猪miR-192靶向调控Wnt7a基因表达的研究

【目的】鉴定猪miR-192与Wnt家族成员7A(Wnt7a)基因之间的靶向关系,为进一步构建miR-192介导的胚胎通讯提供依据。【方法】使用miRNA pull-down鉴定miR-192和Wnt7a基因间的互作关系;利用生物信息学软件RNAhybrid 2.2预测miR-192和Wnt7a基因3′-UTR的结合位点,构建含有miR-192结合位点的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型基因片段,克隆至双荧光素酶报告基因质粒,通过NotⅠ、XhoⅠ酶切和测序进行鉴定;鉴定成功的质粒分别与miR-192 mimics和mimics NC共转染猪子宫内膜上皮细胞,检测双荧光素酶活性;将miR-192 mimics、mimics NC、miR-192 inhibitor、inhibitor NC分别与构建的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因质粒共转染至猪子宫内膜上皮细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测Wnt7a基因mRNA和蛋白的表达水平。【结果】pull-down结果显示,miR-192 mimics组与其阴性对照组相比,Wnt7a基因相对表达量极显著升高(P<0.01),miR-192 input组相对于其阴性对照组极显著降低(P<0.01);RNAhybrid 2.2软件预测到miR-192种子区与Wnt7a基因3′-UTR存在结合位点(UGACCUA);转染Wnt7a野生型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组相比双荧光素酶活性显著降低(P<0.05),转染Wnt7a突变型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组之间双荧光素酶活性无显著差异(P>0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,miR-192 mimics组Wnt7a基因mRNA相对表达量显著低于其阴性对照组(P<0.05),miR-192 inhibitor组显著高于其阴性对照组(P<0.05)。Western blotting结果表明,过表达miR-192极显著抑制了Wnt7a蛋白的表达(P<0.01),抑制miR-192后Wnt7a蛋白的表达量极显著上升(P<0.01)。【结论】miR-192能够与Wnt7a基因3′-UTR发生靶向作用并抑制其表达。研究结果可为今后深入研究miR-192在妊娠着床过程中的调控机制提供理论依据。

基于生物信息学分析WNT7B基因在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的:基于生物信息学分析WNT7B基因在肺腺癌(LUAD)中的表达及其临床意义。方法:应用生物信息学方法评价WNT7B在LUAD中的诊断和预后预测价值。通过TCGA、GEO数据库研究WNT7B基因在肺癌中表达情况,并分析WNT7B基因在肺癌和非癌组织中表达差异及其表达与生存率、免疫细胞浸润之间的关系。应用STRING数据库筛选共表达基因并构建调控网络,将共表达基因进行基因本体论(GO)以及京东基因和基因组(KEGG)富集分析,同时应用cBioportal探究WNT7B基因突变对肺癌患者生存期的影响。结果:与正常肺组织相比,LUAD组织中WNT7B基因表达水平明显升高(P<0.01),WNT7B基因作为标志物的灵敏度为0.628。K-M生存分析显示,高表达WNT7B组预后较差(P<0.05)。GSEA揭示了5条与WNT7B基因相关的信号通路,WNT7B基因突变的LUAD患者总生存期(P=0.035 8)的预后预测作用不佳。此外,还发现WNT7B基因表达与免疫显著相关。结论:WNT7B基因有望成为LUAD诊断、预后评估和治疗的新靶点,但仍须进一步开展临床相关研究。

Wnt7a基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及向神经元样细胞分化的影响

目的研究Wnt7a基因过表达对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和向神经元样细胞分化的影响。方法构建Wnt7a腺病毒,利用病毒感染MSCs,MTT法检测Wnt7a基因腺病毒感染前后MSCs增殖情况,Western blot检测细胞质和细胞核中β-catenin及CyclinD1表达的变化,比较诱导后向神经元样细胞的分化率。结果与对照组细胞相比,Wnt7a腺病毒感染组细胞增殖能力明显增强(P<0.05);细胞质和细胞核中β-catenin蛋白表达量均明显增加(P<0.05);CyclinD1的蛋白表达量也明显增加(P<0.05);诱导后向神经元样细胞分化率明显提高。结论 Wnt7a蛋白表达上调,可能通过提高β-catenin和CyclinD1表达来促进MSCs细胞增殖,Wnt7a蛋白同时促进MSCs向神经元样细胞的诱导分化。

