自制细胞冻存液对树突状细胞存活率及活性的影响

目的:用自制的改良细胞冻存液冻存树突状细胞(dendritic cells,DCs),观察冻存复苏后DCs的细胞存活率及体外诱导CIK(cytokine induced killer cell)对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:从外周血分离、培养获得DCs,分别用3种冻存液冻存:(1)含10%二甲基亚砜(DMSO)、20%牛血清的RPMI1640培养液;(2)日本ZENOAQ公司的Cellbanker细胞冻存液;(3)自制细胞冻存液(含DMSO、羟乙基淀粉及细胞稳定剂)。每组DCs分6管,于-80℃和-196℃各冻存3管,分别于冻存后第30、60和180d复苏,用锥虫蓝染色法测定细胞存活率,用MTT法检测冻存复苏后DCs活化的CIK对K562细胞的杀伤活性。结果:每组3种冻存液冻存的DCs随着冻存时间的延长,冻存复苏DCs的存活率和活性均有轻度下降,但经统计学分析3种冻存液的冻存效果无明显差别。结论:自制的改良细胞冻存液能够替代传统冻存液和进口冻存液用于DCs的冻存,有良好的推广前景。

不同冻存液对人羊膜间充质干细胞-80℃冻存与复苏效果的影响

目的:观察不同冻存液对人羊膜间充质干细胞冻存复苏后的存活率及再培养情况的影响,并探索简单有效的冻存与复苏方法。方法:将含有血清培养基短期体外培养的人羊膜间充质干细胞分为4组,分别加入不同冻存液(体积分数):A组10%二甲基亚砜+40%胎牛血清+50%DMEM/F12,B组10%二甲基亚砜+90%胎牛血清,C组5%二甲基亚砜+4.5%羟乙基淀粉+20%胎牛血清+70.5%DMEM/F12,D组10%胎牛血清+90%DMEM/F12。以相同方法冻存并复苏细胞,比较4组细胞回收率及再培养情况。结果:A、C2组细胞复苏后回收率高于另外2组(P均<0.05),且于复苏后再培养24h内出现较多贴壁细胞。结论:以5%二甲基亚砜+4.5%羟乙基淀粉+20%胎牛血清+70.5%DMEM/F12作冻存液冻存羊膜间充质干细胞效果好。

不同冻存液对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

目的观察不同冻存液对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUC-MSC)冻存复苏后生物学特性的影响,优化冻存方法。方法脐带取自2011年1月至2011年12月在中山大学附属第三医院产科剖宫产的足月健康产妇。从脐带分离得到的hUC-MSC培养传代,取第3代细胞。根据冻存液不同分为3组,A组冻存液为二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)∶胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)∶低糖杜氏培养基(low glucose Dulbecco's modified Eagle's medium,LG-DMEM)为1∶2∶7,B组为DMSO∶FBS∶LG-DMEM为1∶5∶4,C组为DMSO∶FBS为1∶9,不含LG-DMEM。经冻存12个月,复苏细胞,以第3代未冻存细胞悬液作为对照组,采用台盼蓝染色法比较hUC-MSC的细胞存活率,采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法比较细胞的生长情况绘制生长曲线,倒置显微镜下观察细胞的生长状况,采用流式细胞仪检测各组细胞的表面标记。结果A、B、C三组的细胞存活率分别为(20±4)%、(71±8)%和(85±7)%。与C组比较,A组和B组的细胞存活率降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。细胞生长曲线显示,与对照组相比,C组hUC-MSC在各时间点细胞生长迅速,但差异无统计学意义(P>0.05);B组hUC-MSC在24 h、48 h、72 h细胞生长差异无统计学意义(P>0.05),在96 h时间点生长速率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而A组hUC-MSC在各个时间点细胞生长减慢,差异有统计学意义(均为P<0.05)。形态学观察显示,A组细胞胞体宽大多角,并且较多分支,B组和C组细胞饱满,折光性好,呈长梭形、纺锤形或多角形。A组细胞复苏后细胞数目过少无法进行表面标记,B组和C组hUC-MSC表面标记物CD31、CD34、CD45、人类白细胞抗原(HLA)-DR表达阴性,CD105、CD90、CD44表达阳性。结论含高浓度血清的冻存液适合hUC-MSC的长期保存,含90%FBS的冻存液为hUC-MSC的最佳冻存保护液。

