唐山市刺参(Apostichopus japonicus)养殖情况和主要病害防治

刺参(Apostichopus japonicus)是唐山市重要的水产养殖品种,2022年养殖面积已超过5100 hm2,年产量超过7700 t。本文基于唐山地区多年的刺参苗种繁育和成参养殖的实践经验,总结了几种唐山地区常见的高温、细菌性疾病、霉菌病、寄生虫病的预防和治疗措施。

仿刺参(Apostichopus japonicus)肠道源乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的分离鉴定及其益生特性分析

利用MRS固体培养基从南移仿刺参肠道中分离得到1株优势乳酸菌,命名为AJC-XP-15,其最适生长温度为30℃,最适生长pH为6.5;其表面疏水性和自聚率分别为34.56%和35.61%,经16S RNA基因序列分析,并结合形态学和生理生化特性将其鉴定为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)。拮抗实验结果显示,菌株AJC-XP-15及其发酵上清液对塔氏弧菌(Vibriotubiashii)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus,VP)和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)等病原菌具有很好的抑制作用;体外益生实验表明,菌株AJC-XP-15对人工胃肠液的耐受性很好,在pH3.0的模拟人工胃液处理3 h后的存活率为71.43%,在pH 6.8的模拟人工肠液处理3 h后的存活率为92.1%;抗氧化能力结果显示,菌株AJC-XP-15的无细胞提取物对DPPH自由基和羟自由基的清除能力最强,分别为(82.67±6.92)%和(15.36±2.95)%,其发酵上清液对超氧阴离子自由基的清除能力最强,为(26.36±2.58)%;药物敏感性分析结果显示,菌株AJC-XP-15对四环素、恩诺沙星、盐酸多西环素等抗生素敏感,对氟苯尼考、复方新诺明、庆大霉素等抗生素不敏感。研究结果可为仿刺参肠道源乳酸菌的分离鉴定和候选益生菌种筛选提供参考依据。

不同水平包膜丁酸钠对刺参(Apostichopus japonicus)生长性能、消化酶活性、非特异性免疫和抗病力的影响

评价了饲料中添加不同水平包膜丁酸钠(DZ、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 g/kg)对刺参(Apostichopus japonicus)的生长性能、消化酶活性、非特异性免疫和抗病力的影响,为期60 d。结果表明,2.0和3.0 g/kg组刺参末体重、增重率和特定生长率显著高于DZ组(P<0.05)。各处理组刺参成活率显著高于DZ组(P<0.05)。与DZ组相比,2.0和3.0 g/kg组刺参脏壁比和饲料转化率显著降低(P<0.05)。2.0、3.0 g/kg和5.0 g/kg组刺参肠道淀粉酶活性显著高于DZ和1.0 g/kg组(P<0.05)。2.0、3.0、4.0 g/kg组刺参肠道蛋白酶活性显著高于DZ组(P<0.05)。2.0、3.0、4.0、5.0 g/kg组刺参肠道脂肪酶活性显著高于DZ组(P<0.05)。与DZ组相比,2.0 g/kg和3.0 g/kg组刺参超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、溶菌酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性均显著提高(P<0.05)。然而4.0和5.0 g/kg组只诱导了部分非特异性免疫。灿烂弧菌攻毒实验表明,2.0、3.0 g/kg和4.0 g/kg组刺参的累积死亡率显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加2.0 g/kg和3.0 g/kg包膜丁酸钠可提高刺参的生长性能、消化酶活性、非特异性免疫和抗病力。在考虑经济成本的情况下,刺参日粮中添加2.0 g/kg包膜丁酸钠为最佳剂量。

有害藻华治理过程中改性粘土对仿刺参(Apostichopus japonicas Selenka)稚参的影响

本文以仿刺参(Apostichopus japonicas Selenka)稚参为实验对象,研究了改性黏土治理有害藻华技术对仿刺参稚参的影响。96h急性毒性试验结果表明,改性黏土对仿刺参稚参的半致死浓度(LC50)为6.01g/L;安全浓度为0.601g/L,高于在现场时的使用浓度0.1g/L;慢性毒性试验显示改性黏土对仿刺参稚参成活率和体重增长率无明显影响;不同浓度的改性黏土添加组中,发现仿刺参稚参的体壁组分(水分、灰分、总糖、总脂和粗蛋白)含量变化不大,改性黏土的加入对减少仿刺参稚参的种内竞争有一定积极作用。另外,针对仿刺参稚参食用包括改性黏土在内的底层颗粒物的现象,考察了不同实验组仿刺参稚参体壁中铝的含量,分析结果显示各实验组与对照组没有显著差异。在此基础上,考察了改性黏土有效去除有害藻华的体系中仿刺参稚参的生长情况,发现与对照组相比,改性黏土有效地去除了有害藻华,还明显降低了仿刺参稚参的死亡率。因此,改性黏土是一种有效治理仿刺参养殖水体有害藻华、对养殖生物无负面影响的藻华治理技术。

