不育男性无精子症因子微缺失的分子与临床特征:5年研究回顾

目的:近年来,Y染色体长臂无精子症因子(AZF)微缺失与男性不育关系的研究已经取得了很大的进展。然而,AZF微缺失的形成机理及各种缺失类型与临床表型之间的关系还不十分确定。本研究的目的是探讨中国不育男性的Y染色体微缺失的发生率、缺失类型以及基因型与表型之间的关系。方法:本研究对2005年至2009年本院男科门诊502例非梗阻性无精子症和306例严重少精子症的不育男性进行Y染色体AZF缺失分析。结果:AZF总体缺失率为7.80%(63/808),其中无精子症不育男性缺失率为9.16%(46/502),严重少精症患者为5.56%(17/306)。完全的AZFa缺失或AZFb缺失患者的精液中均没有成熟精子,而AZFc缺失的表型是多样化的。1例部分AZFb缺失患者有成熟精子发生,精子密度呈轻度进行下降。最常见的缺失类型为AZFc b2/b4亚型,占60.32%(38/63),其中39.47%(15/38)的患者精液中能发现成熟精子,其中1例为自然遗传的AZFc b2/b4缺失。63例缺失患者中仅1例AZFc b2/b4缺失患者的精子密度超过2×109/L。结论:AZF微缺失对精子发生障碍具有良好的诊断和评估价值。对Y染色体微缺失的大样本临床研究有利于进一步明确基因型与表型的关系,更好地理解AZF缺失的机制。

QF-PCR筛查男性不育患者Y染色体无精子症因子微缺失

为评估定量荧光PCR(Quantitative fluorescent polymerase chain reaction,QF-PCR)技术在快速筛查无精子症因子(Azoospermia factor,AZF)微缺失中的应用,文章对1218例非梗阻性无精子症、少精子症的男性不育患者,采用多重QF-PCR结合毛细管电泳技术,检测Y染色体长臂AZF区9个序列标签位点(Sequence tagged site,STS)以及性染色体短臂的AMEL(Amelogenin)和SRY(Sex-determining region of Y chromosome)位点,辅以常规染色体G显带方法进行核型分析。结果显示,1218例患者中105例可见AZF区微缺失(8.62%),其中AZFc区缺失(67.62%)最常见,其次为AZFb,c区缺失(20.95%);AZFb区缺失(7.62%)和AZFa区缺失(3.81%)则较少见;另有5例患者为AZFa,b,c区缺失合并AMEL-Y缺失,提示可能缺少Y染色体,经核型分析验证为46,XX(性反转)。105例AZF区微缺失患者的染色体核型分析显示染色体异常16例,其中"Yqh-"12例。根据AMEL-X/AMEL-Y比值,可见1218例患者中86例可能存在性染色体异常,经核型分析验证,68例为性染色体非整倍体。多重QF-PCR技术,一个反应即能检测样本的多个位点,并可提示性染色体是否存在异常,有助于男性不育患者尽早明确病因,也为后续的检查和治疗提供依据。

Y染色体无精子症因子区及男性不育相关基因研究进展

本文综述Y染色体无精子症因子(AZF)区及其与精子生成相关候选基因的研究进展。在人类Y染色体有一段与无精子症相关的缺失区域,即AZF区,它分为a、b和c区。AZFa缺失一般表现为唯支持细胞综合征(SCOS),区域内有USP9Y、DBY和UTY等与精子生成相关的候选基因;AZFb区的缺失一般为从SCOS到生殖细胞阻滞等表型,区域内有RBMY、SMCY、EIF1AY和CDY2等候选基因;AZFc区缺失的性状较分散,主要候选基因有DAZ、CDY1等。不育男性中AZF区总缺失率约为8.2%,不同报道结果不同,这可能与人种、研究方法和病例的纳入标准有关。在卵胞浆内单精子注射(ICSI)等辅助生育技术日益普及的今天,进行不育男性Y染色体微缺失筛查对防止这种基因缺陷的遗传具有重要意义。