不同人羊膜间充质干细胞冻存液冻存细胞效果比较

目的:筛选冻存人羊膜间充质干细胞效果较好的冻存液。方法:①不同配方的细胞冻存液对细胞冻存效果的影响。人羊膜间充质干细胞培养至第三代后分为10组,分别加入以下10种不同组成的冻存液。A组:70%DMEM/F12+20%胎牛血清+10%DMSO;B组:60%DMEM/F12+30%胎牛血清+10%DMSO;C组:40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%DMSO;D组:90%胎牛血清+10%DMSO;E组:70%DMEM/F12+20%胎牛血清+10%甘油;F组:60%DMEM/F12+30%胎牛血清+10%甘油;G组:40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%甘油;H:90%胎牛血清+10%甘油;I组:90%DMEM/F12+10%DMSO;J组:90%DMEM/F12+10%甘油。调整细胞密度为5×106mL-1,放入程序降温盒中,入-80℃低温冰箱保存。1个月后复苏,MTT法筛选出吸光光度值较高的一种冻存液。②相同血清含量细胞冻存液对细胞冻存效果的影响。含体积分数为50%胎牛血清的细胞冻存液分3组保存细胞。K组:45%DMEM/F12+50%胎牛血清+5%DMSO;L组:40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%DMSO;M组:35%DMEM/F12+50%胎牛血清+15%DMSO;复苏冻存的细胞后,将细胞按冻存前的数量调整至5×105mL-1,台盼蓝染色后,计算细胞的成活率。在倒置相差显微镜下观察细胞的生长状况。结果及结论:配方为45%DMEM/F12+50%胎牛血清+5%DMSO的冻存液冻存复苏人羊膜间充质干细胞后细胞的成活率最高(P<0.05);冻存复苏后细胞的生长状况较好。

不同冻存液对奶牛乳腺上皮细胞冻存质量的影响

试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组:85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%DMSO;C组:75%DMEM+10%胎牛血清+15%DMSO;D组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%DMSO;E组:85%DMEM+5%胎牛血清+10%DMSO;F组:75%DMEM+15%胎牛血清+10%DMSO;G组:70%DMEM+20%胎牛血清+10%DMSO;H组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%甘油;I组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%甘油;J组:60%DMEM+10%胎牛血清+30%甘油,冻存前统一调整细胞密度到1×106个/mL冻存。分别对复苏后的细胞进行台盼蓝染色计算存活率和PI/Hoechst33258双染计算凋亡率。结果表明:BMECs经不同冻存剂冻存复苏后,细胞活力、形态学及凋亡率表现有所不同,其中B组和G组的活力和24h贴壁率较其他组高,二者的凋亡率较低,二者之间差异无显著性(P>0.05);传代后B组细胞的生长状况最好。

苦参碱对L-02人肝细胞系液氮下冻存复苏后功能的影响

目的:了解苦参碱(matrine)对L—02人肝细胞系超低温冻存复苏后功能的影响,探索一种合适肝细胞保存的方法.方法:常规培养的L-02人细胞系用胰酶消化后,将收集的L-02人细胞系分别以六种不同的冻存液(二甲基亚砜、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+0.2mg/L苦参碱、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+2mg/L苦参碱、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+6mg/L苦参碱、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+10mg/L苦参碱)在液氮中冷冻保存1mo.1mo后快速复苏L-02人肝细胞系,做存活率、形态学及功能检测.结果:含有不同浓度的苦参碱冻存液保存的L-02人肝细胞系其活率、形态学及功能表现均有所不同,其中单用二甲基亚砜(DMSO)的冻存液效果最差;二甲基亚砜+低分子右旋糖苷(Detrax-40)+6mg/L苦参碱冻存液效果最佳.二甲基亚砜+低分子右旋糖苷(Detrax-40)+6mg/L苦参碱冻存液组复苏后L-02人肝细胞系存活率为(89.6±3.4%),细胞形态与未冻存组相似,其尿素及白蛋白分泌量与其他冻存液组有显著差异(P<0.05).结论:二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+6mg/L苦参碱联合冻存液显著提高了L-02人肝细胞系的冻存质量.

