中华鳖日本品系与太湖品系生产性能对比试验

为了更好地跟踪养殖种群遗传多样性衰减和种质退化,强化观察测试中华鳖日本品系的养殖生产性能的可持续性和优良性,笔者进行了中华鳖日本品系与太湖品系生产性能的对比试验,为今后养殖企业引养和科研机构育种提供参考依据。一、试验地点与条件1.恒温温室苗种培育条件苗种培育温室为封闭式棚池结构。

氟甲喹在中华鳖日本品系组织中的残留代谢规律研究

建立了中华鳖日本品系组织中氟甲喹的高效液相色谱-串联质谱检测方法,研究了氟甲喹药饵多次给药后在中华鳖日本品系体内的残留代谢规律.在(25.0±1.5)℃下,采用纯度不小于98%的氟甲喹和规格为(250±50)g的中华鳖日本品系180尾,混饲投喂12mg/kg体重药饵,给药7d.在停药后的第1,2,4,8,16,28,48,72,96,120,144,168,240,360h分别取其血液、肌肉、肝脏和肾脏样品进行残留代谢规律的研究.结果表明氟甲喹在中华鳖日本品系的血液、肝脏、肌肉和肾脏组织中均有残留,最高峰值均出现在停药后2h,质量分数分别为2715.0,2 000.0,1 095.3,281.0μg/kg;其t1/2α分别为1.015,0.629,0.719h,0.212h,t1/2β分别为49.636,52.234,42.817,46.657h,动力学方程分别为:C血液=2 674.136×e-0.683t+1 410.516×e-0.014 0t,C肝胰腺=2429.647×e-1.103t+1 280.742×e-0.013 3t,C肌肉=946.592×e-0.964t+770.039×e-0.016 2t,C肾脏=0.487×e-3.275t+224.740×e-0.014 9t.说明氟甲喹在中华鳖日本品系体内吸收迅速,在各组织中残留量及消除速度差别较大,建议休药期为10d以上.

稻田与池塘养殖中华鳖日本品系的体组成及营养品质比较

对稻田和池塘养殖的2组中华鳖日本品系的形体指数以及肌肉和裙边的水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸组成和质构特性进行了对比分析。结果显示:(1)稻田鳖与池塘鳖的肝体指数、裙体比和体脂率差异不显著(P>0.05)。(2)稻田鳖与池塘鳖的肌肉、裙边水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分和氨基酸组成无显著差异(P>0.05),进一步分析显示,池塘鳖肌肉氨基酸总量、必需氨基酸和呈味氨基酸含量高于稻田鳖,稻田鳖裙边氨基酸总量、必需氨基酸和呈味氨基酸含量高于池塘鳖,两者均具有较高的营养价值。(3)池塘鳖肌肉的硬度、粘性和胶黏性显著高于稻田鳖(P<0.05),裙边的硬度、胶黏性和咀嚼性显著高于稻田鳖(P<0.05),稻田鳖肌肉和裙边的口感优于池塘鳖。

利用甜菜夜蛾日本品系增殖核多角体病毒

比较了甜菜夜蛾3种品系增殖甜菜夜蛾核多角体病毒(SeNPV)的效果。结果表明,利用甜菜夜蛾日本品系幼虫增殖SeNPV产量最高,其平均单头病毒含量分别比广州品系和荷兰品系高19 6%和53 3%;病毒总含量分别高20 4%和116 7%。在此基础上,进一步研究了虫龄、感染浓度和饲养密度对用甜菜夜蛾日本品系幼虫增殖SeNPV的影响,确定了利用甜菜夜蛾日本品系增殖SeNPV时,以上3因子的最佳条件为:在27±1℃下用1×108PIB/ml的SeNPV感染5龄初幼虫,并按30头/dm2的密度饲养。

