.

无毒增塑剂乙酰柠檬酸三丁酯的合成

用氨基磺酸两步法催化合成乙酰柠檬酸三丁酯。实验确定了最佳工艺条件 :(1 )酯化反应 :以 0 2mol柠檬酸为基准 ,n (柠檬酸 )∶n (正丁醇 ) =1 0∶4 0 ,m(催化剂 ) =1 5g ,t =1 1 0～1 6 0℃ ,t=2 5h ,转化率为 98 2 % ;(2 )乙酰化反应 :以 0 2mol柠檬酸三丁酯为基准 ,n (柠檬酸三丁酯 )∶n (乙酸酐 ) =1 0∶1 5 ,m(催化剂 ) =2 0g ,t =85℃ ,t=1 5h ,乙酰化收率为 91 3%。催化剂易回收 ,可循环使用 ,不污染环境。

辽宁省稻瘟病菌无毒基因型鉴定及分析

【目的】鉴定稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的无毒基因型,了解无毒基因在不同地区流行菌株中的分布情况,为品种布局提供参考。【方法】根据已经克隆且与稻瘟病菌致病性相关的6个无毒基因序列设计引物,选取辽宁省稻瘟病常发区的26株稻瘟病菌单孢菌株,提取各菌株DNA样本作为模板,进行PCR扩增。通过琼脂糖凝胶电泳及PCR产物测序,对6个无毒基因PCR产物进行碱基和氨基酸序列的分析比较。对琼脂糖凝胶电泳未出条带的,设计不同引物进行验证性试验。【结果】在PCR产物电泳检测中,Avr1-CO39、Avr-pia和Avr-pii没有产物条带,对这3个无毒基因设计验证引物,其PCR产物电泳检测仍没有条带出现,其结果证明辽宁省各水稻主产区流行稻瘟病菌中多不携带Avr1-CO39、Avr-pia和Avr-pii;对于其他3个无毒基因AvrPiz-t、Avr-pik和Avr-pita则有特异性扩增产物,说明这3个无毒基因在各稻区稻瘟病菌中以不同突变类型及不同频率出现。其中,与Pi2、Pi9和Piz-t对应的AvrPiz-t,分别在22个菌株的中被检测到,且有21个菌株的序列与其序列一致,说明该基因遗传相对稳定,也间接证明携带Pi2、Pi9和Piz-t的水稻品种在辽宁地区的广谱抗性;与基因组序列不同的16号菌株,在DNA序列192 bp处发生一个单碱基C的缺失,从而导致移码突变,且碱基突变导致氨基酸序列至72位氨基酸时提前终止,而使该基因编码的蛋白质失去无毒基因的功能。与Pik、Pik-p、Pik-m和pik-s对应的Avr-pik,电泳检测结果表明各菌株均有特异性条带出现,经测序验证等位基因序列分为4种类型(B、D、F、G),其中12个菌株携带可为Pik或其等位基因Pik-m和pik-p所识别的D类型;9个菌株携带B类型,该等位基因曾被报道,但是否具有无毒基因的功能仍未验证;另有2个菌株携带F类型等位基因,该基因为首次发现,并分别出现在丹东和盘锦地区。其特点在于与D类型基因间存在143(A/G)的碱基差异,氨基酸序列翻译结果显示其为错义突变,即48(G/D);而其余3个菌株携带G类型等位基因,该基因亦属首次发现,且仅出现在抚顺新宾地区,碱基序列与D类型存在168(G/A)的差异,导致翻译提前终止,基因功能丧失。对于Avr-pita,26个菌株特异性扩增产物一致,但测序检测到5种等位基因类型,且均与Avr-pita有差异,碱基序列的变化多导致错义突变。这5种等位基因的氨基酸序列之间差异由3个氨基酸位点的差异所致,分别为83(D/N)、192(Y/C)和207(K/R),3处突变均在基因结构域范围内,几种等位基因均已见报道。【结论】辽宁稻区流行稻瘟病菌中Avr-pik、AvrPiz-t和Avr-pita分布较为广泛,选育及推广携带相应抗病基因的水稻品种可减轻稻瘟病的危害。