Y染色体无精子症因子c区缺失男性不育患者同步显微取精术后行卵胞浆内单精子显微注射的临床结局

目的:评价同步显微镜下睾丸切开取精术结合卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对Y染色体长臂上无精子症因子c区(azoospermia factor c region,AZFc)缺失所致男性不育患者的临床治疗效果,指导AZFc缺失男性不育患者的临床治疗。方法:回顾性分析了自2015年1月到2019年12月因AZFc缺失所致男性不育患者在北京大学第三医院生殖医学中心行显微取精术的临床资料,追踪随访了同步显微取精手术中成功获取精子的患者使用睾丸精子行ICSI助孕的临床结局,比较了首次同步显微取精术与第二次同步显微取精术患者的临床结局,包括受精率、临床妊娠率、流产率和活产率等。结果:共有195例AZFc缺失的男性不育患者接受显微取精术,其中14例为隐匿性精子症,术中均成功发现精子,精子获得率为100%(14/14);181例为非梗阻性无精子症(non-obstructive aoospermia,NOA),122例成功发现精子,精子获得率为67.4%(122/181),余59例NOA患者在显微取精术中未发现精子,占32.6%(59/181)。我们随访了手术成功发现精子的患者中,选择夫妻双方同步取精、取卵且不行胚胎植入前遗传学检测患者的临床结局,纳入研究的99例患者共进行了118人次显微取精术和120个ICSI周期助孕,最终有38例患者成功活产,累积活产率38.4%(38/99),总共分娩出22个健康男婴和22个健康女婴,其中在首次和二次同步显微取精术的新鲜精子-ICSI周期中,优质胚胎率、新鲜周期临床妊娠率和取卵周期活产率分别为47.7%vs.50.4%、40.5%vs.50.0%、28.3%vs.41.2%,第二次同步手术组略高于首次同步手术组,但组间差异没有统计学意义。结论:对AZFc缺失导致的男性不育患者,有较大的概率通过显微取精在睾丸中成功获取精子,并结合ICSI生育自己的遗传学后代,对首次同步ICSI周期未成功的患者,有机会通过再次手术取精和ICSI成功孕育后代。

Y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床探讨

目的：筛查男性不育患者Y染色体无精子症因子（AZF）微缺失发生率，并分析缺失类型与临床表型的关系。方法选取2013年1～12月于佛山市妇幼保健院男科就诊的男性不育症患者200例，其中非梗阻性无精子症141例，重度少精子症59例；另选取100例正常孕育男性作为阳性对照；100例正常孕育女性作为阴性对照。采用聚合酶链反应分析男性Y染色体 AZF微缺失。结果特发性不育组AZF微缺失率显著高于非特发性不育组，差异有统计学意义（P＜0．05）。在所有AZF微缺失类型中以AZFc最常见，占55．6％；非梗阻性无精子症组与重度少精子症组微缺失率及微缺失类型分布情况比较，差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论 Y 染色体 AZFa、AZFb、AZFc区微缺失与男性不育具有密切的相关性。

Y染色体无精子症因子缺失与男性不育的关系

目的探讨Y染色体无精子症因子(AZF)缺失与男性不育的关系。方法随机选取男科门诊不育症患者728例,其中正常精子密度46例,少精子症459例,严重少精子症93例,非梗阻性无精子症71例,梗阻性无精子症45例,射精功能障碍14例;另设正常对照组50名。应用PCR对Y染色体序列标准位点sY84、sY86、sY127、sY134、sY254及sY255进行检测。结果728例不育症患者中,AZF缺失共18例,缺失发生率为2.47%,与正常对照组(0%)比较有统计学差异(P=0.000)。其中严重少精子症8例(8.60%),非梗阻性无精子症10例(14.08%)。结论AZF缺失是男性不育症,特别是无精子症和严重少精子症发病的重要原因之一,其基因检测为男性不育的病因诊断、治疗及预后提供了一定依据。

1011例男性不育患者Y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床表型分析

目的探讨四川地区近6年不育男性Y染色体无精子症因子（azoospermia factor，AZF）微缺失的发生率、缺失类型及其与临床表型的关系。方法应用多重PCR方法对713例非梗阻性无精症和298例重度少精症的男性进行Y染色体AZF微缺失分析。结果AZF总体缺失率为10．48％（106／1011），其中非梗阻性无精症患者缺失率为11．08％（79／718），重度少精症患者缺失率为9．06％（27／298）。AZFa与AZFb完全缺失者均表现为无精症。AZFc缺失为最常见缺失类型且具有多种表型，占60．38％，其中37．50％的缺失者精液中有成熟精子。2例AZFb和1例AZFb—c部分缺失者精子密度呈轻度下降。结论AZFc区是Y染色体AZF微缺失的缺失热点，AZFa或AZFb缺失者以及部分AZFc缺失者均表现为无精症。本研究进一步明确了AZF缺失基因型与表型的关系，证实Y染色体AZF微缺失检测对诊断男性不育具有重要的价值。