头孢拉定、诺氟沙星及罗红霉素在中华鳖(Pelodiscus sinensis)日本品系体内残留代谢的比较研究

应用液相色谱-串联质谱技术比较研究了头孢拉定、诺氟沙星及罗红霉素3种渔药在中华鳖(Pelodiscus sinensis)日本品系体内的残留代谢规律。在(25.0±2)°C饲养条件下,通过连续7d对健康中华鳖日本品系投喂分别含有30mg/kg头孢拉定,300mg/kg诺氟沙星或30mg/kg罗红霉素的药饵后,比较分析了3种渔药在中华鳖日本品系体内各组织中的浓度变化。结果表明:头孢拉定和诺氟沙星的代谢符合一室消除模型,罗红霉素的代谢符合二室消除模型。头孢拉定在中华鳖日本品系血液、肌肉和肝脏中消除半衰期T1/2(Ke)分别为6.132h、9.002h和10.132h。诺氟沙星在中华鳖日本品系血液、肌肉和肝脏中消除半衰期T1/2(Ke)分别为22.526h、39.715h和41.585h。罗红霉素在中华鳖日本品系血液、肌肉和肝脏中消除半衰期T1/2(β)分别为38.54h、15.65h和100.5h。建议选用肝脏作为今后中华鳖质量安全残留监控靶组织。

中华鳖日本品系主要经济性状对裙边重量的影响

采用多元线性回归和通径分析方法,研究中华鳖日本品系主要经济性状对裙边重量的影响。结果表明,8个经济性状间的相关系数均达到显著水平;通过对各经济性状对裙边重量的通径分析和决定效应分析,发现背甲长对裙边重量的直接作用和直接决定效应均最大,其系数分别为0.505和0.255,是影响裙边重量最主要的性状,其次为腹甲宽。经多元回归分析,采用逐步回归方法,剔除偏回归系数不显著的性状,建立了背甲长(X_1)、腹甲宽(X_5)和体重(X_1)对裙边重量(Y_2)的最优回归方程:Y_2=15.4+1.741X_5+0.018Y_1+1.219X_1(R^2=0.881)。基于对裙边重量决定效应的大小,背甲长和腹甲宽可作为中华鳖日本品系良种选育的目标性状和裙边加工时获得优质裙边的重要参考。

围网养殖中华鳖(日本品系)技术研究

利用茅潭江大水面资源,用抗风浪金属围网开展中华鳖(日本品系)的仿生态养殖试验,建设围网面积2.3 hm2,平均放养中华鳖鳖种4500只/hm2,平均放养规格400 g/只,3个多月后,平均起捕规格达到850 g/只,只均增重450 g,鳖的外观、体色、口味接近野生鳖,实现销售收入111.3万元,利润60.33万元,投入产出比1∶2.18。

蝇蛆蛋白粉替代鱼粉对中华鳖日本品系生长、肌肉品质、免疫及抗氧化指标的影响

试验对比研究了无菌蝇蛆蛋白粉替代中华鳖日本品系(Pelodiscus sinensis Japanese strain)(初始均重3.5 g左右)常规饲料中50%的鱼粉后,对其生长、肌肉和裙边质构参数、血清免疫和抗氧化指标的影响。结果表明,经过9个月的温室养殖,50%蝇蛆蛋白粉替代组饲喂的幼鳖特定生长率相比于常规饲料组显著下降(P<0.05),而存活率有所提高(P>0.05);肌肉质构参数方面,蝇蛆蛋白粉替代组硬度降低(P<0.05),但粘性提高(P<0.05),裙边的内聚性参数显著下降(P<0.05)。蝇蛆蛋白粉饲料投喂能显著增强试验鳖血清中酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性(P<0.05),但对抗氧化指标和溶菌酶活性没有显著影响(P>0.05)。试验认为,蝇蛆蛋白粉可以替代中华鳖日本品系中部分饲料,但替代的适宜比例需进一步研究确定。

