果园草被残体浸提液对日本草种子发芽与幼苗生长的化感效应

采用生物检测方法,研究果园草被植株残体浸提液处理后的日本草种子萌发和幼苗生长的变化。结果表明:(1)10%浓度浸提液处理果园土壤时,会影响果园杂草的萌发及优势种日本草根冠比;(2)用不同浓度果园草被的植株残体浸提液砂培日本草种子时,都会降低发芽势和发芽率,且竹节草处理的效果最明显,达到差异显著(p<0.05)或极显著水平(p<0.01);(3)百喜草处理促进日本草幼苗生长,宽叶雀稗处理效果相反;竹节草处理5.0%和10.0%时抑制日本草根生长,而其它处理促进了日本草根生长;(4)不同处理的日本草生物量都不同程度地小于对照,且竹节草处理的效果最明显,达到差异显著或极显著水平;(5)各处理对受体日本草的化感综合效应指数都小于对照,起抑制作用,竹节草处理抑制效果最明显。

几种杀虫剂对日本草履蚧的药效

为给日本草履蚧的综合治理提供依据,采用直接喷雾法,测试了几种杀虫剂对日本草履蚧成虫的防效。结果表明:在室内防治成虫供试药剂中,药后1 d,1%甲维盐乳油500倍液的防治效果最高,为100%;40%杀扑磷乳油500倍液防效为82.98%;10%一遍净粉剂3 000倍液防效较低,仅为7.09%。除10%一遍净粉剂3 000倍液外,其他药剂在药后5 d7、d的防效均有不同程度提高。在田间试验中,药后7 d,1%甲维盐乳油的防效可达55%以上,其中500倍液的防效最好,为81.17%。

日本草在南方红壤山边沟果园套种适应性研究

通过对南方红壤山边沟果园套种日本草适应性的研究,发现新开山边沟果园4月套种日本草扦插苗当年的6月分萌数可达6条,8月可达16条,第二年的7月能达11.4条;当年6月干草量可达5 308 kg/hm2,8月达8 523 kg/hm2,比套种百喜草分别低2.61%、13.78%,种植第二年7月达17 333 kg/hm2,比百喜草增加8.33%;当年6月草层厚度可达25 cm,比百喜草低19.35%,当年8月达49 cm,种植第二年7月达46 cm,分别比百喜草高6.52%、2.2%;当年6月覆盖率可达55%,比百喜草低15.38%,当年8月达100%,比百喜草高2.04%,种植第二年7月与百喜草一样达100%;套种日本草当年土壤流失率比裸地减少79.41%,同时能有效改善果园的生态环境.

果园套种经济绿肥日本草好处多

日本草为茜草科,咖啡属,适宜热带、亚热带地区生长发育,属一年生草本植物。一年可收割2—3次,每次每亩可获鲜草400公斤左右,可作猪、鱼的青饲枓,堆沤压青作有机肥料。 日本草极耐贫瘠、干旱、酸性土壤,在新开垦的丘陵果园可作为地表覆盖的先锋作物。

日本结缕草ZjTCP20基因生物信息学及表达模式分析

TCP是高等植物所特有的一类转录因子,参与调控植物的生长发育、衰老及逆境应答等多个生物学过程。本研究从日本结缕草(Zoysia japonica)中克隆出ZjTCP20基因,并对该基因进行生物信息学分析、自激活检测、表达模式分析等来探究该基因特性。ZjTCP20基因完整编码区为624 bp,编码208个氨基酸。ZjTCP20蛋白无信号肽,具有疏水性,系统发育进化树结果显示其与玉米(Zea mays)ZmTCP20亲缘关系最近。亚细胞定位显示该蛋白定位于叶绿体、细胞质和细胞核上。ZjTCP20基因表达模式结果显示,该基因在幼嫩叶片中大量表达,随植物发育表达量逐渐减少,但茉莉酸甲酯(MeJA)等3个激素对基因的表达量没有显著影响。酵母自激活试验显示ZjTCP20具备自激活活性。本研究为进一步研究ZjTCP20基因提供了科学依据。

日本结缕草(Zoysia japonica)酵母杂交cDNA文库的构建及分析

酵母双杂交和单杂交技术是生物大分子互作和调控研究中的高效分子生物学技术,是蛋白质互作或蛋白质与DNA互作筛选的手段。本研究旨在构建高容量的日本结缕草(Zoysia japonica)酵母文库,以便后续深入挖掘日本结缕草相关基因,进行基因功能及基因网络研究。本研究应用不同组织来源以及不同生长时期的日本结缕草,通过SMART技术构建了高容量的酵母杂交cDNA文库。质量检测结果显示:次级文库库容为4.0×10^(6)cfu·mL^(-1),总克隆数为1.6×10^(7),重组率>95%。最终获得的Y187酵母文库工作液细胞密度为3×10^(7)cells·mL^(-1),插入片段具有良好的多态性。以日本结缕草类胡萝卜素裂解双加氧酶ZjCCD7作为诱饵,从构建的酵母文库中筛选到一个与ZjCCD7互作的蛋白ZjatpG,证明该文库质量较高,符合酵母杂交筛选试验标准,可适用于调控和互作蛋白筛选。本研究为筛选日本结缕草的互作蛋白以及基因功能研究提供了基础。