不同配比冻存液对兔脂肪干细胞液氮冻存效果的研究

目的:探究不同浓度配比冻存液对脂肪干细胞(Adipose-derived Stem Cells,ADSCs)冻存复苏后存活率及增殖活性的影响。方法:无菌条件下取新西兰大白兔的脂肪组织,体外分离、培养ADSCs并传代至第3代,行免疫细胞化学染色对其表面标志物进行鉴定,同时对其行成软骨及成表皮细胞诱导以证实其多项分化能力。将第3代ADSCs置于液氮(-196℃)中冻存,根据冻存液中培养基(DMEM)、胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)及二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)的配比不同分为8组:1含不同浓度FBS配比分组:A组(70%DMEM+20%FBS+10%DMSO)、B组(60%DMEM+30%FBS+10%DMSO)、C组(50%DMEM+40%FBS+10%DMSO)、D组(含有40%DMEM+50%FBS+10%DMSO);2含不同浓度DMSO配比分组:E组(55%DMEM+40%FBS+5%DMSO)、F组(50%DMEM+40%FBS+10%DMSO)、G组(45%DMEM+40%FBS+15%DMSO)、H组(40%DMEM+40%FBS+20%DMSO)。细胞冻存三个月后,对其进行复苏并观察细胞形态学变化;通过细胞计数计算细胞存活率;采用MTT法绘制复苏后细胞生长曲线,以测定其生长增殖情况。结果:细胞复苏后,通过细胞计数计算结果显示C、D组存活率明显高于A、B组(P<0.05),E、F、G、H四组之间有统计学意义(P<0.01);MTT法结果显示C、D、F组的增殖曲线与未冻存组无明显差异(P>0.05)。结论:从兔脂肪组织中成功分离出了ADSCs,并且能在体外培养过程中稳定生长,快速增殖;ADSCs冻存液比例选择以DMEM:FBS:DMSO=5:4∶1的冻存效果最好。

细胞的简易冻存技术与冻存液的选择

在组织培养和细胞杂交工作中,培养细胞的保种十分重要。目前保存细胞的唯一途径是液氮冻存。我们试用简易冷冻技术和不同的冻存液,对数种细胞株/系进行了冻存、复苏试验,现报告如下。

促肝细胞生长素联合不同DMSO浓度冻存小鼠肝细胞的质量研究

目的使用自行配制组方含有促肝细胞生长素联合不同浓度DMSO的冻存液冻存小鼠肝细胞,以探索一种效果较好的冻存液从而改善冻存肝细胞质量。方法以体重20~30 g的昆明小鼠为肝细胞供体,用改良的胶原酶灌注法分离肝细胞,将分离好的肝细胞分别以10%、20%、30%浓度的DMSO联合促肝细胞生长素的冻存液（试验组1、2、3组）和标准冻存液（对照组）进行逐级降温缓慢冻存,置液氮中。2个月后快速复苏肝细胞,观察并测定肝细胞活率、功能和形态学。结果冻存小鼠肝细胞2个月复苏检测,试验1组、2组、3组的肝细胞活率台盼蓝（TB）染色结果为80.18±2.44%、86.20±2.33%、78.50±3.43%,而对照组肝细胞活率TB染色49.71±3.51%,试验组和对照组差异具有统计学意义（P〈0.05）,试验2组与其他试验组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）漏出率的值,试验1组、2组、3组分别为14.03±2.21 U/L、8.05±1.25 U/L、18.40±3.25 U/L;15.14±3.03 U/L、9.12±1.56 U/L、20.51±3.56 U/L;15.11±2.10 U/L、8.26±1.23 U/L、20.31±3.21 U/L,而对照组分别为24.28±1.96 U/L、25.44±2.06 U/L、26.22±3.23 U/L,两组差异具有统计学意义（P〈0.05）,试验2组与其他试验组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;合成血清白蛋白的值,试验1组、2组、3组为3.24±0.18 g/L、4.12±0.23 g/L、3.01±0.45 g/L,对照组为2.56±0.32 g/L,两组差异具有统计学意义（P〈0.05）,试验2组与其他组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论在本研究中,冻存小鼠肝细胞2个月,促肝细胞生长素联合20%DMSO冻存液较常规冻存液能有效减轻小鼠肝细胞的损伤,发挥良好保护作用。

