毛细管SDS无胶筛分电泳测定小分子多肽相对分子质量

目的建立快速毛细管SDS无胶筛分电泳法（SDS—NGS），测定小分子多肽相对分子质量。方法涂层毛细管（管长30cm，内径100μm）；分离电压为9kV（300V／cm），分离温度为20℃；检测波长为214nm，检测时间为18min；所用SDS-多肽相对分子质量标准范围为2512—16949；以橙G（06）为内标参照物。结果在相对分子质量2512—16949范围内，多肽相对分子质量的对数与其相对迁移率具有良好的线性关系（r=0．996）；应用该方法测定了重组人奈西立肽、重组人表皮生长因子、虎纹镇痛肽、重组人心钠肽4种重组小分子多肽的相对分子质量，所测结果变异系数CV均小于3％。结论毛细管SDS无胶筛分电泳方便快速，灵敏度高，重现性好，结果准确，可作为小分子多肽相对分子质量的检测方法。

高分子材料在无胶筛分毛细管电泳中的应用

毛细管电泳在对核酸、多肽、蛋白质等生物大分子的分离分析上极具优越性,其中无胶筛分毛细管电泳应用尤为广泛。本文综述了近年来国内有关无胶筛分毛细管电泳中高分子材料的运用和进展。

无胶筛分毛细管电泳分离盐生盐杆菌DNA片段

由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管壁对DNA的吸附 ,从而改善了分离 ,并首次在同一条件下将所含的 13个片段完全分离。方法简便、快速 ,曾应用于两组盐生盐杆菌DNA片段的分离及其碱基对数目的推测。

无胶筛分毛细管电泳测定家蚕丝素蛋白分子量的可行性研究

运用无胶筛分毛细管电泳法测定了由不同脱胶方法制得的再生丝素蛋白的分子量,并与传统的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法所得结果进行了比较。结果表明:利用无胶筛分毛细管电泳这种新方法来测定丝素蛋白分子量是可行的。

毛细管电泳法测定胶原蛋白分子质量及其分布

采用不同的碱和酶在一定条件下从铬革屑中提取胶原蛋白，研究了使用毛细管电泳仪测定胶原蛋白的分子质量分布，并计算出胶原蛋白不同分子质量含量及其平均分子质量大小。研究表明：在毛细管电泳条件相同的情况下，不同的碱一酶法提取得到的胶原蛋白的分子质量分布不同；使用碱酶法可以控制分子质量在2000Da左右的胶原蛋白含量，达到61％-72％。

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。

用于毛细管电泳DNA分离的合成聚合物

毛细管电泳的无胶筛分方法在 DNA片段分离、DNA测序方面取得了显著的成绩并已成功应用于人类基因组计划。该法是在毛细管柱中充入一定浓度和组成的线性高分子溶液 ,利用其对样品组分电泳迁移时的阻滞作用 ,按分子量大小对 DNA等生物大分子进行筛分分离分析。因此 ,聚合物筛分介质的类型、组成和性质会显著影响分离效果。近年来 ,由于受到基因组计划的影响 ,出现了许多用于 DNA片段分离和DNA测序的水溶性高分子聚合物 ,并取得很大进展。本文按照均聚物和共聚物的分类 ,综述了作为筛分介质的各种合成聚合物及其应用效果 ,并简要介绍了有关的筛分理论和分离的评价指标。

蛋白酶水解铬革屑所得胶原蛋白产物分子量的研究

用经典凝胶柱层析和凝胶电泳相结合的方法 ,对蛋白酶水解铬革屑所得胶原蛋白产物进行了分子量测定 ,并用高效毛细管电泳法进行对比验证。研究表明 :在本文建立的水解条件下 ,水解产物中分子量为5 0 0 0 0 - 70 0 0 0 D之间的占 10 .7%,2 0 0 0 0 - 30 0 0 0 D之间的占 89.3%。

高效毛细管电泳用于以聚环氧乙烷为筛分介质分离DNA的机理研究

用毛细管电泳以聚环氧乙烷(PEO)为筛分介质对pUC19DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)Marker中的12条DNA片段进行了分离,并尝试用Ogston模型、爬行模型以及线性模型对分离机理进行研究,最终发现26～147bp的小片段,在低电场强度时能很好地符合Ogston模型理论,而190～501bp中等长度的DNA片段电泳迁移率与其尺寸间存在很好的负相关的线性关系,为此,提出一种新的线性模型来进行解释.此外,还探讨了PEO的浓度和电场强度对分离的影响.其结论可更好地从理论上指导对中小片段DNA的分离,对肿瘤基因突变点的分析和PCR扩增产物的分离分析具有重要的意义.