无毛基因敲除小鼠PPARγ-PGC1α-UCP1信号通路蛋白的表达及棕色脂肪组织能量代谢状态的变化

目的:探讨无毛(Hr)基因缺陷对小鼠能量代谢的影响及机制。方法:雄性Hr基因敲除(Hr^(-/-))小鼠和同窝野生型(Hr^(+/+))小鼠各10只,记录小鼠从出生后10周内的体重;于第10周,使用代谢监测系统对小鼠的耗氧量、产热量、活动量以及24 h进食量和饮水量进行监测,测量肛温,ELISA法检测血清游离三碘甲状腺原氨酸(fT3)浓度,HE染色观察棕色脂肪组织(BAT),Western blot法检测BAT中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、PPARγ共激活因子1α(PGC1α)、解偶联蛋白1(UCP1)蛋白的表达。结果:出生后第1周至第10周,两组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。第10周,两组小鼠血清fT3浓度和活动量差异无统计学意义(P>0.05);与Hr^(+/+)小鼠比较,Hr^(-/-)小鼠的肛温、24 h进食量和饮水量、耗氧量和产热量升高(P<0.05),BAT内较多小空泡脂滴和较少大空泡脂滴,BAT中PPARγ、PGC1α、UCP1蛋白表达增加(P<0.05)。结论:Hr基因缺陷可能通过激活PPARγ-PGC1α-UCP1信号通路,调节BAT能量代谢,从而使小鼠处于高能量代谢和高体温状态。

无毛蛋白在乳腺癌变和进展过程中的表达及临床意义

目的探讨无毛蛋白(hairless protein,Hr)在乳腺癌变和进展过程中的表达及临床意义。方法收集2007年1月至2015年12月石河子大学医学院第一附属医院石蜡包埋乳腺癌旁正常组织81例(距癌组织>5 cm)、普通型导管增生79例、不典型导管增生26例、导管原位癌64例、浸润性导管癌138例。免疫组织化学法和数据库检测Hr在乳腺癌旁正常组织、普通型导管增生、不典型导管增生、导管原位癌、浸润性乳腺癌中表达,分析Hr表达与病人临床病理参数间关系及对预后的影响。结果浸润性导管癌中Hr蛋白免疫组织化学评分[(4.14±3.78)分]显著低于乳腺癌旁正常组织[(6.28±4.43)分]、普通型导管增生[(6.85±4.20)分]、不典型导管增生[(6.12±3.84)分]、导管原位癌[(5.41±3.86)分],五组间差异有统计学意义(P<0.001)。Hr表达与淋巴结转移、TNM晚分期和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体-2(HER-2)阴性状态(P<0.05)显著相关,Hr蛋白在骨转移乳腺癌中高表达(P=0.001)且与骨转移显著正相关(P=0.005)。Hr高表达的乳腺癌病人无复发生存率和总生存率显著降低(P<0.05)。结论Hr在乳腺癌变和早期浸润阶段发挥抑癌基因功能,在肿瘤恶性进展和转移尤其骨转移过程中起促进作用,与病人预后不良密切相关。

无毛小鼠同类系的建立

目的 :培育包含无毛基因的同类系小鼠新品系 ,明确无毛基因在不同遗传背景下的表达方式。方法 :将无毛基因通过杂交互交导入法分别导入 6 15、C57BL/6、BALB/c、DBA/2共 4种近交系。结果 :已完成 4代导入 ,杂交的第 1代、第 3代均表现有毛 ,第 2代、第 4代互交育出 6 15、C57BL/6、BALB/c、DBA/2共 4种无毛小鼠 ,其脱毛规律同豫医无毛小鼠。结论 :无毛基因可以在不同的遗传背景下表达。

豫医无毛小鼠无毛基因部分DNA序列分析

目的:探讨豫医无毛小鼠的无毛基因突变情况。方法:采用PCR方法扩增豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列,并进行克隆测序,将测序结果与国外公布的小鼠、大鼠及人无毛基因的cDNA序列做同源性比较和分析,确定该鼠无毛基因的特异性。结果:克隆测序结果为一923bp的片段,相当于Genbank上公布的小鼠无毛基因cDNA序列的3150～3565bp位置,包含4个外显子(外显子13～16)及3个内含子(内含子13～15);与本室以前所测昆明小鼠无毛基因部分DNA序列100%同源,其外显子部分共416bp,可编码138个氨基酸,与国外公布的小鼠、大鼠、人的无毛基因核苷酸同源性分别为100%、95%、84%,氨基酸同源性分别为100%、97.8%、84%。结论:①克隆定序了豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列;②排除了豫医无毛小鼠无毛基因的突变发生于本段序列的可能;③无毛基因在哺乳动物体内同源性很高,应属保守基因,其蛋白质产物可能在一些基本的调节途径中起重要作用,推测豫医无毛小鼠的无毛基因可能也位于14号染色体。