无精子症因子与男性不育的研究进展

精子发生障碍是男性不育最主要的临床表现，影响精子发生的因素众多，遗传学因素与其密切相关，其中无精子症因子与精子发生关系密切，现就其与精子发生和男性不育的研究现状作一综述。

新疆地区维吾尔族和汉族男性不育患者Y染色体无精子症因子微缺失分析

目的评估新疆地区汉族、维吾尔族不育男性不明原因无精子症和严重少弱精子症患者Y染色体AZF基因微缺失的频率,探讨不同民族间Y染色体AZF基因微缺失发生率的差异。方法以Y染色体无精子因子(AZF)区20个序列标签位点(STS)设计特异引物,采用多重PCR方法对449例(汉族347例,维吾尔族102例)不育男性患者进行Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失检测,并比较不同民族的患者Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失发生率的差异。结果 347例汉族患者中有11例(3.17%)存在Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失,102例维吾尔族患者检出10例(9.80%)存在Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失,在所有被检出有Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失的患者中AZF区联合缺失19例(90.47%)。其中AZFb区缺失(100%)最常见,其次为AZFc区缺失(71.4%);AZFa区缺失(23.8%)和SRY基因的缺失(19.05%)。汉族患者与维吾尔族患者Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失率(χ2=7.781,P=0.005)及AZF多位点联合缺失发生率差异(χ2=6.867,P=0.009)均有统计学意义(P<0.05)。结论无精子症和严重少弱精子症不育男性患者中Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失发生率及AZF多位点联合缺失发生率存在民族差异,PCR检测AZF基因是诊断Y染色体无精子因子(AZF)区微缺失的较好的方法。

Y染色体无精子症因子c区域缺失一例

患者男，33岁，结婚两年，性生活正常，未采取任何避孕措施，至今未生育。查性激素水平在正常范围。精液检查，每高倍镜下可见2-4条精子，其中活动精子0～1条，圆形细胞0～1个。B超检查，左侧精索静脉内径1．7mm，右侧精索静脉1．2mm，双侧静脉乏式试验均无返流。患者妻子各项检查均在正常范围。

对无精子症和严重少精子症患者Y染色体畸变和微缺失的研究及评估

目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermicfac-tor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法。对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系。方法对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF的3个位点8对引物PCR扩增,检测染色体畸变和Y染色体微缺失率。选取6个Y染色体特异性序列标签位点(STS),用PCR技术检测145例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况。结果145例中染色体核型异常12例,占8.3%。AZF区微缺失21例,缺失率为14.5%。无精子症和严重少精子症AZF缺失率分别为14.70%和11.62%。145例中AZF区微缺失21例,表现为无精子症。缺失均在AZFc区,7例为DAZ(sY254、sY255)缺失,另2例为DNA加sY157缺失。结论染色体畸变和Y染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一。无精子症缺失率高于严重少精子症患者。AZF3个位点8对引物PCR扩增可作为Y染色体微缺失的临床筛查方法。

长春地区425例非梗阻性无精子症患者AZF区微缺失分析

目的探讨长春地区非梗阻性无精子症患者全血基因组AZF区微缺失情况。方法收集长春地区425例男性无精子症患者外周血,用多重PCR的方法对AZF基因4个区域的序列标志位点(STS)进行检查。结果425例无精子症患者中共26例发现AZF区微缺失,占6.12%。其中单独AZFa缺失1例;单独AZFb缺失1例;单独AZFc缺失9例;未发现单独AZFd缺失。所有AZF缺失的患者中带有AZFc缺失共24例,占92.31%。结论长春地区非梗阻性无精子症患者AZF区微缺失以AZFc缺失为主。