SOX7基因对肝癌细胞凋亡、氧化应激及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨过表达SOX7对肝癌细胞凋亡、活性氧(ROS)水平及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:人肝癌Huh-7细胞分为空白组、空质粒pcDNA3.1组(Vector组)和pcDNA3.1-SOX7重组质粒组(pcDNA3.1-SOX7组)。转染48h,AnnexinV-FITC/PI双染法细胞凋亡试剂盒、DCFH-DA法及Westernblotting分别检测细胞凋亡率、ROS含量及SOX7、β-catenin、cyclinD1和cleaved-caspase3蛋白表达。MTT法检测pcDNA3.1转染24h、48h和72h的细胞活力。结果:pcDNA3.1-SOX7重组质粒组SOX7蛋白表达明显高于空白组(P<0.05)。与空白组比较,pcDNA3.1-SOX7组细胞活力及β-catenin和cyclinD1蛋白表达均明显降低,细胞凋亡率、ROS含量及cleaved-caspase3蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:过表达SOX7可诱导肝癌细胞凋亡,凋亡机制与细胞内ROS水平提高及Wnt/β-catenin信号通路抑制有关。

真核表达人Wnt7b基因建立软骨细胞退变模型

目的在真核细胞中表达人Wnt7b基因并且观察对大鼠原代软骨细胞的退变作用。方法取出生24 h SD大鼠关节处软骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞,取P1代细胞进行实验。扩增人Wnt7b基因及克隆至PCDH-GFP上,转染PCDH-GFP和PCDH-Wnt7b至293ft细胞中,48 h后收集细胞上清及转染细胞,Western blot鉴定Wnt7b在293ft细胞中的表达。收集的上清分别稀释10倍和50倍培养大鼠软骨细胞,24 h后观察细胞形态并收集细胞蛋白和抽提RNA,Western blot和定量PCR检测软骨退变指标MMP13、MMP3、Ⅱ型胶原、A-can、ADAMTS5、ColⅩ和SOX9的表达。结果成功克隆人Wnt7b基因至PCDH-GFP载体上且在293ft细胞中得到有效表达。含Wnt7b培养基干预软骨细胞24 h后,软骨细胞形态由原来的多角形变成长梭形,Wnt7b处理组软骨细胞MMP13和MMP3表达显著上调,Ⅱ型胶原的表达下调。PCR结果表明A-can和Sox9表达下降,ColⅩ和ADAMTS5表达增强。结论有效在真核细胞中表达Wnt7b基因并且促进大鼠软骨细胞退变,建立软骨细胞退变的体外模型。

敲低Wnt7a抑制卡介苗诱导的小鼠肺泡上皮细胞自噬

目的探究无翅基因7a(Wnt7a)对牛结核分枝杆菌卡介苗(BCG)感染的肺泡上皮细胞自噬水平的调控作用。方法使用干扰Wnt7a慢病毒及BCG单独作用或共处理TC-1小鼠肺泡上皮细胞,设置小干涉RNA对照(si-NC)组、si-NC联合BCG组、Wnt7a小干涉RNA(si-Wnt7a)组和si-Wnt7a联合BCG组。Western blot法检测Wnt7a、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62及自噬相关基因5(ATG5)蛋白表达水平,利用免疫荧光细胞化学染色检测LC3的分布以确定细胞自噬情况。结果与si-NC组相比,BCG感染的TC-1细胞Wnt7a、LC3和ATG5蛋白表达均升高、LC3绿色荧光斑点亮度与分布显著增加;与BCG组感染的TC-1细胞相比,si-Wnt7a联合BCG组Wnt7a、LC3、P62及ATG5蛋白表达均显著降低,LC3绿色荧光斑点亮度与分布显著降低。结论敲低Wnt7a抑制BCG诱导的肺泡上皮细胞自噬。

Wnt1基因在乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达与多柔比星化疗抵抗关系的研究

目的探讨Wnt1在乳腺癌细胞中的表达及其在多柔比星化疗抵抗中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt1基因在乳腺癌细胞中的表达;双链siRNA转染阻断Wnt1基因,RT-PCR和免疫印迹法(Western blotting)检测基因沉默效果;细胞毒实验(MTT)法检测乳腺癌细胞的生长抑制率。结果对照组、siRNA干扰组、多柔比星处理组,Wnt1沉默MCF-7/ADR+ADM组的细胞存活率分别为(100±5.2)%,(84.3±4.1)%,(68.7±4.7)%和(42.3±3.5)%,其他3组的细胞存活率与对照组比较,差异有统计学意义(F=5.381,P<0.05)。Wnt1沉默MCF-7/ADR+ADM组与其他3组比较细胞的存活率均降低,与对照组、siRNA干扰组和多柔比星处理组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);Wnt1在乳腺癌细胞呈高表达,siRNA沉默Wnt1基因,可以显著下调Wnt1mRNA和蛋白的表达。结论 Wnt1基因在乳腺癌细胞呈高表达,沉默Wnt1基因下调Wnt1基因的转录和翻译,能显著增强乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性,部分逆转其对多柔比星的耐药性。

