朱顶红无菌苗叶片高效再生体系

以朱顶红(Hippeastrum vittatum)叶片为外植体进行离体培养,具有取材方便、试材充足、成本低等优势,但叶片诱导再生率极低,是朱顶红离体培养的一大难题。本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体,探究了不同植物生长调节剂和不同取材部位对不定芽诱导和继代增殖的影响。结果表明:最佳外植体为MS培养基中培养10 d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16h·d-1(光照强度36μmol·m-2·s-1)下,不定芽诱导的最适培养基为MS+2 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 NAA+2 mg·L-1 TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘花孔雀’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d形成不定芽,诱导率可达69.44%;‘黑天鹅’在培养45d后形成愈伤组织,65d形成不定芽,诱导率达到66.67%;最适体细胞胚诱导培养基为MS+2 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 PIC,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的诱导率分别达到66.67%和63.89%;最佳不定芽增殖培养基为MS+2 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 NAA+1mg·L-1 TDZ,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的增殖系数分别达到4.67和3.46;在不添加植物生长调节剂的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100%;将生根培养30 d的小植株转移至室温条件下放置3 d,摘去封口膜再驯化3 d后,移栽至经高温消毒的草炭︰蛭石(体积比)为1︰1的基质中,成活率达到100%。

培养条件对酸枣叶片不定梢再生率的影响

以酸枣无菌苗叶片为外植体,选用基本培养基NN69和wPM.外源激素包括TDZ、IAA、IBA和NAA.暗培养时间为2、3、4周.采用正交实验设计方法,研究了基本培养基、外源激素及暗培养时间对叶片不定梢再生的影响.结果表明在附加TDZ 1～3 mg/L的WPM和NN69上都可诱导不定梢再生,但WPM比NN69更有效.暗培养时间对不定梢再生也有影响,暗培养3周比2、4周更有利于提高叶片的不定梢再生率.在附加TDZ 1 mg/L、IAA0.1 mg/L的WPM培养基上,暗培养3周后转到光下培养.获得的不定梢再生率达87.5%.

罗勒(Ocimum basilieum)原生质体的分离和纯化

以罗勒愈伤组织、悬浮培养细胞、无菌苗幼叶为材料,研究了罗勒原生质体的分离纯化方法及影响因素。结果表明:材料的起始状态对原生质体分离的产量、质量均有明显影响;以泥状愈伤组织为材料,其原生质体的产量(以鲜重测)可达1.25×107个/g,存活率大于94%。该原生质体可进一步用于罗勒的原生质体培养与细胞融合。

勋章菊组培快繁技术研究

以勋章菊无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度TDZ、2,4-D、IAA、IBA,研究不同浓度激素及组合对丛生芽诱导、试管苗生根的影响,并进行试管苗练苗和移栽。结果表明:最佳丛生芽诱导培养基为MS+TDZ 0.8mg/L+IBA(0.1～0.5)mg/L,诱导率达到90.0%以上。最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L+IBA 0.5mg/L,生根率达到100.0%。勋章菊的叶片是外植体的较好选择,在短期内能获得大量组培苗,移栽成活率也达到95%以上。