男性原发无(少)精子症Y染色体微缺失的筛查研究

目的:探讨男性原发无精子症和少精子症与Y染色体无精子症因子(AZF)微缺失的关系。方法:应用多重PCR技术对原发无精子症(24例)和少精子症(19例)患者基因组DNA进行Y染色体连锁的6个序列标签位点缺失分析。结果:43例患者中检出有Y染色体微缺失4例,缺失率为9.3%,其中无精子症3例,少精子症1例。结论:Y染色体微缺失是原发无精子症和少精子症的重要原因之一,对原发无精子症和少精子症患者进行Y染色体微缺失的常规筛查是有必要的。

gr/gr和b2/b3缺失中不同DAZ拷贝缺失与精子发生障碍的相关性研究

目的:研究AZFc区gr/gr和b2/b3缺失中DAZ基因拷贝缺失对中国男性精子发生障碍的影响。方法:试验组纳入121例不同程度生精障碍的不育男性,对照组选择了95例健康男性且均符合《WHO人类精液检查与处理实验室手册》第5版标准,通过常规PCR和PCR-RFLP以及Y染色体特异性序列标签位点(STS),分析AZFc区不同类型gr/gr和b2/b3缺失中DAZ基因拷贝缺失与男性精子发生障碍的关系。结果:对照组中共观察到13例(13.68%)gr/gr缺失和1例(1.05%)b2/b3缺失,试验组中发现15例(12.40%)gr/gr缺失及6例(4.96%)b2/b3缺失。DAZ特异性单核苷酸变异位点(SNV)分析显示对照组中有3例(3.16%)gr/gr-DAZ1/DAZ2缺失和10例(10.53%)gr/gr-DAZ3/DAZ4缺失以及1例(1.05%)b2/b3-DAZ3/DAZ4缺失,试验组中有11例(9.09%)gr/gr-DAZ1/DAZ2缺失和4例(3.31%)gr/gr-DAZ3/DAZ4缺失以及6例(4.96%)b2/b3-DAZ1/DAZ2缺失。结论:中国男性Y染色体AZFc部分缺失(gr/gr、b2/b3缺失)在正常生精者和不同程度的生精障碍患者中均存在,且差异无统计学意义,不能作为精子发生障碍的危险因素。但gr/gr和b2/b3缺失中不同类型的DAZ拷贝子缺失对男性精子发生的影响不同,DAZ1/DAZ2缺失与男性生精功能障碍相关,可能是导致男性不育的危险因素,而DAZ3/DAZ4缺失似乎对生精的影响很小或不起作用。

原发性少精、无精症患者Y染色体微缺失分子检测的应用研究进展

目前估计在育龄夫妇中的15%患有不育,而男性因素在不育病例中所占比例接近50%。精子发生障碍可由多因素引起,例如疾病、营养不良、内分泌紊乱、遗传缺陷和环境因素等。遗传缺陷包括基因突变和染色体异常所引起的精子发生障碍，估计占男性不育因素的30％。近年来研究表明，男性原发性少精、无精子症与Y染色体微缺失密切相关，总缺失率约为8．2％。通过辅助生殖技术如卵胞浆内单精子注射（ICSI）将使这种遗传缺陷传递给后代，

甘肃省不育症患者Y染色体微缺失的临床研究

全球约有15%的夫妻受到不孕不育的困扰,其中约50%归于男性因素[1-3]。男性不育的原因较为复杂,遗传因素是其中重要而又相对明确的病因,染色体核型和Y染色体微缺失是目前临床上遗传因素最常见的检查指标。Y染色体是人体最短的近端着丝粒染色体.