沉默lncRNA ST7-AS1通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭影响的实验研究

目的:探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)致癌性抑制基因7反义RNA1(ST7-AS1)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:肝癌细胞系HCCLM3分成Control组、Vector组、ST7-AS1组、sh-NC组、sh-ST7-AS1组和sh-ST7-AS1+Wnt/β-catenin通路激动剂(SKL2001)组。结果:与Control组比较,ST7-AS1组HCCLM3细胞的吸光度(A570)值及N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vemintin)、Wnt1和β-catenin的表达升高,克隆数量和迁移、侵袭数目增多,上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和GSK-3β的表达降低(P<0.05)。Wnt/β-catenin通路激动剂SKL2001可部分逆转沉默ST7-AS1对HCCLM3细胞增殖、迁移、侵袭的影响(P<0.05)。结论:沉默ST7-AS1可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

WNT7A基因rs139790545多态性与汉族非梗阻性无精症的关系研究

目的探讨汉族人群WNT7A基因SNP rs139790545多态性及其与非梗阻性无精症的关系。方法选择47例汉族非梗阻性无精症患者作为非梗阻性无精症组,同期选择25例健康志愿者作为对照组,采集静脉血,氯酚仿抽提法提取DNA,采用实时荧光定量PCR技术检测WNT7A基因SNP rs139790545位点的基因型和等位基因频率,分析SNP rs139790545位点的多态性及其与汉族非梗阻性无精症的关系。结果健康志愿者rs139790545位点基因型和等位基因的观察值和期望值吻合良好,符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。非梗阻性无精症患者AA基因型及A等位基因频率高于健康志愿者,rs139790545AA基因型可能增加汉族男性非梗阻性无精症的风险(OR=2.842,95%CI=1.776-3.988,P<0.05)。结论汉族男性WNT7A基因rs139790545多态性可能与非梗阻性无精症发病有关,携带AA基因型增加汉族男性患非梗阻性无精症的风险。

转录因子SOX7基因在贲门腺癌中的异常表达及其甲基化状态

目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织及相应癌旁非肿瘤组织中Y性别决定区基因7(sex determining region Y-box 7,SOX7)的甲基化状态及其对SOX7 mRNA表达、Wnt通路中心因子β-catenin异质表达的影响及与临床病理特征之间的相关性。方法:选择河北医科大学第四医院胸外科2006-2012年手术切除的GCA及癌旁组织各130例,应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、RT-PCR分别检测130例GCA及癌旁组织中SOX7基因的甲基化状态及其mRNA表达情况,应用免疫组织化学方法检测标本中β-catenin蛋白的表达。分析SOX7的甲基化状态与临床病理特征、SOX7 mRNA表达、β-catenin蛋白的异质表达及上消化道肿瘤家族史(upper gastrointestinal cancers,UGIC)的关系。结果:GCA组织中SOX7的甲基化率显著高于癌旁组织为[57.7%(75/130)vs 30.8%(40/130),P<0.01],其高甲基化仅与肿瘤患者的淋巴结转移情况有关(P<0.05),与肿瘤组织的病理分级及临床分期均无关(P>0.05)。GCA组织中SOX7mRNA的表达量明显低于癌旁非肿瘤组织[(0.414±0.054)vs(0.695±0.034),P<0.01〗],其β-catenin蛋白的异质表达率显著高于癌旁组织(85.4%vs 43.1%,P<0.01);GCA组织中SOX7基因mRNA表达情况及β-catenin蛋白的异质表达率均与该基因的甲基化状态有关(P<0.05),并且SOX7基因的甲基化状态与贲门癌患者的上消化道家族史密切相关(P<0.01)。结论:Cp G岛甲基化是SOX7基因表达下调的机制之一,并可能通过Wnt/β-catenin信号转导通路的激活在贲门腺癌的发生中扮演着重要的角色。

