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比较pta及ack敲除对钝齿棒杆菌产L-精氨酸生理代谢的影响
1
作者
万方
张斌
+2 位作者
陈民良
陈进聪
陈雪岚
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期28-34,共7页
旁支代谢途径的截断有利于目的氨基酸合成途径的集流。基于基因组尺度代谢网络模型的预测,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过无痕敲除技术分别敲除了编码磷酸乙酰基转移酶的pta基因及编码乙酸激酶的ack基因,...
旁支代谢途径的截断有利于目的氨基酸合成途径的集流。基于基因组尺度代谢网络模型的预测,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过无痕敲除技术分别敲除了编码磷酸乙酰基转移酶的pta基因及编码乙酸激酶的ack基因,阻断了乙酸的合成。摇瓶发酵结果表明,pta缺失菌株精氨酸产量较出发菌株提高了25.60%,达15.46g/L。葡萄糖转化率提高了29.41%;ack缺失菌株精氨酸产量达13.82g/L,较出发菌株提高了12.81%,葡萄糖转化率提高了26.02%。同时,pta及ack敲除菌株的细胞生长较出发菌株均分别提高了9.19%及7.71%。因此,pta、ack的敲除不仅有利于精氨酸的合成,而且对菌体生长具有促进作用;但pta的敲除更有利于精氨酸的积累。
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关键词
钝齿棒杆菌
精氨酸
无痕敲除技术
基因组尺度代谢网络模型
生理代谢
原文传递
钝齿棒杆菌argR基因缺失株构建及其缺失对精氨酸生物合成途径相关基因转录水平的影响
被引量:
5
2
作者
陈雪岚
汤立
+2 位作者
焦海涛
徐峰
熊勇华
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期92-98,共7页
【目的】钝齿棒杆菌AS 1.542中argR基因编码的蛋白ArgR在精氨酸生物合成途径中扮演负调控的角色,但其对相关基因在转录水平的影响还未见报道。因此,本课题组构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并在转录水平上比较野生株与缺失株精氨酸生...
【目的】钝齿棒杆菌AS 1.542中argR基因编码的蛋白ArgR在精氨酸生物合成途径中扮演负调控的角色,但其对相关基因在转录水平的影响还未见报道。因此,本课题组构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并在转录水平上比较野生株与缺失株精氨酸生物合成途径相关基因的变化。【方法】采用无痕敲除的方法构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并采用荧光定量PCR方法分析缺失株和野生株精氨酸生物合成途径相关基因在转录水平的变化。【结果】利用pK18mobsacB质粒中蔗糖致死基因sacB反向筛选标记及PCR方法成功筛选到钝齿棒杆菌argR基因缺失株;荧光定量PCR结果表明,argR基因缺失株精氨酸生物合成途径中相关基因在转录水平获得大量提高,平均约上调162.13倍。【结论】钝齿棒杆菌精氨酸生物合成途径的相关基因受负调控蛋白ArgR的显著调控,但其基因的敲除并没有引起精氨酸产量发生明显的变化。
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关键词
钝齿棒杆菌
argR基因
无痕敲除技术
精氨酸
荧光定量PCR
原文传递
题名
比较pta及ack敲除对钝齿棒杆菌产L-精氨酸生理代谢的影响
1
作者
万方
张斌
陈民良
陈进聪
陈雪岚
机构
江西师范大学生命科学学院
南昌大学生命科学学院
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期28-34,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(31360219
30960012)
文摘
旁支代谢途径的截断有利于目的氨基酸合成途径的集流。基于基因组尺度代谢网络模型的预测,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过无痕敲除技术分别敲除了编码磷酸乙酰基转移酶的pta基因及编码乙酸激酶的ack基因,阻断了乙酸的合成。摇瓶发酵结果表明,pta缺失菌株精氨酸产量较出发菌株提高了25.60%,达15.46g/L。葡萄糖转化率提高了29.41%;ack缺失菌株精氨酸产量达13.82g/L,较出发菌株提高了12.81%,葡萄糖转化率提高了26.02%。同时,pta及ack敲除菌株的细胞生长较出发菌株均分别提高了9.19%及7.71%。因此,pta、ack的敲除不仅有利于精氨酸的合成,而且对菌体生长具有促进作用;但pta的敲除更有利于精氨酸的积累。
关键词
钝齿棒杆菌
精氨酸
无痕敲除技术
基因组尺度代谢网络模型
生理代谢
Keywords
C.crenatum L-arginine Markerless knock-out technology Genome-scale metabolic network model Physiological metabolism
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
钝齿棒杆菌argR基因缺失株构建及其缺失对精氨酸生物合成途径相关基因转录水平的影响
被引量:
5
2
作者
陈雪岚
汤立
焦海涛
徐峰
熊勇华
机构
江西师范大学功能有机小分子教育部重点实验室
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期92-98,共7页
基金
国家自然科学基金(30960012,31160323)~~
文摘
【目的】钝齿棒杆菌AS 1.542中argR基因编码的蛋白ArgR在精氨酸生物合成途径中扮演负调控的角色,但其对相关基因在转录水平的影响还未见报道。因此,本课题组构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并在转录水平上比较野生株与缺失株精氨酸生物合成途径相关基因的变化。【方法】采用无痕敲除的方法构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并采用荧光定量PCR方法分析缺失株和野生株精氨酸生物合成途径相关基因在转录水平的变化。【结果】利用pK18mobsacB质粒中蔗糖致死基因sacB反向筛选标记及PCR方法成功筛选到钝齿棒杆菌argR基因缺失株;荧光定量PCR结果表明,argR基因缺失株精氨酸生物合成途径中相关基因在转录水平获得大量提高,平均约上调162.13倍。【结论】钝齿棒杆菌精氨酸生物合成途径的相关基因受负调控蛋白ArgR的显著调控,但其基因的敲除并没有引起精氨酸产量发生明显的变化。
关键词
钝齿棒杆菌
argR基因
无痕敲除技术
精氨酸
荧光定量PCR
Keywords
Corynebacterium crenatum, argR gene, marker-less knock-out technology, arginine, real-time quantitative PCR
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
比较pta及ack敲除对钝齿棒杆菌产L-精氨酸生理代谢的影响
万方
张斌
陈民良
陈进聪
陈雪岚
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
原文传递
2
钝齿棒杆菌argR基因缺失株构建及其缺失对精氨酸生物合成途径相关基因转录水平的影响
陈雪岚
汤立
焦海涛
徐峰
熊勇华
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
原文传递
已选择
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