重组人干扰素α-2b脂质体凝胶的皮肤刺激性及抗病毒作用研究

目的考察干扰素α-2b脂质体凝胶外用对皮肤的刺激性及抗病毒作用。方法用健康家兔进行皮肤刺激性试验,用皮肤感染单纯疱疹病毒的豚鼠进行抗病毒试验。结果干扰素α-2b脂质体凝胶对完整皮肤和破损皮肤均无刺激性,对疱疹病毒的皮肤感染具有缩短病程、促进结痂及痊愈的效果。结论干扰素α-2b脂质体凝胶是一种安全有效的外用抗疱疹病毒药物。

巨细胞病毒孕妇血游离β-HCG、凝血4项变化及联合预测不良妊娠结局价值

目的:分析游离β-人绒毛促性腺激素(β-HCG)联合凝血4项对巨细胞病毒(HCMV)孕妇妊娠结局的预测价值。方法:选取2018年10月-2021年4月本我院就诊的HCMV感染孕妇58例纳入感染组,产前检查健康孕妇58例纳入对照组,比较感染组与对照组、感染组中不良妊娠结局与良好妊娠结局孕妇的一般临床资料、血βHCG、凝血功能指标差异,分析β-HCG、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)预测HMCV感染孕妇发生不良妊娠结局价值。结果:感染组血HCG、APTT、PT、TT水平低于对照组,FIB水平高于对照组,感染组发生不良妊娠结局孕妇血Free-β-HCG、APTT、PT、TT水平均低于良好妊娠结局孕妇,FIB水平高于良好妊娠结局孕妇(均P<0.05)。上述各指标对HCMV感染孕妇不良妊娠结局均有一定预测价值,而联合检测预测的曲线下面积最高(0.903),敏感度85.7%、特异度79.6%。结论:HCMV感染孕妇血游离β-HCG表达降低,血液处于高凝状态,且发生不良妊娠孕妇异常变化更大,各指标联合预测不良妊娠结局的价值较高,对早期干预有一定指导意义。

重组人干扰素α-1 b治疗小儿呼吸道病毒感染的疗效及其对凝血功能的影响

目的探讨重组人干扰素α-1 b雾化治疗小儿呼吸道病毒感染的疗效及其对凝血功能的影响。方法以100例呼吸道病毒感染患儿为对象,分为对照组与观察组。比较两组治疗疗效。结果观察组总有效率为90.00%(45/50),高于对照组74.00%(37/50)(P<0.05)。观察组患者发热、咳嗽、喘憋、啰音消失时间均较对照组快(P<0.05)。观察组活化部分凝血酶原时间(a PTT)、凝血酶原时间(PT)水平均高于对照组,肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平低于对照组(P<0.05)。观察组患者治疗期间不良反应发生率与对照组比较:6.00%(3/50)vs 12.00(6/50)(P<0.05)。结论重组人干扰素α-1 b用于小儿呼吸道病毒感染的效果较好,可快速缓解患儿症状,改善患儿凝血状态。

基于白细胞介素-6R、蛋白酶活化受体4和嘌呤能受体探讨炎症-凝血正反馈回路在新型冠状病毒诱发急性肺损伤中的作用机制

新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)是一场波及全球范围的突发性公共卫生事件。新型冠状病毒(SARS-CoV-2可能通过S蛋白-血管紧张素转化酶2(Angiotensin-converting Enzyme 2,ACE2)途径感染细胞,引起气管上皮细胞损伤及肺泡损伤,进一步引起炎症因子风暴,并最终导致急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)。已有研究表明,白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)被认为是新冠肺炎患者肺损伤细胞因子风暴发病的关键因子,炎症亦可引起内皮细胞损伤,导致凝血障碍,并进一步增强炎症因子的释放,形成炎症-凝血的正反馈回路,进一步加重肺损伤。其次,SARS-CoV-2与ACE2的相互作用可导致血管紧张素信号失调、炎症和组织损伤等,并使蛋白酶活化受体4(Protease-activated Receptor 4,PAR4)和嘌呤能受体(P2Y12)激活,促进血小板活化并导致血栓炎症,增强炎症和损伤程度,加重炎症-凝血正反馈回路,进一步加重肺损伤。因此,白细胞介素-6受体(Interleukin-6 Recepor,IL-6R)、PAR4和P2Y12是干预炎症-凝血正反馈回路的关键靶点,通过阻断IL-6R预防炎症因子的产生和通过阻断PAR4和P2Y12抑制炎症-凝血正反馈回路在防治ALI的临床治疗和药物研制中具有重要意义。