肿瘤抑制基因7L通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胰腺癌细胞生长的作用机制

目的 探讨肿瘤抑制基因(ST)7L对胰腺癌细胞增殖和凋亡能力的影响及其作用机制。方法 收集胰腺癌患者及健康体检者血浆标本各22例,同时收集胰腺癌组织和癌旁组织标本13对。将ST7L过表达质粒及空白质粒分别转染胰腺癌细胞作为ST7L组和对照组,将ST7L敲降质粒及空白质粒分别转染胰腺癌细胞作为si-ST7L组和si-NC组。采用实时荧光定量(qRT)-PCR检测临床样本中ST7L的表达水平;采用Western blot检测胰腺癌细胞系中ST7L的表达水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测相关蛋白表达水平并分组进行比较。结果 胰腺癌患者血浆ST7L表达水平明显低于健康对照者,胰腺癌组织中ST7L的表达水平显著低于对应癌旁组织;ST7L在胰腺癌细胞系PANC-1、AsPC-1、PaCa-2中的表达水平均明显低于胰腺导管正常细胞H6C7(P<0.05)。ST7L组及对照组细胞24 h、48 h、72 h及96 h的增殖能力均依次升高,ST7L组细胞24 h、48 h、72 h及96 h的增殖能力均明显低于同期对照组(P<0.05)。ST7L组PANC-1及PaCa-2细胞凋亡率均高于对照组;ST7L组PANC-1及PaCa-2细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达水平均高于对照组,而Bcl-2表达水平均低于对照组(P<0.05)。ST7L组细胞β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达均低于对照组;si-ST7L组细胞β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达均高于si-NC组(P<0.05)。结论 ST7L可能通过降低Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达来抑制胰腺癌细胞生长。

microRNA-214靶向调控HOXB7基因抑制结直肠癌细胞侵袭转移的机制与意义

目的探讨microRNA-214(miRNA-214)靶向调控HOXB7基因抑制结直肠癌(CRC)细胞侵袭转移的机制与意义。方法选取2018年1月至2020年12月汕头大学医学院附属粤北人民医院收治的200例CRC住院患者为研究对象,按照是否发生转移分为无转移组(100例)和转移组(100例),另选取同期健康体检者200例为对照组。采用分子生物学技术检测组织细胞miRNA-214、HOXB7、Wnt/β-catenin的表达,并进行相关性分析及评价其临床意义。结果无转移组和转移组患者组织中的miRNA-214表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-214在CRC SW1116和SW480细胞株中的表达量低于正常细胞株,差异有统计学意义(P<0.05)。用miRNA-214模拟物转染SW1116和SW480细胞发现,miRNA-214高表达会导致HOXB7呈低表达。HOXB7是miRNA-214的靶基因,两者之间的表达水平呈负相关(r=-0.394,P<0.05)。无转移组和转移组的HOXB7表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在SW1116和SW480细胞株中的HOXB7表达水平高于正常细胞株,差异有统计学意义(P<0.05);当HOXB7过表达后Wnt/β-catenin表达也增高,而在加入miRNA-214干扰HOXB7后,Wnt/β-catenin表达下降。结论miRNA-214高表达调控HOXB7基因下调可以影响Wnt/β-catenin表达下调,并且抑制CRC细胞生长和增殖,miRNA-214—HOXB7—Wnt/β-catenin通路参与抑制结直肠癌侵袭和转移,这为结直肠癌早期辅助诊断提供了新的检测手段,并可能作为未来潜在的CRC抗癌细胞侵袭和转移疗法的新靶点。

人类wnt9a基因的原位杂交研究

根据人类wnt9a基因的序列,设计检测引物,RT-PCR结果表明wnt9a在人类乳腺癌MCF-7细胞中表达.为进一步验证其正确性,为wnt9a的进一步研究打下基础,设计和合成原位杂交探针,原位杂交实验结果表明人类wnt9a基因在人类乳腺癌MCF-7细胞中表达.本研究为进一步研究wnt9a在乳腺癌发生和防治中的作用奠定了一定基础.

