卷曲蛋白在无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族-卷曲蛋白信号转导通路中的作用

卷曲蛋白（FRZ）最初鉴定于果蝇,因其与无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族（WNT）缠绕在一起而得名,是WNT家族的细胞表面受体,包括三个区域,是G蛋白偶联受体（GPCR）家族中的一员,具有和缺失GPCR的一些基本结构。FRZ信号转导通路分为依赖转录调节因子β-连环蛋白的经典和非经典信号转导通路。FRZ包括FRZ1~10,其调节作用非常广泛,不但在细胞水平上参与调控胚胎发育、干细胞分化和器官形成等过程,而且还在维持组织稳态、再生、塑性和修复中起着重要的作用。FRZ信号转导通路中的激动剂、拮抗剂以及以WNT/FRZ信号转导通路中的共受体,都被假定为潜在的治疗多种癌症、神经退行性变疾病和骨质疏松等重大疾病的靶点。WNT/FRZ相关信号转导通路网非常的复杂,其信号转导通路激活后的结果,潜在机制和相关因子研究都还不够透彻。探究该信号转导通路的特异性,量化其结合反应及系统的定位及其所激活的下游事件是非常重要的,但还需要更多的相关研究来逐步诠释这些问题。

刺猬蛋白和无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族在成骨细胞分化增殖中的作用

骨发生发育受到多种信号转导通路的调节,其中刺猬蛋白(HH)和无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族(WNT)信号转导通路协调成骨细胞的分化、增殖和成熟。本文就HH调节颞下颌关节的发生发育,核心结合因子-A1通过HH调节软骨细胞的增殖和成熟,HH调节梅克尔软骨分化,WNT信号转导通路在神经系统形成、成骨细胞分化增殖和全身骨骼发育中的作用,HH和WNT中的经典的β-连环蛋白促进成骨细胞分化和增殖,抑制软骨细胞和调节细胞分化和增殖等研究进展作一综述。

无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族基因与唇腭裂

无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族（WNT）糖蛋白是一组调控细胞增殖、分化和极性以及细胞移动的信号分子，其多种家族成员与唇腭裂发生密切相关。WNT-3基因位于17q21，其蛋白质主要通过经典WNT／β＋连环蛋白通路调节唇和腭的发生。WNT-3A基因位于1q24，主要表达于胎盘、气管、肺和结缔组织，其蛋白质通过调控神经脊细胞和腭间质细胞，影响颅面的发生进程及腭融合。WNT5A基因位于3p21～14，其蛋白质通过Ror2介导在非经典信号转导通路中调节腭发生。WNT-9B基因位于17q21，主要表达于上颌突、中鼻突和侧鼻突的外胚层，敲除该基因会出现唇裂和腭裂。WNT-11基因位于11q13．5，其蛋白质表达于腭中线缘上皮细胞，通过促进程序性细胞死亡参与腭板融合，与FGFR1b之间相互拮抗调节腭发生。研究删瑾因，可为进一步揭示唇腭裂病因及其机制提供思路。

基于Wnt1/β-catenin信号通路观察白藜芦醇对小鼠炎症相关结直肠癌的作用机制

目的基于无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路观察白藜芦醇对炎症相关性结肠癌(CAC)小鼠的抑制机制。方法采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导构建CAC小鼠,实验分为正常组、模型组、实验组、对照组,自造模开始,实验组每日定点腹腔注射100 mg/kg白藜芦醇,每日一次;对照组小鼠每日定点腹腔注射100 mg/kg的β-catenin通路抑制剂(iCRT14),每日一次;正常组、模型组小鼠腹腔注射等剂量的0.9%生理盐水。酶联免疫(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量。免疫组化检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的表达。免疫印迹技术(Western-blot)检测小鼠结肠组织中骨髓细胞瘤原癌基因(c-Myc)、Wnt1、β-catenin的表达。结果与正常组相比,模型组小鼠血清中IL-6、TNF-α的含量,以及结肠组织中MPO、c-myc、Wnt1、β-catenin的表达明显升高(P均<0.05);与模型组相比,实验组和对照组小鼠血清中IL-6、TNF-α的含量,以及结肠组织中MPO、c-myc、Wnt1、β-catenin的表达明显降低(P均<0.05)。结论白藜芦醇能够在炎症相关结直肠癌小鼠中发挥抗肿瘤、抗炎性的作用,可能是通过抑制Wnt1/β-catenin信号的激活实现的。