海洋酵母培育仿刺参Apostichopus japonicus浮游幼体研究

采用海洋酵母（Rhodotorula sp.）作为单细胞藻类的替代饵料培育仿刺参（Apostichopus japonicus）浮游幼体。从生长速度（G）、浮游期成活率（SRP）、变态成活率（SRM）、特定生长率（SGR）和40%樽形幼体出现时间（T）等5个指标比较了海洋酵母组（Z9）与不同种类和比例单胞藻混合饵料组（8个组合,Z1~Z8）的投喂效果;并确定了不同发育阶段海洋酵母的最佳投喂组合。结果表明：海洋酵母能够促进刺参幼体的正常发育和变态。ANOVA分析表明,不同饵料组间的生长和变态率等指标差异显著,Z2和Z9两组间差异不显著,但显著优于其他单胞藻混合组。投喂不同数量的海洋酵母对浮游幼体也有显著影响。

土池网箱培育仿刺参Apostichopus japonicus(Selenka)幼参的试验

2006年8月～11月,在面积33亩的土池塘中,放置10个用60目筛绢围成的6m×6m网箱,每个网箱中放置115、145、175或200个网吊,每个网吊由6个50cm×50cm的聚乙烯网片串成。每个网箱放入体重5.0mg(20万头/kg)或12.5mg(8万头/kg)的稚仿刺参(Apostichopus japonicus)0.3～0.5kg。经85d的饲养,培育出幼刺参19.39kg,平均每个网箱1.9kg,规格为540～702mg,成活率4.1%～9.6%。文中讨论了土池网箱培育幼刺参的技术关键,强调应在水温8℃～15℃下尽早放养、适时投喂、加大水交换量。

基于FT-IR、GC及核磁共振的仿刺参(Apostichopus japonicus)消化道多糖结构解析研究

仿刺参(Apostichopus japonicus)因其高营养价值并富含多种生物活性成分,具有重要的经济价值。为了充分利用仿刺参加工下脚料,提高养殖经济效益,本文采用复合蛋白酶解法提取仿刺参消化道多糖,研究了酶解温度、时间、pH及加酶量对仿刺参消化道多糖得率的影响,并通过正交实验对仿刺参消化道多糖提取工艺进行优化,利用DEAE-sepharose Fast Flow层析柱对多糖进行纯化,通过傅里叶红外光谱(FT-IR)、气相色谱(GC)及核磁共振(13C,1H谱)对多糖的结构及组成进行分析。结果表明,复合蛋白酶在pH 7,加酶量1.2×10^4 U/g,温度60℃酶解6h;利用Sevage法脱蛋白提取得到的仿刺参消化道多糖纯度均一,效果最佳。通过FT-IR结果判断其为糖类化合物,含有β型葡萄毗喃糖苷键;利用气相色谱确定该多糖主要由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖六种单糖组成,其摩尔比为1:32.86:14.56:1.66:0.78:10.43,其中岩藻糖的含量最高;核磁共振综合分析结果进一步证实仿刺参消化道多糖含有β型毗喃已糖,且主要是以1,4-糖苷键相连接。

丙烯酸对仿刺参(Apostichopusjaponicus)幼参免疫酶活性的影响

为研究丙烯酸对仿刺参(Apostichopus japonicus)的免疫酶活性的影响,采用半静水式毒性测试方法,分别用3种不同浓度(0.84、4.20、21.00mg/L)丙烯酸处理24、48、72、96h后,检测仿刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果发现:与对照组相比,各浓度丙烯酸处理24h后,ACP、CAT酶活性无显著差异,SOD酶活性显著上升;中、低浓度处理组AKP酶活性显著上升。48h后,随着丙烯酸处理浓度升高,ACP、AKP、SOD酶活性上升,具有剂量-效应正相关性;与对照组相比,中、低浓度处理组CAT活性显著降低,高浓度处理组CAT活性显著上升。72h后,随着丙烯酸处理浓度升高,SOD酶活性下降,具有剂量-效应负相关性。96h后,ACP、AKP酶活性与对照组无显著差异,高浓度组SOD酶活性极显著降低。上述结果表明:0.84~21.00mg/L的丙烯酸处理0~96h对仿刺参体腔液ACP、AKP、SOD和CAT等免疫指标有一定程度的影响。