豫医无毛小鼠无毛基因的比较生物学分析

目的:分析豫医无毛小鼠与其他物种间无毛基因组成的差异。方法:采用RT-PCR方法对豫医无毛小鼠无毛基因的cDNA序列进行克隆测序,并借助生物信息学分析技术对小鼠、大鼠、猴和人的无毛基因及其所编码的氨基酸序列进行比较生物学分析。结果:获得了豫医无毛小鼠无毛基因的全长4 014 bp的cDNA序列(GenBank登录号:AY547390)。豫医无毛小鼠与国内外报道的2种小鼠、大鼠、猴、人等5种动物的核苷酸同源性分别为99.9%、99.7%、94.3%、81.7%、81.8%,氨基酸同源性分别是99.8%、99.7%、94.5%、79.8%、80.0%。结论:无毛基因是一个高度保守基因,不同物种间具有高度同源性。

BALB/c无毛同类系小鼠的分子遗传学特征分析

目的:探讨BALB/c无毛同类系小鼠无毛基因表型的分子遗传学基础。方法:采用PCR和RT-PCR方法扩增BALB/c无毛同类系小鼠和BALB/c小鼠无毛基因的部分序列,并对测序结果进行对比分析。结果:BALB/c无毛同类系小鼠无毛基因3110位碱基(外显子12)发生G→A突变,使911位的色氨酸密码子(TGG)突变为终止密码子(TGA)。结论:BALB/c无毛同类系小鼠谱系清楚,遗传机制明确,将是一种有价值的动物模型。

无毛肉鸡和无毛基因研究

2017年8月中旬,杭州市农业科学研究院邀请以色列希伯莱大学卡汉纳教授来杭进行学术交流。卡汉纳教授是国际上较早并主要研究无毛鸡的专家之一,在学术界享有盛誉。他育成了在高温环境下具有生长和肉质性能更佳的无毛商品肉鸡,适应热带和亚热带地区养殖。根据双方交流,结合文献资料,下面就无毛鸡和无毛基因的有关研究作一概述。

豫医无毛小鼠中期染色体标本中无毛基因的原位PCR检测

目的 确立豫医无毛小鼠无毛基因的原位PCR荧光检测方法。方法 应用原位PCR的方法对豫医无毛小鼠中期染色体标本的无毛基因进行检测 ,并设立PCR反应液中无TaqDNA聚合酶、无引物、无bio - 11-dUTP等进行多组对照。结果 染色体标本上出现 1～ 2个黄绿色的扩增信号 ,而对照组则无。

黄瓜无毛突变体的生理特性研究

黄瓜无毛突变体与普通黄瓜相比 ,幼苗的各种性状均没有明显变化 ;成株矮化明显 ,雌花数降低 ,产量明显下降 ,但雌花节率没有明显变化 ,蒸腾速率、气孔导度较高 ,其他光合作用指标没有明显变化。遗传研究表明 ,无毛性状是由一对核基因控制的隐性性状。

黄瓜茎叶无毛性状与果实瘤刺性状的遗传关系

黄瓜茎叶表面皮毛性状由一对核基因控制 ,有毛为显性 (Gl) ,无毛为隐性(gl)。皮毛基因参与果实表面性状的表达 ,与果瘤基因 (Tu tu)共同作用 ,使果实表面出现有瘤有刺、无瘤有刺、无瘤无刺三种类型 ,符合 9∶3∶4比例 。

黄瓜无毛突变体叶片叶绿体超微结构与光合特性

观测了无毛突变体黄瓜与有毛黄瓜坐果期叶片的叶绿体超微结构和光合特性。与有毛黄瓜相比 ,无毛黄瓜光合机构的结构较简单 ,叶肉细胞内叶绿体数量少 ,叶绿体内基粒数和基粒片层数少。叶绿素a、b及类胡萝卜素含量仅为有毛黄瓜的一半。无毛黄瓜光合速率明显比有毛黄瓜低 ,在一天的大部分时间内低于有毛黄瓜 5 0 %。无毛黄瓜的光合速率日变化呈单峰曲线 ,峰值出现于 11时 ,有毛黄瓜光合速率日变化呈双峰曲线 ,两峰出现在 10时和 12时左右。无毛黄瓜的光合速率随CO2 浓度的增加而增加 ,在130 0 μL·L-1CO2 下 ,达到最大值 ,但同样浓度情况下 ,其光合速率明显比有毛黄瓜的低。

昆明小鼠无毛基因cDNA全长序列的分子克隆

无毛基因是与皮肤和被毛结构有重要关联的核受体基因,编码一个锌指结构转录因子,是甲状腺激素受体的转录辅阻遏物,并参与毛发生长周期的调控,在维持毛囊及毛囊间上皮的增殖、分化、调亡的精致平衡中扮演重要角色。参考小鼠、人的无毛基因序列,用RT-PCR方法首次对昆明小鼠无毛基因的cDNA序列进行了克隆,获得了昆明小鼠无毛基因的全长4 014 bp cDNA序列(GenBank登录号:AY547391),基因的CDS长度为3 546 bp。AY547391基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAT45233,由1181个氨基酸组成。昆明小鼠与国外报导的小鼠、大鼠、猪、羊、猴、人等6种动物CDS序列同源性分别为99.9%、94.4%、83.1%、78.1%、81.9%、82.1%,氨基酸同源性分别是99.9%、92.2%、81.7%、70.8%、79.9%、80.1%。这一结果反应了无毛基因在进化过程的高度保守性。通过Blast比较昆明小鼠无毛基因与GenBank数据库中收集的Hr基因的mRNA,发现了4个SNP和一个缺失突变,其中3个位点没有改变氨基酸残基的性质,两个位点有氨基酸改变并证实为多态性突变位点,研究结果为无毛基因SNPs的数据库提供了新的信息。