结合凝血-纤溶系统探讨艾灸改善新型冠状病毒肺炎恢复期患者肺功能优势及选穴

目的:结合凝血-纤溶系统探讨艾灸改善新型冠状病毒肺炎恢复期患者肺功能的优势及选穴规律,以期对新冠肺炎恢复期患者的康复治疗有所裨益。方法:通过对艾灸介入新冠肺炎恢复期患者治疗的可行性、凝血-纤溶系统与肺功能之间联系的探讨,以及艾灸对凝血-纤溶系统调控机制的分析,对艾灸调控凝血-纤溶系统改善新冠肺炎恢复期患者肺功能这一思路进行整合梳理,并对艾灸选穴规律予以总结分析。结果:艾灸可以通过对新冠肺炎恢复期患者血液中相关因子的调控,恢复凝血-纤溶平衡,改善肺通气功能和血流动力,辅助肺损伤修复,减少血栓形成,延缓肺纤维化进程,缓解新冠肺炎恢复期患者遗留症状,提高患者生活质量。结论:艾灸通过调控凝血-纤溶系统改善新冠肺炎恢复期患者肺功能这一思路具有一定优势,值得进一步临床研究与探讨。

应用重组信号蛋白14-3-3间接ELISA诊断日本血吸虫病

目的探讨重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)间接ELISA用于血吸虫病免疫诊断的价值。方法表达并利用纯化的rSj14-3-3与成虫抗原(SjAWA)间接ELISA法分别检测51份急性和49份慢性日本血吸虫病患者和50份正常人血清,以上血清标本同时用SEA致敏的间接血凝试验(SEA-IHA)检测。再以3种方法检测30份华支睾吸虫感染者、24份卫氏并殖吸虫感染者和31份钩虫感染者血清,分析其交叉反应性。结果51份急性和49份慢性血吸虫病患者血清的rSj14-3-3抗体阳性率分别为98.0%和91.8%;SjAWA的检出率分别为96.1%和90.0%;IHA的阳性率分别为98.0%和93.9%。经统计学分析,以上结果无显著性差异(P>0.05)。Sj14-3-3间接ELISA、SjAWA间接ELISA和SEA-IHA对于30份华支睾吸虫感染者的交叉反应性分别为13.3%、20.0%和16.7%,24份卫氏并殖吸虫感染者分别为8.3%、12.5%和12.5%,31份钩虫感染者分别为12.9%、16.1%和12.9%。经统计学分析结果也无显著性差异(P>0.05)。结论rSj14-3-3抗原间接ELISA法诊断日本血吸虫病,具有高度的敏感性和特异性,可用于血吸虫病的免疫诊断。

阳离子脂质体DOTAP佐剂对H5N1流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响

目的研究阳离子脂质体DOTAP佐剂对H5N1型流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响。方法制备DOTAP阳离子脂质体流感病毒裂解疫苗（简称DOTAP流感裂解疫苗）,检测其包封率。将BALB/c小鼠分为13组,分别用含0.1、1.0、10.0μg HA/只剂量以DOTAP、Al（OH）3、CPG-ODN为佐剂以及不含佐剂的流感裂解疫苗于0、21天皮下免疫,PBS作为对照组,用血凝抑制试验检测小鼠初次免疫后21、42天血清HI抗体滴度;用ELISA检测初次免疫后21、42天血清特异性IgG抗体、IgG1、IgG2a亚类抗体滴度,以及初次免疫后42天小鼠脾脏单个核细胞体外经抗原刺激后细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的分泌水平。将BALB/c小鼠分为3组,分别用含不同DOTAP剂量（100、300、600μg/只）的DOTAP流感裂解疫苗于0、21天皮下免疫,检测初次免疫后21、42天小鼠血清HI抗体滴度和IgG抗体滴度。结果 DOTAP流感裂解疫苗粒径在300-400 nm,带正电荷,包封率在50%以上;DOTAP流感裂解疫苗诱导的HI抗体水平和特异性IgG抗体水平均高于流感裂解疫苗,而与铝佐剂和Cp G-ODN佐剂间差异无统计学意义;DOTAP流感裂解疫苗产生的抗体仍以IgG1亚类抗体为主,免疫后42天诱导的IgG2a亚类抗体水平高于流感裂解疫苗和铝佐剂,低于Cp G-ODN佐剂;DOTAP流感裂解疫苗免疫后既分泌高水平Th1型细胞因子IFN-γ,同时也分泌高水平Th2型细胞因子IL-4;不同DOTAP剂量的DOTAP流感裂解疫苗免疫后,其HI抗体滴度和IgG抗体滴度在低、中、高剂量组之间存在明显的量效关系。结论 DOTAP作为H5N1型流感病毒裂解疫苗的佐剂可显著提高流感裂解疫苗的免疫原性,其对体液免疫应答的增强作用不低于铝佐剂和Cp G-ODN佐剂,并具有诱导细胞免疫应答的能力。

成人水痘-带状疱疹病毒感染致暴发性紫癜1例

水痘-带状疱疹病毒(VZV)是一种可感染人类的疱疹病毒,表现为水痘或带状疱疹。本文报告1例男性患者,32岁,表现为反复皮疹4周,伴随症状包括腹痛、高热、足底血疱、血小板减少、纤维蛋白原降低、D-二聚体升高、铁蛋白升高、抗磷脂抗体阳性。皮肤病理明确病毒性皮疹,血液化验VZV脱氧核糖核酸(DNA)阳性。患者被诊断为VZV感染合并暴发性紫癜,在接受抗病毒、抗细菌、丙种球蛋白、糖皮质激素、抗凝等治疗后,患者的病情及实验室指标均有所好转。