美沙拉嗪通过Wnt1通路改善溃疡性结肠炎小鼠结肠屏障功能的机制研究

目的:探讨美沙拉嗪(MSLZ)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠屏障的改善作用及其对无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)信号的调控机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(Control)、模型组(UC)、MSLZ组和MSLZ^(+)shWnt1组;除Control组外,其他组小鼠采用葡聚糖硫酸钠(DSS)构建UC模型。Control组、UC组、MSLZ组小鼠造模结束后每日腹腔注射5×10~9 pfu/ml NC-shRNA,MSLZ^(+)sh-Wnt1组小鼠每日腹腔注射5×10~9 pfu/ml shRNA-Wnt1;MSLZ组和MSLZ^(+)sh-Wnt1组小鼠每日灌胃400 mg/kg MSLZ,Control、UC组每日灌胃等剂量无菌蒸馏水。检测各组小鼠结肠长度,试剂盒检测各组小鼠血清D-乳酸(D-LA)和脂多糖(LPS)含量以及二胺氧化酶(DAO)活性;TUNEL染色检测各组小鼠结肠组织细胞凋亡;免疫组化检测结肠组织黏蛋白2(MUC2)和上皮细胞间紧密连接蛋白(Occludin)表达;Western blot检测结肠组织Wnt1、β-catenin、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:MSLZ能明显增加UC小鼠结肠长度,升高结肠组织MUC2、Occludin、Wnt1、β-catenin和Bcl-2表达,降低血清D-LA、LPS、DAO水平、结肠组织细胞凋亡率及Bax表达;MSLZ^(+)sh-Wnt1可部分逆转MSLZ对结肠屏障功能的保护作用(均P<0.05)。结论:MSLZ能抑制UC小鼠结肠黏膜细胞凋亡,减轻结肠组织病理损伤,改善结肠黏膜屏障功能,可能与激活Wnt1信号有关。

黄芪多糖调控Wnt1信号对糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱影响机制研究

目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)改善糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠糖脂代谢的分子机制,以及其对无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)信号的调控机制。方法采用高脂饲料诱导构建大鼠DM模型,随机分为模型组(DM)、黄芪多糖低剂量组(APS-L)、黄芪多糖高剂量组(APS-H)、激动剂组(SB216763),每组10只,另取10只正常大鼠作为对照组(Control)。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记试剂盒(TUNEL)检测大鼠肝脏和胰腺组织中的细胞凋亡,酶联吸附反应试剂盒检测大鼠血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,5,5',6,6'-四氯-1,1',3,3'-四乙基苯丙咪唑羰花青碘化物(JC-1)染色检测胰腺组织中的线粒体膜电位,免疫荧光检测胰腺组织中葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)和糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的表达,油红O检测肝组织中的脂质沉积,免疫组化检测肝组织中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)的表达,Western blot实验检测大鼠肝组织中Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl2-associated x protein,Bax)的表达。结果与Control组相比,DM组、APS-L组、APS-H组、SB216763组动物的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达均明显升高;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL、Bcl-2的表达均明显下降。与DM组大鼠相比,APS-L组、APS-H组、SB216763组大鼠FBG、TC、TG的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达明显下降;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL、Bcl-2的表达均明显升高。与APS-L组相比,APS-H组大鼠的FBG、TC、TG的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达均明显下降;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL及Bcl-2的表达明显升高。与APS-H组相比,SB216763组动物的FBG、TC、TG的含量,血清中MDA的水平,肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,肝组织中脂质沉积,肝组织中Wnt1、β-catenin、Bax的表达均明显升高;胰腺组织中的线粒体膜电位,胰腺组织中GLUT4、GSK-3β的表达,肝组织中FAS、LPL、Bcl-2的表达均明显下降,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪多糖能明显抑制DM大鼠的氧化应激,升高胰腺组织的线粒体膜电位,降低肝组织中的脂质沉积,抑制肝和胰腺组织中的细胞凋亡率,降低动物的血糖,这可能与抑制Wnt1信号的转导有关。