黑龙江省稻瘟病菌无毒基因分析及抗病种质资源筛选

采用7个稻瘟病菌无毒基因的特异性引物,对177个来自黑龙江省的稻瘟病菌单孢菌株进行PCR检测,结果表明7个无毒基因在黑龙江省不同地区均有分布,但出现频率不同,其中频率最高的为ACE1,达到61.6%,最低的为Avr1-co39,只有31.6%;来源于不同水稻品种的菌株无毒基因组成不同。采用国际水稻研究所20个已知抗性基因的单基因系对48个黑龙江省稻瘟病菌进行毒力分析,与PCR检测无毒基因结果一致。同时,对20个抗病单基因系采用多菌株人工接种发现Pi-9在黑龙江6个地区对稻瘟病菌的抗谱为80%~100%,在育种中具有较高利用价值。

病原细菌无毒基因avrD介导的抗赤星病转基因烟草

利用从病原细菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｔｏｍａｔｏ中获得的无毒基因ａｖｒＤ片段与病原菌诱导型的特异启动子ＰⅠⅡ、ＣＨＳ和ＰＡＬ构建成表达盒，通过土壤农杆菌分别转化烟草品种Ｋ３２６和ＢｏｔｏｍＳｐｅｃｉａｌ。经烟草赤星病菌孢子定量接种转基因植株及其离体叶片，筛选到一批高抗植株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子杂交检测证明。

稻瘟菌对水稻品种梅雨明的无毒性的遗传分析和分子标记

将交配型为 a、并对水稻品种梅雨明不致病的稻瘟菌菌株 S152 2与对该品种致病的、交配型为A的稻瘟菌菌株 P131和 S159杂交 ,分别获得了 2 4和 56个单子囊孢子后代。致病性测定结果表明 :这些后代菌株在梅雨明上的致病个体与不致病个体的比例近等于 1∶ 1。由此推测 :稻瘟菌对水稻品种梅雨明的无毒性是由 1个基因控制的。进一步通过 RAPD比较了致病后代与不致病后代的 DNA多态型 ,获得了 1个与该无毒基因连锁的、长度为 10 0 0 bp的 RAPD标记 ,两者间的遗传距离为3.7c M。

94-01无毒防污涂料的研制

无毒防污涂料是防污涂料发展的必然趋势。本文介绍了以无毒硅酸盐为主要防污剂、丙烯酸树脂为基料的无毒防污涂料的配方。讨论了颜基比、硅酸盐组成、溶剂体系和防污助剂等因素对涂料防污性能的影响。

镀锌及锌合金层低毒、无毒钝化工艺

综述了国内外镀锌及锌合金层主要的低毒无毒钝化工艺。介绍了镀锌及锌合金层钝化原理和钝化体系。讨论了镀锌及锌合金层无六价铬钝化工艺的特点,包括三价铬盐钝化、钼酸盐钝化、稀土钝化、钛盐钝化、硅酸盐钝化、钨酸盐钝化和有机物钝化等,并针对各种钝化工艺的特点提出了有待完善的方面。通过分析讨论镀锌及锌合金层低毒、无毒钝化工艺,从成本和性能两个因素比较得出三价铬钝化技术是最有可能被接受的六价铬替代品,其次为钼酸盐钝化。指出了六价铬钝化工艺的替代势在必行,以及无毒或低毒、高耐蚀性和低成本的镀锌及锌合金层钝化工艺是今后的研究方向。

转无毒基因马铃薯抗晚疫病的研究 (英文)

晚疫病菌 (Phytophthorainfestans)引起的马铃薯晚疫病是危害全球马铃薯生产的严重病害。通过基因工程方法把外源基因导入植物体内以增强抗病性被证明是一条行之有效的途径。应用植物基因工程技术将具有能激活植物自身防御系统的无毒基因与适合于植物背景、非专一性的病原物诱导启动子组合成嵌合基因构建到植物表达载体中。通过农杆菌或基因枪的介导转化植物 ,可筛选出高效广谱的抗真菌和细菌病害的转基因植株。本研究从病原细菌PseudomonassyringaePV .tomato中获得的无毒基因avrD (0·93kb)和从病原真菌Phytophthoraparasitica中获得的无毒基因Elicitin(0 2 94kb)分别与非专一性病原物诱导启动子Pill和BG组成含 2个嵌合基因 (Pill -avrD ,BG -Elicitin)的植物表达载体pYH144和pYHEt。通过农杆菌LBA4 4 0 4介导转化马铃薯 ,其中用pYH144载体转化 2个品种 (克新 1号 ,2号 ) ,用pYHEt载体转化 3个品种 (Desiree ,克新 2号 ,4号 ) ,通过组织培养分别获得潮霉素 (HygromycinB)标记的转基因马铃薯试管苗。将转基因试管苗扩繁 ,应用马铃薯脱毒微型种薯生产技术获得转无毒基因微型薯 ,在温室 (15～ 2 5℃和湿度高 )条件下 ,观察转无毒基因马铃薯植株中对晚疫病菌自然感染的抗性。 1998年和 1999年 (每年的 3-