谷胱甘肽与富氢冻存液在鸡血细胞冻存中的保护作用

目的通过观察细胞冷冻复苏后的存活率及凋亡情况,探讨细胞冻存液中添加谷胱甘肽(GSH)和氢气(H_2)对细胞的保护作用。方法在冻存液中添加GSH和/或通入H_2后冻存鸡血细胞,1个月后复苏,采用台盼蓝拒染和MTT法分别检测细胞存活率与细胞活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果 GSH、H_2或H_2+GSH处理使细胞活力明显提高,而早期凋亡率明显降低。结论谷胱甘肽与富氢冻存液对鸡血细胞冻存具有保护作用。

一种新贴壁细胞冻存液的研发与评价

目的评价一种新的贴壁细胞冻存液。方法使用含7.5%二甲基亚砜(DMSO)(V/V%)、17.5%丙二醇(V/V%)、2.5%聚乙二醇(V/V%)、10%胎牛血清(FBS)(V/V%)的达氏修正依氏培养液(DMEM)作为新型冻存液,对MDCK、LLC-MK2、HEp-2等3种贴壁细胞进行冻存实验。实验分常规冻存组、贴壁细胞冻存对照组和贴壁细胞冻存组,通过观察细胞形态并以HEp-2细胞为典型绘制细胞生长曲线;利用细胞病变法及免疫荧光法检测复苏的贴壁细胞对甲型流感病毒、副流感3型病毒、呼吸道合胞病毒的敏感性变化。结果3种贴壁细胞冻存组复温后细胞保持完整的单层贴壁状态,与常规冻存组细胞复苏培养3 d后的新鲜贴壁细胞形态一致;3种贴壁冻存对照组细胞复苏后其细胞大量死亡,数量急剧减少,细胞间隙增大,细胞呈破碎样。生长曲线结果显示HEp-2贴壁细胞冻存组一直保持5×10^(5)/mL水平。对上述病毒的敏感性检测中,贴壁细胞冻存组呈现出典型的细胞病变;感染甲型流感病毒的MDCK贴壁冻存细胞荧光呈胞浆颗粒型或细胞核均质型;感染呼吸道合胞病毒的HEp-2贴壁冻存细胞荧光呈胞浆颗粒型,合胞体中亦可见小块包涵物染荧光;感染副流感3型病毒的LLC-MK3贴壁冻存细胞荧光呈胞浆颗粒型强绿色荧光。结论新研发的贴壁细胞冻存液可用于多种贴壁细胞的原位冻存,能保持细胞活力和对病毒的敏感性,为大批量即用型细胞产品的开发应用奠定基础。