人Wnt10b基因真核表达载体的构建及表达鉴定

目的:利用基因工程技术构建人Wnt10b基因的pEGFP-N1-Wnt10b真核表达载体,观察其在COS-7细胞中的表达。方法:以pUC19-Wnt10b为模板,PCR扩增人Wnt10b基因的cDNA编码区序列,扩增产物和pEGFP-N1载体双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pEGFP-N1-Wnt10b,酶切和测序鉴定该载体;LipofectamineTM2000将该载体转染入COS-7中,Western blot和免疫细胞化学检测COS-7 Wnt10b蛋白表达。结果:PCR扩增出的人Wnt10b基因cDNA正确克隆到pEGFP-N1载体,成功构建了pEGFP-N1-Wnt10b;将其转染入COS-7,COS-7 Wnt10b蛋白表达明显增高。结论:成功构建了人pEGFP-N1-Wnt10b,这为进一步研究Wnt10b基因功能奠定了前期基础。

Wnt2/β-catenin信号通路及其在肿瘤中的作用

Wnt2基因是Wnt家族成员之一，定位于染色体7q31。Wnt2蛋白属于分泌型糖蛋白，蛋白大小约为40kD，含有360个氨基酸残基。Wnt2是wnt信号通路的启动分子，通过自分泌或旁分泌方式发挥作用，通常激活经典的Wnt／β-cate-nin信号通路。研究表明Wnt2与胚胎发育、肿瘤的发生发展关系密切。wnt2 mRNA在胎儿的肺脏、肾脏以及胎盘有表达，但在成人的胃肠道却没有表达。Wnt2是大鼠内胚层器官如前肠、肺发育的必要因素。Wnt2与许多肿瘤的发生、增殖、侵袭、转移等许多生物学行为相关，有可能作为肿瘤诊断与治疗的靶点。本文将重点介绍近年来wnt2信号通路研究进展，以及Wnt2通路与肿瘤的关系。

降钙素基因相关肽对氧化应激肺损伤保护作用的Wnt7b/β-catenin信号机制

目的探讨高氧暴露后早产鼠肺组织Wnt7b和β-连环蛋白(β-catenin)水平变化,高氧、降钙素基因相关肽(CGRP)干预后Wnt通路下游基因转录调控因子T细胞因子(TCF)、靶基因c-myc mRNA的表达,了解Wnt信号转导途径是否参与了氧化应激导致的肺泡Ⅱ型内皮细胞(AECⅡ)损伤死亡和肺发育障碍,以及其与CGRP肺保护作用的关系。方法 western blot检测95%高氧暴露早产鼠肺组织及高氧、CGRP干预后原代AECⅡWnt7b、β-catenin蛋白水平,RT-PCR测定TCF及c-myc mRNA表达。结果高氧暴露后3天肺组织Wnt7b及β-catenin蛋白表达即较空气对照组显著增强(P<0.05),7天时蛋白水平达到峰值,14天时表达有所下降,但仍明显高于空气对照组(P<0.05)。与空气对照组比较,高氧组AECⅡTCF及c-myc mRNA表达明显增强(P<0.01),高氧+CGRP组较单纯高氧组TCF、c-myc mRNA表达水平升高更为显著(P<0.01),空气+CGRP组TCF、c-myc mRNA表达与空气对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论高氧暴露后Wnt7b/β-catenin信号通路激活,启动下游增殖相关基因转录,可能是氧化应激性肺损伤时AECⅡ自我修复的机制之一。CGRP可促进Wnt7b/β-catenin活化,Wnt7b/β-catenin信号转导途径可能参与了CGRP的肺保护作用。

脑缺血再灌注后大鼠海马Wnt7b的表达

目的研究成年大鼠脑缺血再灌注后海马齿状回颗粒细胞下层(SGZ)Wnt7b的表达。方法将44只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组和脑缺血再灌注组,线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,缺血90 min,术后检测神经功能缺失和脑梗死,在脑缺血再灌注后1、3、7、14 d取大鼠海马组织。RT-PCR技术检测Wnt7b mRNA表达水平;免疫荧光技术检测海马Wnt7b蛋白及β-catenin蛋白表达水平。结果脑缺血后,大鼠出现严重的脑梗死和神经功能障碍,随再灌注时间延长,大鼠神经功能得到修复。再灌注7d后,健侧脑组织海马Wnt7b mRNA表达上调(P<0.05),缺血侧脑组织海马Wnt7b mRNA的表达明显上调(P<0.01)。Wnt7b主要分布于SGZ附近,阳性细胞增多(P<0.01),且该脑区的细胞内β-catenin阳性细胞数目增多(P<0.01)。结论缺血性脑损伤可刺激Wnt7b在成年海马SGZ的表达上调,Wnt7b可能通过经典Wnt通路参与调节脑缺血后成年海马SGZ的神经发生。