中华鳖日本品系对6种饲料蛋白原料表观消化率的研究

研究了中华鳖日本品系（Pelodiscus sinensis，Japanese strain）幼鳖对蝇蛆蛋白粉、虾壳粉、发酵豆粕、豌豆浓缩蛋白、大豆浓缩蛋白以及玉米蛋白粉的干物质、粗蛋白质、氨基酸、粗脂肪和总能的表观消化率。试验饲料由70%基础饲料和30%待测饲料原料组成，并以0.5%的三氧化二铬（Cr2O3）为外源指示剂。选取平均体重为（14.69 ± 0.55）g中华鳖日本品系幼鳖180只，随机分成6组，每组3个重复，每个重复10只，随机投喂试验饲料养殖4周，采用虹吸法收集粪便进行表观消化率测定。结果表明，6组饲料的干物质、粗蛋白质、粗脂肪以及总能表观消化率范围为77.8%-85.6%、73.2%-83.7%、81.2%-91.1%和78.8%-85.6%，其中蝇蛆蛋白粉和发酵豆粕的干物质表观消化率较高，大豆浓缩蛋白的粗蛋白、粗脂肪及总能表观消化率较高；各原料总氨基酸表观消化率在75.8%-86.1%，最高值和最低值分别出现在大豆浓缩蛋白和虾壳粉。

蝇蛆蛋白粉在中华鳖日本品系饲料中应用效果初探

本试验利用无菌蝇蛆蛋白粉作为中华鳖日本品系(Pelodiscus sinensis Japanese strain)饲料蛋白源,替代常规饲料中50%的鱼粉,通过9个月温室养殖试验,对比研究两种饲料对中华鳖日本品系生长性能、体组成及肉品质质量安全的影响。结果表明,饲料中50%鱼粉被蝇蛆蛋白粉替代后,存活率有所提高(P>0.05),但生长速度显著下降(P<0.05)。饲料中添加蝇蛆蛋白粉不会对试验鳖肌肉营养组成造成影响,试验鳖食品质量安全也符合水产品质量安全标准。由此可见,蝇蛆蛋白粉在中华鳖日本品系饲料中具有一定的应用潜力,但其最适添加量需进一步研究确定。

中华鳖日本品系养殖现状与发展思路

中华鳖日本品系是浙江省选育的第1个国家级水产新品种,2007年经国家水产原良种审定委员会审定,已在全国推广。中华鳖日本品系具有外型优美、生长速度快、繁殖能力强、抗病力强等优点,并且营养丰富,为推动浙江省中华鳖产业的转型升级提供了优质苗种,具有很好的发展前景。

三种酶制剂对温室养殖日本品系中华鳖生长性能的影响

在基础饲料中分别添加0.02%中性蛋白酶、0.1%非淀粉多糖酶和0.3%包衣复合酶,以基础饲料为对照组饲料,饲喂体重为(223.75±22)g的日本品系中华鳖(Pelodiscus sinensis)28 d,探讨三种酶制剂对温室养殖的中华鳖生长性能的影响。结果表明,添加0.02%中性蛋白酶饲料组的中华鳖增重率、饲料系数明显优于其他组,与对照组相比,其饲料系数降低0.14,增重率增加5.34个百分点;0.1%非淀粉多糖酶饲料组的饲料系数比对照组降低0.1,中华鳖增重率与对照组相当;0.03%包衣复合酶饲料组的饲料系数与对照组相当,中华鳖的增重率比对照组低1.74个百分点;在每只中华鳖日摄食量方面,0.02%中性蛋白酶饲料组和0.1%非淀粉多糖酶饲料组的效果较好,0.03%包衣复合酶饲料组次之,但都与对照组无显著性相关(P>0.05)。综合分析认为,在配合饲料中添加0.02%中性蛋白酶能有效提高中华鳖的生产性能,降低饲料系数。

血粉替代鱼粉对中华鳖日本品系生长性能和肉质的影响

本试验利用无菌血粉作为蛋白源部分替代鱼粉，按照添加0％、10％、20％gJ比例替代鱼粉投喂中华鳖日本品系，研究结果表明表明：饲料中使用10％血粉替代鱼粉未对中华鳖日本品系的生长性能、肉质造成影响（P〉0．05）。