池塘海蜇、日本对虾、缢蛏立体生态养殖及与刺参轮养试验

为了充分挖掘池塘的生产力,创造更高的经济效益,荣成市海洋经济发展中心,针对传统养殖模式效益低下的特点,于2022年,在荣成芳宁水产养殖公司科技示范基地,开展春夏季池塘海蜇、日本对虾、缢蛏混养,秋冬季轮养刺参,获得较高的效益。现将试验过程总结如下。

变温对仿刺参(Apostichopus japonicus)免疫力及抗病力的影响

水温一直以来被认为是影响仿刺参(Apostichopus japonicus)各项免疫指标的重要环境因素。为了探讨其对于仿刺参免疫力及抗病力的影响,首先对仿刺参进行了两组温度突变试验,分别为A组(11℃→4℃→11℃→4℃→11℃→4℃)和B组(18℃→11℃→4℃),取体壁、触手、体腔液、内脏四个不同组织,测定抗菌活力、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)四个免疫指标。随后取B组温度突变的条件,进行攻毒感染试验,计算发病率和死亡率。结果表明:(1)在A组温度突变试验中,各项免疫酶指标一般在前两轮的温度突变中,差异不显著(P<0.05),而到了第三轮的温度突变时,体壁和触手中免疫相关酶活性显著上升(P<0.05)。(2)在B组温度突变试验中,刺参机体的免疫及其相关酶在最适生长温度18℃下的活性较高,温度突降至11℃其活性下降,再降至4℃后有所回升,但仍低于18℃下的免疫活性;触手和体壁中免疫酶活性变化显著(P<0.05),而体腔液和内脏中免疫酶的活性变化不显著(P<0.05)。(3)攻毒试验结果显示,温度突变各组刺参发病(吐肠及化皮率)及死亡率明显高于正常组。由此表明,温度突变作为一种环境胁迫,对于仿刺参的免疫力和抗病力产生重要的影响。体壁和触手作为刺参免疫屏障的第一道防线,对于环境变化最为敏感。

刺参池塘生态调控养殖技术研究

开展了刺参池塘生态调控养殖试验。在刺参养殖池中移植川蔓藻和藻钩虾,混养日本对虾和梭鱼,与单养刺参池塘的水质指标和生物指标进行了对比。结果表明,在参池中引入植物和饵料生物,可有效降低池塘底层水温,提高池塘水体的溶解氧含量,推迟刺参夏眠时间,增加刺参生长时间,其单产有明显提高。引入的日本对虾、梭鱼,有效利用了参池闲置空间,增加了参池的附加产值。指出,刺参池塘生态调控养殖水产品的产量和价值以及水质指标,均优于单养刺参池塘。提出,刺参养殖,应构建多层次的健康生态系统,充分利用参池空间。

北极刺参和日本刺参对大鼠血脂水平调节和血管内皮保护作用的研究

目的比较研究北极刺参和日本刺参对实验性高脂血症大鼠血脂水平调节和血管内皮细胞的保护作用。方法采用高脂饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,同时分别灌胃不同剂量(50、100和200mg／kg)的北极刺参与日本刺参匀浆,30d后测定大鼠血清TC,TG．LDI-C,HDL-C和NO含量,以及血清和肝脏MDA含量、SOD和GSH-Px活性。结果北极刺参和日本刺参均能明显降低模型大鼠血清TC,LDL,C含量和动脉粥样硬化指数(P<0.01),提高HDL-C和NO(P<0.01)含量;显著降低血清和肝脏中MDA含量(P<0.05,P <0.01),提高血清SOD和GSH—Px(P<0.01)活性。其中,日本刺参降低大鼠LDL-C水平和动脉粥样硬化指教的作用显著优于北极刺参(P<0.05)。结论2种刺参均能显著调节机体的血脂水平,提高抗氧化能力和保护血管内皮细胞功能,有效预防高脂血症和动脉粥样硬化的形成。

日本刺参的抗肿瘤及免疫调节作用研究

采用日本刺参(Apostichopus japonicus)匀浆灌胃移植性肿瘤模型小鼠,探讨了日本刺参的抗肿瘤作用及其对免疫功能的调节作用。结果表明,日本刺参各剂量组均能显著抑制小鼠S180肉瘤的生长,提高小鼠脾指数及胸腺指数(P<0.05);显著提高荷瘤小鼠血清溶血素含量(P<0.01)和抗体形成细胞数(P<0.05);提高迟发型变态反应水平和脾淋巴细胞转化能力(P<0.05,P<0.01);促进NK细胞活性和巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05,P<0.01)。提示日本刺参能全面调节机体的特异性和非特异性免疫功能,控制和杀灭肿瘤细胞。