中国温带海域新发现较大面积(大于50ha)的海草床:Ⅰ黄河河口区罕见大面积日本鳗草海草床

日本鳗草(Zostera japonica)原是中国沿海潮间带较为常见的海草种类,近些年来随着生境的破坏其分布面积急遽下降,较大面积连续分布的海草床已经非常少见。2015年5月和8月,在山东黄河河口区发现了超过1000 ha几乎连续分布的日本鳗草海草床,与互花米草生境相邻,形成独特的生态景观。对日本鳗草生物量和种群补充等基本生物学指标也进行了调查。该发现极大丰富了中国海草数据库,并为日本鳗草的深入研究及保护提供了得天独厚的实验基地。

^(60)Co-γ射线对日本结缕草干种子的辐射效应研究

用不同剂量(200~500 Gy)的60Co-γ射线辐射日本结缕草Zoysia japonica干种子,通过对辐射后干种子的发芽和幼苗生长情况进行了室内外观测,结果表明:低剂量辐射处理促进日本结缕草干种子的萌发,提高其发芽率,随着辐射剂量的增加,发芽率逐渐降低,临界辐射剂量(剂量率为1.0 Gy/min)为450 Gy;田间出苗率临界辐射为250 Gy,低于临界辐射剂量时,随辐射剂量的增大,田间出苗率增加,高于临界辐射剂量时,随辐射剂量增大,田间出苗率降低;不同的剂量处理,干种子发芽后根系和幼苗的生长差异显著(P<0.05),在主根长度、幼苗高度和幼苗鲜质量方面表现为先促进后抑制,临界辐射剂量分别为400、300和250Gy;根据辐射剂量与相对出苗率的关系折线图可以初步确定,日本结缕草干种子辐射育种的半致死剂量为480 Gy。

以基因枪法转化日本结缕草获得转基因植株

将含有DREB1A和gus基因的双基因载体质粒包裹在金粉上,以基因枪轰击日本结缕草胚性愈伤组织,以gus基因的瞬时表达研究日本结缕草基因枪转化参数.结果表明,在1 100 psi压力下6 cm的轰击距离、每皿轰击2次的转化效果最好,而金粉和质粒用量对转化效率影响不显著;经过筛选和再生培养,检测到gus基因的稳定表达,并获得日本结缕草潮霉素抗性株系,PCR-Southern杂交证实外源DREB1A基因已整合到日本结缕草基因组中.

日本结缕草ZjADH基因的克隆及表达分析

采用RACE技术从日本结缕草中克隆出1个乙醇脱氢酶基因,命名为ZjADH(GenBank登录号为KT596065)。ZjADH与甘蔗、美洲蒺藜草和沟叶结缕草等ADH基因同源性均在90%以上,进化分析表明其与沟叶结缕草亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示,ZjADH定位于细胞质。实时荧光定量分析结果表明,ZjADH在日本结缕草根中表达量最高,ZjADH可响应ABA、MeJA和SA的诱导,在低温、干旱和高盐胁迫中发挥重要作用。

日本结缕草植株再生体系的研究

以日本结缕草的成熟胚为外植体,对其组织培养体系进行了优化.试验结果表明,1)培养基中添加脯氨酸能提高愈伤组织诱导率,而添加BA能降低愈伤组织的诱导率,低浓度的NAA(0.1～0.2 mg/L)能促进愈伤组织的形成,愈伤组织诱导的最佳培养基为ND+2,4-D 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+L-Pro 500 mg/L,愈伤组织诱导率达57.3%;2)愈伤组织继代的最佳培养基为MSD+2,4-D 1.0 mg/L;3)愈伤组织分化的最佳培养基为MSD+NAA 0.3 mg/L+KT 0.5 mg/L+BA 0.05 mg/L,分化率达36.7%.