中华鳖日本品系体内氟苯尼考药物代谢动力学研究

应用液相色谱-串联质谱技术研究了氟苯尼考在中华鳖日本品系(Pelodiscus sinensis Japanesestrain)体内的残留代谢规律。在(25.0±2.0)℃水温下,150只体重为(250±50)g健康中华鳖日本品系连续7 d投喂含30 mg/kg氟苯尼考的饲料,分别于最后一次给药后1 h、2 h、4 h、8 h、16 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、168 h、240 h、360 h采集肝、血液、肌肉和肾样品。样品中氟苯尼考的残留量采用乙酸乙酯提取,正己烷净化,电喷雾负离子多反应监测模式下进行测定,内标法定量,并利用3P97药动学软件进行数据分析。结果表明,氟苯尼考在中华鳖日本品系血液、肌肉、肝和肾中达峰浓度分别为167μg/kg、188μg/kg、67.15μg/kg和85.71μg/kg,达峰时间分别为4 h、8 h、8 h和8 h,消除半衰期分别为14.9 h、9.4 h、29.5 h和13.0 h,药动学方程分别为:C血液=210.332e-0.070 6 t+938.161e-0.046 5 t,C肌肉=5 642.635e-0.077 1 t+5 765.891e-0.074 4 t,C肝=111.596e-0.036 0 t+4.339e-0.023 5 t和C肾=176.509e-0.065 4 t+615.697e-0.053 6 t。说明氟苯尼考在中华鳖日本品系体内残留代谢较快,建议休药期为15 d。

温室与外塘养殖下中华鳖日本品系肌肉中挥发性成分的测定

通过顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(SPME-GC-MS)对温室和外塘养殖的中华鳖日本品系腿部肌肉挥发性成分进行了比较。经NIST质谱数据库检索和文献对照,2种模式养殖的中华鳖日本品系肌肉中分别确定33和32种挥发性成分。不同养殖模式对中华鳖日本品系肌肉挥发性物质的组成及含量有一定影响,温室养殖的肌肉主要挥发性成分有壬醛、二硫化碳、2-氮杂环丙烷乙基胺、2-丁氧基乙醇、棕榈醛和苯甲醛等;外塘养殖的肌肉主要挥发性成分则为壬醛、二硫化碳、2-氮杂环丙烷乙基胺、四甲基十五烷、柠檬烯和庚醛等。

YLY在中华鳖日本品系温室养殖的应用效果

YLY是采用新型技术、依据中华鳖日本品系温室养殖环境,由长双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、硝化菌等菌种联合组成,是针对中华鳖日本品系温室养殖所研发的新型制剂。本试验为探讨YLY试剂在中华鳖黑暗型温室养殖中的应用效益,在112天内,通过一组对照组以及四组试验组的试验,可知YLY试剂在净化水体、增加溶解氧、抑制有害菌生长、提高饵料系数、生长速度具有优良的表现,可取代常用消毒剂使用;并获得了YLY试剂在中华鳖黑暗型温室养殖中的最佳浓度为4ppm。

中华鳖2个培育品系的16S rRNA基因多态性比较分析

以中华鳖(Pelodiscus sinensis)日本品系、清溪乌鳖两个国家水产新品种为研究对象,并以中华鳖黄河群体和台湾群体为对照,克隆测序获得了其16S rRNA基因全长序列1 606 bp,并对群体遗传多样性进行比较分析。结果表明,在4群体共80个个体中,共检测到53个变异位点,包括9个群体特异性位点,其中清溪乌鳖3个,中华鳖日本品系和黄河种群各1个,台湾群体4个;共发现16种单倍型,其中清溪乌鳖8个、中华鳖日本品系2个、中华鳖黄河群体和台湾群体各3个,群体间无共享单倍型。中华鳖不同群体的16S rRNA基因多样性从高到低依次为清溪乌鳖(0.821)、中华鳖台湾群体(0.484)、中华鳖黄河群体(0.195)、中华鳖日本品系(0.100)。中华鳖日本品系和黄河群体、清溪乌鳖和台湾群体的遗传距离相对较近,分别为0.001和0.005。不同群体的单倍型各自聚为一支,表明中华鳖群体分化较为明显,不同群体的特异性位点可作为种质鉴别的依据。单倍型进化树显示,中华鳖日本品系和黄河群体以很高的置信度聚为一支,推测中华鳖日本品系起源于中国黄河流域。