温室白粉虱对无毛黄瓜叶片PAL、PPO、POD活性的影响

以抗白粉虱能力不同的两类型黄瓜自交系为试材,研究了白粉虱侵害黄瓜后不同类型叶片中POD、PAL、PPO活性变化。结果表明:无毛黄瓜较有毛黄瓜抗白粉虱,抗性材料无毛黄瓜遭受白粉虱危害后,第二、三叶POD活性增长量分别高于有毛黄瓜53.24%(P<0.01)和86.74%(P<0.01);第二、三叶的PAL酶活性增长量高于有毛黄瓜,且第三叶酶活性增长量高于有毛黄瓜322.27%(P<0.01);接种后两类型黄瓜各个叶片PPO活性差异不显著,无毛黄瓜第一叶和第二叶PPO活性增长量分别高于有毛黄瓜42.63%和51.59%,但差异不显著。

豫医无毛小鼠生殖及乳腺功能观察

目的 :研究皮肤无毛对豫医无毛雌鼠的生殖、乳腺功能的影响。方法 :将无毛雌性小鼠与正常小鼠交配 ,统计胎次 ,妊娠 ,胎产子数 ,离乳数 ,离乳率。并与有毛雌鼠比较。结果 :无毛雌鼠卵巢发育正常 ,乳腺发育基本正常 ,但泌乳能力差异很大 ,功能正常的只有 30 % ,与有毛雌鼠相比 ,无毛雌鼠妊娠率 (2 3 %～ 70 % ) ,胎产子数(5 .3～ 6 .8)、离乳数 (0～ 1 .5只 )及离乳率均低 (0～ 2 6 % ) ,幼鼠死亡率高 (74.6 %～ 1 0 0 % )。结论 :皮肤无毛导致无毛小鼠泌乳能力。

黄肉无毛猕猴桃新品种‘鄂猕猴桃3号’

‘鄂猕猴桃3号’是直接从野生中华猕猴桃资源中选育出来的早熟黄肉无毛新品种,平均单果质量85g,最大155g,果实长圆柱形,果面棕绿色,较光滑,果肉金黄色,品质上,可溶性固形物15·0%,维生素C557·0mg/kg,在武汉9月上中旬成熟,常温下可贮放15d,冷藏可达50d。

黄瓜突变新类型——无毛黄瓜

黄瓜植株茎叶、卷须均覆短刚毛，多数子房表面有瘤状突起，瘤上有刺〔１〕。戚春章等人曾于１９８４年发现了软毛无卷须黄瓜突变类型：植株茎叶表面覆软毛，无卷须，雄花单生或双生，果实表面无瘤刺，植株多数叶腋间是无花芽的空节〔２〕，该发现丰富了黄瓜的种质资源。Ｒ...

无毛黄瓜抗蚜与叶片营养物质关系的探究

选取无毛黄瓜突变体、少毛黄瓜突变体以及有毛黄瓜‘山农5号’为试材,研究了接种蚜虫前后蚜虫数量及黄瓜叶片中4种重要营养物质含量的变化。结果表明:无毛黄瓜具有明显的抗蚜性。与对照相比无毛黄瓜叶片中的含水量、可溶性糖、可溶性蛋白和游离氨基酸均较低,说明缺乏必需营养物质是无毛黄瓜抗蚜的原因之一。

豫医无毛小鼠无毛基因DNA原位PCR检测

目的 :探讨原位PCR技术对检测基因组变异的有效性。方法 :应用原位PCR检测豫医无毛小鼠皮肤和脾的石蜡组织切片 ,并以健康昆明小鼠皮肤和脾的石蜡组织切片、PCR反应液不加TaqDNA聚合酶、不加引物和引物不带生物素作为对照。结果 :豫医无毛小鼠皮肤和脾石蜡组织切片中检测到清晰的杂交信号 ,而且杂交信号位于细胞核内 ;4组对照均未出现杂交信号。结论 :原位PCR在基因组变异检测方面实用。

猕猴桃黄肉无毛新品种鄂猕猴桃2号的选育

鄂猕猴桃2号是从野生中华猕猴桃中实生选育的猕猴桃新品种,果实广椭圆形,平均单果重80g,最大单果重135g;果面绿褐色,无毛,果肉金黄色,品质上等,可溶性固形物含量14.3%～15.2%,维生素C含量6548.00～9390.00μg/g;在武汉地区果实8月中下旬成熟,冷藏条件下可贮藏30天。2004年3月通过湖北省农作物品种审定委员会品种审定,并命名。