日本刺参胶原蛋白多肽对紫外线诱导的光老化模型小鼠皮肤的保护作用

目的:研究日本刺参胶原蛋白多肽(AJCP)对紫外线诱导的光老化模型小鼠皮肤的保护作用。方法:采用AJCP灌胃紫外线诱导的光老化模型小鼠,检测小鼠血清及皮肤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)含量;通过HE、VanGieson染色观察皮肤组织学变化。结果:AJCP显著提高了光老化模型小鼠血清和皮肤中SOD、GSH-Px、CAT活性,降低了MDA含量(P<0.05,P<0.01),同时显著提高了皮肤组织中总Hyp含量(P<0.01);皮肤组织的形态学观察结果表明,AJCP能有效改善小鼠皮肤胶原纤维的受损程度。结论:AJCP能显著提高机体的抗氧化能力,对紫外线诱导的光老化模型小鼠皮肤具有保护作用。

日本刺参胶原肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的:研究不同分子量日本刺参胶原肽A1(6000U<Mr<10000U)、A2(Mr<6000U)对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成、酪氨酸酶活性及酪氨酸酶基因表达的影响。方法:采用MTT法测定细胞增殖活性,NaOH裂解法测定黑素生成量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶mRNA表达。结果:不同分子量日本刺参胶原肽均能显著促进B16细胞增殖,抑制B16细胞黑素合成和酪氨酸酶活性,下调酪氨酸酶mRNA表达,且剂量效应关系明显。结论:不同分子量日本刺参胶原肽均具有显著抑制B16黑素瘤细胞黑色合成的作用。其中,A1的抑制效果较A2显著。

日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的保护作用

目的研究日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原多肽对血管内皮细胞的保护作用。方法采用ox-LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)损伤模型。MTT法测定血管内皮细胞的增殖活性;硝酸还原酶法测定血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)活力和NO释放量;TBA法测定细胞内MDA含量;DNA-Ladder法检测血管内皮细胞的凋亡。结果不同浓度的酸性粘多糖、胶原蛋白多肽和低浓度的皂苷能明显抑制ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,促进血管内皮细胞增殖(P<0.05,P<0.01);降低细胞内MDA含量(P<0.05,P<0.01);拮抗ox-LDL引起的血管内皮细胞凋亡。酸性粘多糖和胶原蛋白多肽还能明显促进血管内皮细胞NO释放量(P<0.05,P<0.01),提高细胞NOS活力(P<0.05,P<0.01)。结论日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤均具有明显的保护作用。

日本刺参降血糖及对胰岛素信号通路的影响

以腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,用日本刺参(Apostichopus japonicas)灌胃糖尿病大鼠35 d,观察其对大鼠空腹血糖、葡萄糖耐量和血清胰岛素的影响,并对其作用机制进行探讨.采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测糖尿病大鼠骨骼肌和脂肪组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)和葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter,GLUT4)等基因mRNA表达水平,Western blot方法检测GLUT4蛋白表达水平.结果显示,日本刺参能显著降低糖尿病大鼠空腹血糖含量,提高口服葡萄糖耐量和血清胰岛素含量;提高骨骼肌和脂肪组织中PI3K、PKB和Glut4 mRNA表达量,促进脂肪组织中GLUT4蛋白表达.日本刺参对糖尿病大鼠脂肪组织PKB mRNA表达和骨骼肌GLUT4蛋白表达无显著性影响.提示日本刺参具有较好的降血糖作用,其作用机制与部分上调胰岛素介导的PI3K/PKB/Glut4信号转导通路有关.

刺参与日本对虾池塘高效混养技术

刺参夏眠期间正是日本对虾生长的大好季节,将刺参和日本对虾混养,在7月份放养虾苗,严格控制养殖池内的杂鱼虾等,就可大大提高日本对虾和刺参的成活率,利用此二者在饵料和空间的互补性,可显著提高虾池的利用率和经济效益。

仿刺参与日本囊对虾、斑节对虾混养技术探索

近年来,仿刺参在我国北方沿海的人工池塘养殖面积及产量逐年增加,成为北方沿海重要的养殖品种。在仿刺参养殖过程中,很多养殖户在池塘中混养对虾,取得了较好的经济效益,由原来的混养单一品种的日本囊对虾或中国明对虾,增加了混养斑节对虾。

日本红刺参人工育苗生产技术的研究

日本红刺参在分类上隶属于海参纲、刺参科、仿刺参属,体形呈圆筒状、背面隆起,上有4～6行大小不等、排列不规则的圆锥形疣足,腹面平坦,管足密集,排列成不很规则的纵带,体色红色或红褐色,背面斑杂红褐色或暗红褐色，腹面为红色。