细胞短期冻存液的优化研究

目的:探索不同配方的冻存液对细胞短期冻存复苏后存活率及增殖活性的影响,进而对细胞短期冻存液配比进行优化。方法:将多种贴壁细胞及悬浮细胞分别用4种不同配比冻存液冻存[(A)10%二甲基亚砜(DMSO)+10%胎牛血清(FBS)+80%DMEM/1640培养基;(B)10%DMSO+20%FBS+70%DMEM/1640培养基;(C)10%DMSO+50%FBS+40%DMEM/1640培养基;(D)10%DMSO+90%FBS],程序性降温(平均降温速率-1℃/min)至-80℃,冻存4 d后以相同方法复苏细胞并观察细胞生长形态学变化,分别拍摄细胞在复苏后24、30、48、72、96 h时的生长状态,并根据台盼蓝染色进行细胞计数,绘制细胞生长曲线。结果:冻存液中的不同血清浓度配比对贴壁细胞短期冻存复苏后的生长形态及增殖无明显影响;而对于悬浮细胞,高血清配比的冻存液(C、D组)短暂冻存后复苏细胞的存活率明显高于低血清配比组(A、B组),并且其生长增殖能力也明显减弱。结论:对于贴壁细胞的短期冻存与复苏,冻存液中DMEM∶FBS∶DMSO比例为8∶1∶1;而对于悬浮细胞的短期冻存与培养,FBS∶DMSO为9∶1的冻存效果最好。

二甲基亚砜与甘油两种冻存保护液对细胞保护作用的比较

本文对二甲基亚砜与甘油两种冻存保护液保护细胞作用进行了比较观察。结果发现，对耐药的肿瘤细胞株进行冻存时，在冻存液中加入１０～１５％甘油（占冻存液百分比）为保护液其细胞存活率明显高于用二甲基亚砜为保护液（Ｐ＜０．００１）。同时证明加入保护液与未加保护液冻存的细胞其存活率具有高度显著性差异（Ｐ＜０．００１）。

兔骨髓基质干细胞的分离生长及冻存技术研究

目的:建立兔骨髓基质干细胞(MSC)体外分离、培养、增殖、冻存的方法,以及探讨其生物学特性。方法:抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化出MSC,并增殖。观察MSC的生长特性,测定其贴壁率及第3、8、13、18代的生长曲线,并评价其生物学特性。MSC在12.5%DMSO条件下经液氮或-60℃冻存复苏,测其成活率。结果:MSC为贴壁生长,以均一的梭形的成纤维细胞样生长,贴壁及增殖能力强,所测各代的生长曲线呈相似的S型,倍增时间约为35h。MSC需液氮保存,短期也可-60℃冰箱保存。结论:获得的兔MSC生长旺盛、增殖能力强,其分离、培养、纯化、增殖、冻存方法是可行的,可较长时间稳定地培养增殖、冻存,传代的MSC可保持其原代的生物学特性。MSC将是组织工程理想的种子细胞。

不同种类细胞培养和冻存方法的改进

目的 探讨不同细胞冻存与培养条件对保存肿瘤细胞株的影响。方法 快速冻存法、慢速冻存法,结果 (1)10％FCSRPMI1640培养基即可满足小鼠肝癌细胞株Hep—A—22细胞的培养基要求,而人肝癌细胞株QGY—7703细胞对RPMI1640培养基的要求较高,我们摸索需要15％—20％的FCS RPMI1640培养基方能满足其要求。(2)采用快速冻存法有利于肿瘤细胞株的复苏。结论 不同种类肿瘤细胞株由于其增殖能力不同所使用培养基所含成份应有所区别:快速冻存方法对肿瘤的细胞株保存优于传统的慢速冻存法。

低浓度二甲基亚砜保护SSMC7721细胞冻存后活力

目的研究二甲基亚砜作为冻存保护剂对SSMC7721细胞冻存复苏后细胞生长相对活力和凋亡的影响。方法选择传代培养处于对数生长期SSMC7721细胞,体积分数2%、5%、10%和20%DMSO分别冻存10d、30d后复苏,采用倒置显微镜形态学观察、MTT法测定细胞相对活力、流式细胞仪检测细胞凋亡,综合分析不同浓度DMSO冻存不同时间复苏对SSMC7721的影响。结果各浓度DMSO冻存SSMC7721对细胞生长和凋亡均有影响。20%DMSO对SSMC7721细胞影响明显,细胞培养不易贴壁逐渐脱落,浓度低于5%时,细胞生长状态良好;10%和20%DMSO细胞相对活力急剧下降;随着DMSO浓度增加和冻存时间延长,细胞凋亡率明显上升,存活率明显下降,5%DMSO冻存的凋亡率10.24%,20%DMSO冻存的凋亡率93.49%。结论 2%~5%DMSO冻存肝癌SSMC7721细胞,复苏后培养有较好的细胞相对活力,能有效减少细胞凋亡,起到的冻存保护剂作用。