男性不育患者Y染色体AZF区域STS微缺失位点多重PCR法检测及其意义

目的:探讨Y染色体无精子症因子(AZF)区域的15个标签位点(STS)序列片段微缺失位点与男性不育(MI)的关系,为干预遗传性MI提供依据。方法:选择2 586例疑似MI患者作为研究对象,按照年龄分为≤20岁组(14例)、21~30岁组(988例)、 31~40岁组(1 318例)和≥41岁组(266例)。采用聚合酶链式反应(PCR)法对Y染色体AZF区域的15个STS序列片段进行检测并筛选异常结果,比较各组MI患者Y染色体微缺失情况。结果:在2 586例参检人群样本中发现207例Y染色体异常,占总体样本的8.00%;其中≤20岁组、21~30岁组、31~40岁组和≥41岁组检出Y染色体异常率分别为7.14%(1/14)、8.10%(80/988)、8.04%(106/1 318)和7.52%(20/266);各组患者基础位点合并扩展位点的缺失率比较差异有统计学意义(χ^(2)=10.836,P=0.013),21~30岁组患者基础位点合并扩展位点的缺失率明显高于31~40岁组(P<0.05);在总体受检样本中,发生基础位点片段缺失者52例,异常率为2.01%,各组患者异常率比较差异有统计学意义(χ^(2)=9.658,P=0.022);AZFc片段缺失者占所有受检人数1.39%,21~30岁组和31~40岁组患者AZFc缺失率明显高于≥41岁组(P<0.05),21~30岁组和31~40岁组患者总体缺失率比较差异有统计学意义(χ^(2)=3.612, P=0.040);各组患者sY127、 sY134合并sY105、 sY121、 sY1192、 sY153和sY160位点缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05),各组患者sY254、sY255合并sY105、sY121、sY1192、sY153和sY160位点缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05)结论:广西壮族自治区东北部地区主要生育年龄段男性Y染色体异常的主要原因是sY1192和sY153位点微缺失,其中以sY1192位点微缺失为主,且随着年龄增长,该位点突变检出率越高。

唐氏综合征高危孕妇血浆中游离胎儿DNA的Y染色体微缺失筛查

目的利用孕妇血浆中游离胎儿DNA在孕早期进行Y染色体微缺失筛查，诊断男性胎儿无精子症因子（AZF）缺失情况。方法留取2013年6月～2014年8月参加产前检测的16～34孕周唐氏综合征筛查高危孕妇的外周血标本89例，提取出全血基因组DNA后利用Y染色体微缺失检测试剂盒检测AZF微缺失。结果86例孕妇妊娠至胎儿出生，其中男胎孕妇45例，女胎孕妇41例。妊娠女性胎儿的孕妇血浆DNA仅扩增出ZFX／ZFY对照基因，而妊娠男性胎儿的孕妇血浆DNA同时扩增出SRY，ZFX／ZFY对照基因，且有3例样本检测出AZF基因微缺失。结论通过提取孕妇血浆中游离胎儿DNA能够检测出胎儿是否伴有AZF基因微缺失，从而提前预测胎儿今后罹患生精障碍的风险。

排除AZF微缺失为反复自然流产的原因

目的:探讨Y染色体上AZF微缺失和反复自然流产之间的关系。方法:收集26份男性流产胚胎的绒毛样本,51份配偶反复流产的男性血液,分别提取基因组DNA,选取位于Yq11.2上AZFa、AZFb和AZFc的12个STS位点,对流产胚胎绒毛样本和血液样本进行AZF的多重PCR检测。结果:流产胚胎的26份样本中没有发现AZF的微缺失,51份血液样本中也没有发现AZF的微缺失。结论:排除AZF微缺失为反复自然流产的原因。

无精子症和严重少／弱精子症ICSI子代与其他精子ICSI／IVF子代出生缺陷的比较研究

目的：观察无精子症和严重少／弱精子症患者借助卵胞质内单精子注射（ICSI）技术出生的子代与其他精子ICSI／体外受精（IVF）子代的出生缺陷情况。方法：将接受ICSI／IVF治疗的237对夫妇生育的300例子代按ICSI／IVF当日精液情况和受精方式分为附睾／睾丸精子ICSI组（A组，患者92例，子代118例）、严重少／弱精子ICSI组（B组，患者84例，子代106例）、非严重少／弱／畸形精子ICSI组（c组，患者35例，子代42例）、正常精子IVF组（D组，患者26例，子代34例）。对召回现场随访的子代进行出生缺陷病史询问、超声检查和无精子症因子（AZF）基因检测。结果：受访子代平均年龄为33．1±20．3（4-84）个月，新生儿出生缺陷率为1．7％（5／300），总出生缺陷率为4．7％（14／300），4组的出生缺陷率分别为5．1％（6／118）、3．8％（4／106）、2．4％（1／42）和8．8％（3／34），组间无统计学差异（P〉0．05）。112个家庭AZF基因检测显示B组有3对父子存在同样位点的AZF基因微缺失。结论：无精子症和严重少／弱精子症等严重男性不育症患者ICSI子代的出生缺陷发生率与其他较好精子或正常精子IVF子代相比无明显增加，AZF基因检测没有新增缺失位点和新增缺失病例。