基于无毒基因序列的稻瘟病菌指纹类型与致病型的关系初探

基于已克隆的稻瘟病菌无毒基因序列和基因组序列,设计了4对特异性引物,对不同来源的31个菌株进行PCR扩增,得到13个指纹类型。同时将31个菌株在7个中国鉴别品种、7个以丽江新团黑谷为背景的近等基因系鉴别品种和12个日本单基因鉴别品种上接种鉴定其致病型,分析菌株指纹类型与致病型之间的关系。结果表明,病菌的指纹类型与基于日本单基因鉴别品种划分的致病型间存在一定程度的对应关系。

纳米ZnO催化合成无毒增塑剂柠檬酸三丁酯

以柠檬酸和正丁醇为原料,以纳米ZnO为催化剂催化合成无毒增塑剂柠檬酸三丁酯,探讨了催化剂用量、酸醇物质的量比、反应时间、反应温度对反应结果的影响,对合成的产品进行了红外光谱分析.实验结果表明,纳米ZnO催化合成柠檬酸三丁酯的最佳条件为n(柠檬酸):n(正丁醇)=1:4.5,催化剂用量为柠檬酸质量的1.5%,反应时间为2.5 h,反应温度为110～140℃,酯化率可达97.23%,产品纯度＞99%.

无毒棉籽水提物对皮质酮诱导的PC12细胞损伤的对抗作用

目的 :探讨无毒棉籽水提物 (CTN W )抗抑郁、抗焦虑作用的可能机理。方法与结果 :提取大鼠大脑皮层突触膜并与CTN W 0 .0 1,0 .0 3,0 .10 ,0 .30mg·mL-1直接孵育 ,放免法测定腺苷酸环化酶 (AC)活性的改变 ,发现CTN W可剂量依赖地激活AC ;MTT比色法研究表明 ,CTN W 0 .0 8,0 .4 0 ,2 .0 0mg·mL-1与皮质酮 2× 10 -4mol·L-1共孵PC12细胞 4 8h后可防止皮质酮所致的PC12神经细胞损伤。结论 :CTN W的作用可能与信号转导系统AC cAMP通路的激活 ,从而对损伤神经元产生保护作用有关 ,此二者共同组成了CTN

用SSR标记法对黑龙江省稻瘟菌无毒基因的检测

研究黑龙江省稻瘟病菌无毒基因的分布情况,使用与无毒基因Avr-pit、Avr-pia、PRE1紧密连锁的3个SSR标记对黑龙江省不同地区的195个稻瘟菌菌株的DNA进行PCR扩增;3个无毒基因在黑龙江省的出现频率有明显差异,无毒基因Avr-pit的出现频率为43.59%,无毒基因Avr-pia出现频率36.92%,无毒基因PRE1的出现频率为30.26%。黑龙江省稻瘟病菌的群体结构复杂,不同地区之间各无毒基因出现频率存在较大的差异,同一基因在不同地区分布差异也较大;研究为稻瘟病菌的分子标记、遗传多样性研究和分子育种奠定了基础。

稻瘟菌无毒基因AVR-Pik^m的定位

无毒基因是病原物中决定寄主抗病性表达与否的功能基因,其功能的丧失导致毒性小种的产生。在先前的研究中,本研究小组从稻瘟病菌中分离了与无毒基因AVR-P ikm连锁的2个SCAR标记SCO12946和SCE121406。在本研究中,作者首先将这2个标记定位到稻瘟菌第1号染色体上;然后,利用稻瘟菌70-15全基因组草图序列和SSR技术,又分离了与无毒基因AVR-P ikm连锁的4个SSR标记:SSR47T34、SSR50CA24、SSR52TAGG18和SSR56A28。进一步分析表明:上述4个SSR标记位于与SCO12946和SCE121406相反的一侧,与AVR-P ikm位点的遗传距离分别为4.90、7.01、19.12和21.94 cM,无毒基因AVR-P ikm位于SCE121406和SSR47T34之间。本研究获得的稻瘟菌无毒基因AVR-P ikm的精细定位为通过染色体步移法克隆该基因奠定了基础。