超速玻璃化法冻存小鼠肝细胞球形聚集体的初步研究

现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于冻存胚胎、卵巢、胎肝组织和脑细胞[2-5].本研究将小鼠肝细胞预培养成球形聚集肝细胞,用改进的超速玻璃化法冻存,解冻后与含胶原培养液混合、培养,通过检测培养上清液中ALT、AST、乳酸脱氢酶（LDH）浓度判断肝细胞受损漏出情况,检测白蛋白（ Alb）浓度判断肝细胞合成功能.对照组用单层贴壁培养分散肝细胞做同样冻存和检测.

SD大鼠骨髓间充质干细胞在-80℃低温条件下的冻存

背景:以-80℃作为冻存温度条件,探索一种低消耗,简单易行的骨髓间充质干细胞贮存方法。目的:筛选适于骨髓间充质干细胞冻存的最适保护液,并验证骨髓间充质干细胞经较长期低温冻存后的生物学特性。方法:贴壁培养骨髓间充质干细胞,免疫荧光法鉴定骨髓间充质干细胞的生物学特性及纯度;以-80℃为温度条件,不同配比的低糖DMEM培养基、胎牛血清和二甲基亚砜作为冻存保护液,短期冻存骨髓间充质干细胞,选择适于骨髓间充质干细胞冻存的最适保护液;以选择出的保护液冻存骨髓间充质干细胞,分别于1,3,6个月复苏,并继续培养,传代;对传代细胞行免疫荧光鉴定,确定在-80℃下保护液对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响。结果与结论:采用80%DMEM+体积分数为10%胎牛血清+10%二甲基亚砜作为冻存保护液,适于在-80℃条件下冻存骨髓间充质干细胞,复苏后的细胞能够在体外增殖,并正常传代,冻存后的骨髓间充质干细胞仍可保持原有的生物学活性。

脐血造血细胞的分离冻存

目的 探讨不同条件对脐血造血细胞回收的影响。方法 运用６％羟乙基淀粉（ＨＥＳ）沉降法分离脐血，以程序降温法冻存脐血造血细胞。结果ＨＥＳ两次离心法分离脐血，造血细胞回收率高，活力好，费时短。脐血分离前在４°Ｃ或室温下可放置２４小时而不影响细胞活力。ＨＥＳ终浓度以１％～２％为宜。以０．９％生理盐水＋ＤＭＳＯ做保护剂对脐血造血细胞损伤小。复苏后脐血造血细胞可放置６０分钟，洗涤会造成约１０％的细胞损失，但能延长放置时间达１２０分钟以上。结论ＨＥＳ两次离心法分离脐血简便实用。

不同冻存方法对大鼠脂肪来源干细胞生物学特性的影响

目的:研究不同冻存方法对脂肪来源干细胞(Adipose-derivedstemcells,ADSCs)生物学特性的影响。方法:体外分离培养SD大鼠腹股沟及附睾周围的脂肪组织,取第三代ADSCs冻存于液氮。实验分为三组:对照组A组为非冻存细胞,B组使用无血清非程序冻存液冻存细胞,C组使用传统冻存液(DMEM∶FBS∶DMSO=5∶4∶1)冻存细胞。12个月后复苏ADSCs,通过对比ADSCs的表面抗原、细胞凋亡、增殖及成骨分化情况,分析各组ADSCs生物学性能的差异。结果:各组细胞高表达CD29、CD90;A、B两组细胞的凋亡率显著低于C组(P<0.05);B、C两组的增殖情况和A组相比,差异无统计学意义(P>0.05),B组细胞的成骨分化能力要优于C组(P<0.05)。结论:无血清非程序冻存液冻存ADSCs的效果要优于传统冻存液。