日本结缕草成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的影响因子分析

【目的】优化日本结缕草的组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系。【方法】以日本结缕草的成熟种子为外植体,分析激素、基本培养基、培养条件、脯氨酸、Cu2+等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。【结果】(1)培养基中添加脯氨酸能提高愈伤组织诱导率,而BA降低愈伤组织的诱导率,低浓度的NAA(0.1～0.2mg·L-1)能促进愈伤组织的形成,愈伤组织诱导的最佳培养基为ND+2,4-D3.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+L-Pro500mg·L-1,愈伤组织诱导率达57.3%;(2)愈伤组织继代的最佳培养基为MSD+2,4-D1.0mg·L-1;(3)愈伤组织分化的最佳培养基为MSD+NAA0.3mg·L-1+KT0.5mg·L-1+BA0.05mg·L-1+L-Pro500mg·L-1,分化率达36.7%。【结论】优化了日本结缕草的组织培养体系,初步找到了影响其成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的主要因子。

日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化

介绍了分别以日本结缕草根部、叶部、匍匐茎等为材料的总RNA提取的改良步骤,质量和浓度检测及其注意事项,并采用Promega公司的Poly ATract Systems Ⅲ(Z5300)试剂盒进行mRNA分离,尽管这一方法成熟可行,但仍存在洗脱体积较大,常需先沉淀浓缩后才能进行后续试验(如cDNA合成),在制备少量mRNA时回收率较低等问题。据此,对mRNA分离方法作了改良,介绍了mRNA分离的优化步骤,通过增加体系形成了一种更适合于日本结缕草mRNA分离的方法,从而为日本结缕草的分子生物学研究提供基础资料。结果证明所提取的总RNA和mRNA完整,质量较高,并应用到日本结缕草cD-NA文库的构建。

日本结缕草抗寒相关性状的QTL分析

为寻找与结缕草（Zoysia japonica steud.）抗寒性状相关的数量性状位点（QTLs）,利用生态条件具明显差异的2个日本结缕草品系室兰（Zoysia japonsic cv. Muroran）和俵山北（Zoysia japonsic cv. Tawarayama Kita）及其假测交产生的F1代86个个体为材料,研究其在人工低温胁迫条件下叶片的半致死温度（LT50）及可溶性糖、可溶性蛋白含量及过氧化物歧化酶（SOD）活性的变化,并以447个SSR标记构建的日本结缕草遗传连锁图谱为基础,对抗寒相关的性状可溶性糖、可溶性蛋白含量及SOD活性进行了QTL定位分析。结果表明：F1群体的可溶性蛋白含量与叶片LT50呈显著负相关（P〈0.05）,可溶性糖含量及SOD活性与叶片LT50呈极显著负相关（P〈0.01）。分别定位到与叶片可溶性糖、可溶性蛋白含量和SOD活性相关的QTL各1个,分布于3个连锁群上,QTL的LOD值介于2.19~2.42之间,单个QTL可解释性状表型变异的范围在13.3%~13.8%。

日本结缕草愈伤组织的诱导和植株再生

以日本结缕草Zoysia japonica Steud的成熟种子为外植体进行了胚性愈伤的诱导与植株再生,结果表明:种子经去皮预处理后,含2.0 mg/L 2,4-D的MS基本培养基能成功诱导去皮种子产生愈伤组织,愈伤组织诱导率高达87.1%。愈伤组织在继代过程中共产生4种不同的类型。1/2 MS中添加0.4 mg/L KT或添加1.0 mg/L KT和1.0 mg/L NAA均能有效促进胚性愈伤的分化,分化率分别为63.8%、66.0%。

日本结缕草转基因技术研究进展

对日本结缕草离体植株再生及遗传转化研究进展进行了详细的综述,并简要讨论了应用转基因技术培育日本结缕草新品种的育种方向。

日本结缕草离体培养及高频率植株的再生

以日本结缕草(Zoysia japonica)叶片作为外植体进行离体再生研究。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+1.5mg.L-12,4-D+0.5mg.L-16-BA+26g.L-1蔗糖+5.0g.L-1琼脂,诱导率为65.36%,无性世代增殖倍数高达9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化的最佳培养基为MS+3.0mg.L-1BAP+0.5mg.L-1NAA+1.5mg.L-1AgNO3+35g.L-1蔗糖+6.5g.L-1琼脂,分化率为67.30%,增殖系数为8.67;生根培养基选用1/4MS+0.2mg.L-1IBA+0.3mg.L-1NAA+28g.L-1蔗糖+4.5g.L-1琼脂,生根率为89.60%。

日本岩垂草在岩溶山地的生态效益研究

本文首次在岩溶山地生态重建中引进优质草种——日本岩垂草(Lippia nodiflora(L.)Greene),通过对其盖度、根系特征、径流量和抗侵蚀能力的研究,探讨其在岩溶山地的生态效益,寻求修复岩溶地区脆弱生态系统的途径,并为日本岩垂草在岩溶山地种植推广提供依据。试验表明,日本岩垂草对降低地表径流量收效明显,在种植了3个月后,地表径流量已经由110mm下降到42mm,下降了62%;抗侵蚀能力强,在同样的雨强和降雨量情况下,其侵蚀量只是传统耕地的5.60%～5.83%;根系生长速度快,密度大,数量多,种植90d时盖度已达100%。实验证明,日本岩垂草具有优秀的生态修复和生态美化能力,能够有效地改善岩溶地区脆弱的生态状况。