2种不同品系中华鳖的营养成分分析与比较

以清溪花鳖和中华鳖日本品系为研究对象,对鳖雌雄肌肉和裙边水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分、矿物质元素含量及氨基酸、脂肪酸组成进行分析。结果表明:1)清溪花鳖和中华鳖日本品系雌雄肌肉的粗蛋白含量分别为18.46%、17.25%、19.17%、18.83%,裙边为21.00%、22.31%、24.89%、20.07%,2种鳖雌雄肌肉的粗脂肪含量分别为1.07%、0.96%、1.17%、1.05%,裙边为0.23%、0.32%、0.30%、0.27%;2)清溪花鳖和中华鳖日本品系雌雄肌肉的必需氨基酸指数分别为93.92、92.52、91.89、93.12,说明2种中华鳖的肌肉营养丰富,均为良好蛋白源,肌肉中必需氨基酸/氨基酸总量分别为37.10%、36.67%、36.48%、36.76%,裙边中必需氨基酸/氨基酸总量分别为17.74%、19.73%、17.80%、17.81%;3)清溪花鳖和中华鳖日本品系雌雄肌肉中多不饱和脂肪酸含量丰富,二十碳五烯酸+二十二碳六烯酸的含量分别为14.98%、13.97%、16.20%、19.22%,中华鳖日本品系雌雄肌肉中二十碳五烯酸+二十二碳六烯酸的含量要高出清溪花鳖约3%。

基于微卫星标记的中华鳖淮河品系遗传多样性分析

为了解中华鳖淮河品系的遗传多样性和遗传结构。本研究利用25个微卫星DNA标记分别对淮河品系中华鳖(淮河鳖)、黄河品系中华鳖(黄河鳖)和日本品系中华鳖(日本鳖)3个品系的遗传结构和系统进化进行分析。淮河鳖、黄河鳖和日本鳖的平均等位基因数(NA)分别为5.08、5.44和6.20,平均有效等位基因数(NE)分别为2.696、2.733和3.221,淮河鳖期望杂合度(HE)为0.572高于黄河鳖(0.556),低于日本鳖(0.603),日本鳖遗传多样性最高,淮河鳖次之,黄河鳖最为贫乏。25个微卫星位点多态性均较高,淮河鳖、黄河鳖、日本鳖平均PIC为0.513、0.498和0.558,淮河鳖和日本鳖均属高度多态(PIC>0.5),黄河鳖为中度多态(0.25<PIC<0.5)。遗传分化指数(FST)分析显示,淮河鳖与黄河鳖之间属于中度分化(0.05<FST<0.15),淮河鳖与日本鳖、黄河鳖与日本鳖之间均属于高度分化(0.15<FST<0.25)。淮河鳖与黄河鳖遗传距离较近,与日本鳖遗传距离较远。表明目前中华鳖淮河品系有较高遗传多样性水平,遗传潜力较好。

饲料蛋白水平对中华鳖稚鳖生长和消化酶活性的影响

配制蛋白水平分别为34%,37%,40%,43%和46%的五组等能饲料,饲养中华鳖日本品系稚鳖(3.70±0.05 g)8周,探讨饲料不同蛋白水平对稚鳖生长、饲料利用率以及消化酶活性的影响。试验结果表明,试验鳖的增重率、饲料利用效率随着饲料蛋白含量的增加而提高,在43%蛋白饲料组达到最佳值(P<0.05);当饲料蛋白含量增加到46%,试验鳖生长表现不再显著提高(P>0.05)。随着饲料蛋白水平的提高,试验鳖胃、肝脏和肠道的蛋白酶活性均呈现上升趋势,其中胃和肝脏蛋白酶活性均在43%蛋白饲料组达到最大值,肠道蛋白酶活性在46%蛋白饲料组最高。各组织中淀粉酶活性以及肝脏脂肪酶活性随饲料蛋白水平的提高显著下降(P<0.05),胃和肠道脂肪酶活性下降趋势不显著(P>0.05)。