结直肠癌侵袭转移过程中HOXB7介导Wnt/β-Catenin信号通路作用及机制研究

目的研究同源异型盒基因B7(HOXB7)介导Wnt/β-Catenin信号通路在结直肠癌侵袭转移中的作用与机制。方法构建慢病毒转染重组体质粒HOXB7/psin,包装质粒PIK和阴性对照质粒psin,通过转染技术获得稳定过表达HOXB7的结直肠癌细胞株(SW480/HOXB7,293FT/HOXB7)及对照细胞株(SW480/vector,293FT/Vector)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测HOXB7 mRNA和蛋白的表达,采用免疫荧光染色技术评估HOXB7对结直肠癌细胞株β-Catenin的调控作用,采用qRT-PCR和Western blot法检测Wnt信号通路下游靶基因及蛋白的表达,采用小室试验评价各组细胞转移侵袭能力。结果 SW480/HOXB7,293FT/HOXB7细胞株的HOXB7 mRNA和蛋白表达水平较SW480/vector,293FT/Vector细胞株显著提高(P均<0.05)。HOXB7过表达后,细胞核中β-Catenin表达水平显著升高,并可见明显的入核现象,而在细胞浆中β-Catenin表达水平无明显变化。随着HOXB7的过表达,293FT、SW480细胞株中DKK1、cyclin D1、LEF1等Wnt信号通路下游基因及蛋白的表达均出现不同程度的上调现象。SW480/HOXB7细胞株穿过滤膜的细胞数显著高于SW480/vector细胞株(P<0.05)。结论 HOXB7介导Wnt/β-Catenin信号通路的激活能够通过调控下游基因,提高结直肠癌细胞侵袭能力,增加肿瘤转移的风险。

多发性特发性牙根吸收1例及文献回顾

目的探讨多发性特发性牙根吸收的病因、临床表现、诊断及治疗,为临床诊疗提供参考。方法回顾1例多发性特发性牙根吸收病例的诊治并总结相关文献。结果该患者无正畸矫正史、咬合创伤、外伤史等其它导致牙根吸收的病因;临床检查患者全口牙龈充血红肿,质地松软,全口牙槽骨不同程度吸;影像学检查示13、16、26、36、46存在特发性牙根吸收。诊断为:①多发性特发性牙根吸收;②牙周炎。组织病理结果显示:患牙周围软组织内存在大量破骨细胞;人全外显子组测序示:WNT7A及HSPG2基因突变相关性较高。行牙周序列治疗,拔除不能保留的患牙13并行位点保存术,19个月后复查,牙周炎症控制的牙位牙根吸收停止。文献报道特发性牙根吸收病因可能与基因突变有关,但尚未明确;目前尚缺乏有效的治疗方法。结论多发性特发性牙根吸收病因不明,可能与WNT7A及HSPG2基因突变有关,通过控制牙周炎症可减缓牙根吸收速度。

益肾活血丸改善子宫内膜容受性作用机制研究

目的:观察益肾活血丸改善子宫内膜容受性的情况以及该药治疗本病的作用机理。方法:试验组25例,选取10例做自身前后对照;对照组23例,选取8例做自身前后对照。2组自身对照患者分别于治疗前及治疗后排卵后7~10天刮取少量子宫内膜,余患者仅于治疗后排卵后7~8天刮取内膜,用半定量RT-PCR技术测定子宫内膜中HOXA10、HOXA11、Wnt7a的表达量,并对HOXA10、HOXA11与Wnt7a的关系进行相关性研究。结果:经过3个月经周期的治疗后,试验组、对照组中行自身前后对照患者子宫内膜中HOXA10 mRNA、HOXA11 mRNA、Wnt7a mRNA表达量均较治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。经过3个月经周期的治疗后,试验组子宫内膜中HOXA10 mRNA、HOXA11 mRNA表达量稍高于对照组,差异无统计学意义;试验组子宫内膜中Wnt7a表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HOXA10 mRNA与Wnt7a mRNA在子宫内膜容受性建立过程中呈高度正相关,相关系数r=0.842,P=0.000<0.01,提示二者存在明显的直线相关关系。HOXA11 mRNA与Wnt7a mRNA在子宫内膜容受性建立过程中呈高度正相关,相关系数r=0.864,P=0.000<0.01,提示二者存在明显的直线相关关系。结论:HOXA11可能与HOXA10一样参与了子宫内膜容受性的建立。中成药益肾活血丸可能通过经典Wnt/β-catenin信号通路改善肾虚血瘀型多囊卵巢综合征(PCOS)患者子宫内膜容受性。