WNT4基因在妊娠妇女中的表达变化及对早产的预测价值研究

目的探讨无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族成员4(WNT4)基因在妊娠妇女中的表达变化及对早产的预测价值。方法采用便利抽样法,选取2019年1月至12月在本院分娩的80例妊娠孕妇为研究对象,根据分娩结局分为自发性早产组、足月组。比较两组孕妇一般资料及静脉血、脐带血WNT4表达水平变化,采用多因素Logistic回归分析进行自发性早产影响因素分析;绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估WNT4表达水平对自发性早产的预测价值。结果自发性早产组与足月组分娩孕周、新生儿出生体重、C反应蛋白、宫颈内口应变平均值、宫颈长度、静脉血及脐带血WNT4表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,宫颈长度、静脉血及脐带血WNT4表达水平为自发性早产危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,静脉血及脐带血WNT4表达检测对自发性早产预测的灵敏度、特异性较高,且联合检查时灵敏度、特异性更高。结论相较于足月产孕妇WNT4基因在自发性早产孕妇中表达升高;临床检测孕妇静脉血及脐带血WNT4表达对预测早产有一定价值。

骨硬化蛋白对牙骨质形成的影响及其机制

骨硬化蛋白是一种含有胱氨酸结的分泌型糖蛋白,可通过骨细胞突触传递至骨表面并作用于周围的成骨细胞,从而降低骨的发生发育速度。其机制在于骨硬化蛋白与无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族蛋白竞争性地结合辅助受体低密度脂蛋白受体相关蛋白5/6,促进β-连环蛋白磷酸化并降低β-连环蛋白水平,从而抑制成骨细胞的分化及活性。牙骨质为连接牙体和牙周组织间的桥梁,其功能在于维系牙体的稳固和牙周组织的健康。骨硬化蛋白参与并影响牙骨质的发生发育等各种生理性活动,因此进一步深入探讨骨硬化蛋白这一骨形成负性调控因子与牙骨质间的相互作用和机制,将有助于牙骨质相关再生领域的发展。

水飞蓟宾对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨水飞蓟宾对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及其机制。方法 将体外培养的软骨细胞分为对照组、诱导组(以10 ng·mL^(-1)IL-1β诱导处理)和低、中、高剂量实验组(在10 ng·mL^(-1)IL-1β诱导基础上分别以40,80,160μmol·L^(-1)水飞蓟宾处理)。用流式细胞术检测细胞凋亡率,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞中微管相关蛋白1(Beclin-1)、无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平。结果 对照组、诱导组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组细胞凋亡率分别为(3.24±0.60)%,(31.18±2.51)%,(28.04±2.10)%,(22.03±1.79)%和(17.48±0.69)%;MMP-13水平分别为(21.18±3.09),(84.05±5.12),(75.16±4.15),(59.71±3.31)和(40.43±2.72)μg·L^(-1);TNF-α水平分别为(4.66±0.55),(57.22±3.53),(50.38±2.16),(38.75±2.36)和(15.64±0.73)ng·L^(-1);IL-6水平分别为(7.38±0.69),(68.76±4.73),(60.88±3.21),(49.74±2.86)和(32.35±2.14)ng·L^(-1);Beclin-1蛋白表达水平分别为0.85±0.06,0.26±0.02,0.35±0.03,0.48±0.03和0.61±0.04;Wnt1蛋白表达水平分别为0.26±0.03,0.85±0.06,0.66±0.03,0.45±0.04和0.35±0.03;β-catenin蛋白表达水平分别为0.13±0.02,0.76±0.05,0.66±0.05,0.53±0.04和0.42±0.03。诱导组和对照组相比,各剂量实验组与诱导组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 水飞蓟宾可改善IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其作用机制可能与抑制炎症反应和Wnt/β-catenin信号通路活化有关。