重组人干扰素α-2 a雾化吸入联合盐酸氨溴索治疗呼吸道合胞病毒感染所致支气管肺炎患儿的效果

目的:观察重组人干扰素α-2a雾化吸入联合盐酸氨溴索治疗呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致支气管肺炎患儿的效果。方法:选取2020年1月至2023年2月该院收治的120例RSV感染所致支气管肺炎患儿进行前瞻性研究,按照随机数字表法将其分为对照组和研究组各60例。对照组口服盐酸氨溴索片治疗,研究组在对照组基础上联合重组人干扰素α-2a雾化吸入治疗。比较两组临床疗效,治疗前后凝血功能指标[血小板计数(PLT)、D-二聚体(D-D)]水平、血清炎性因子[降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)]水平,临床症状消失时间,以及不良反应发生率。结果:研究组治疗总有效率为90.00%(54/60),高于对照组的75.00%(45/60),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清PLT、D-D水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清CRP、PCT水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组咳嗽消失时间和退热时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗期间均未见明显药物不良反应。结论:重组人干扰素α-2a雾化吸入联合盐酸氨溴索治疗RSV感染所致支气管肺炎患儿可提高治疗总有效率,加快临床症状消失,改善凝血功能,降低炎性因子水平,效果优于单纯盐酸氨溴索治疗。

新型冠状病毒致凝血异常机制及中西医治疗概述

临床发现新型冠状病毒(SARS-CoV-2)能够导致凝血障碍,其机制主要是炎症风暴下肾素-血管紧张素系统异常,促使凝血酶合成、血小板聚集及纤维蛋白原沉积,使机体调节血栓作用减弱。在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的治疗上,西医以对症治疗为主,中医药以多途径、多靶点的作用特色在其中发挥了重要作用,且对于合并凝血障碍的危重症患者疗效较好,能够通过多成分、多环节减少血栓形成,降低出血风险,减轻患者症状,改善预后。参考文献57篇。

人凝血因子ⅧcDNA在小鼠体内的转染与表达

本研究观察逆转录病毒载体和聚酰胺 胺型 (PAMAM)树枝状聚合物介导的人凝血因子Ⅷ (FⅧ )基因在小鼠体内的转染和表达 ,并与体外转染方法作比较。应用含B区缺失 ( 76 0aa- 16 39aa)人FⅧcDNA(FⅧBDcDNA)的以逆转录病毒为框架的重组表达质粒载体 pLNC FⅧBD包装成为逆转录病毒LNC FⅧBD ,exvivo转染小鼠骨髓基质细胞 ,同时将 pLNC FⅧBD与PAMAM树枝状聚合物按照 1∶15混合以形成复合体PAMAM pLNC FⅧBD进行小鼠invivo转染。分别于注射后第 2 4 ,4 8小时 ,第 1,2 ,3,4周取血 ,分离血浆 ,采用一期法测定人FⅧ活性 (FⅧc) ,ELISA法测定人FⅧ抗原 (FⅧAg) ,并采用Bethesdainhibitorassay测定人FⅧ抗体 ;同时取脏器肝、脾、肺、肾提取RNA ,进行RT PCR ,观察各组织的转录 ,并用苏木素 伊红染色法观察各组织的形态学改变。结果表明 ,逆转录病毒转染人FⅧ基因的骨髓基质细胞输入体内后 ,可以在体内继续表达人FⅧ ,并且能有效地分泌至血液中。宿主小鼠体内可检测到的人FⅧ表达持续 3周以上 ,注射后第 2 4小时表达最高水平 ,人FⅧAg平均为 8.6ng/ml,此后人FⅧ抗体逐渐生成 ,人FⅧAg水平渐低 ,于注射后第 4周不再能测出人FⅧAg。注射复合体PAMAM pLNC FⅧBD在体内转染后 ,获得了短暂的人FⅧ生理水平的表达 ,在注射?

日本血友病人的HCV感染及基因型

本文作者检测了195名日本血友病患者的抗-HCV和抗-HIVI 型及肝功能。抗-HCV阳性者为173人,抗-HIVI 型阳性为61人。用双聚合酶链反应法检测63人的 HCV 基因型。40人(占63%)被一种基因型的 HCV病毒感染,其分布为:1a 型5人;1b 型21人;

浙江省与日本A_3型流行性感冒病毒株的血凝特性及HA1序列比较

目的 比较近年来在浙江省与日本流行的A3(H3N2 )型流行性感冒 (流感 )毒株的血凝特征与血凝素重链 (HA1)区域的序列差异。方法 对浙江省不同性状的流感代表株进行了抗原性分析 ,并与日本同期的毒株作了血凝特性及HA1区域的氨基酸序列比较分析。结果 近年在浙江流行的A3型流行株 ,其抗原性已发生较大变异 ,其中绝大部分是对鸡红细胞缺乏凝集特性的O相毒株 ,它与A 武汉 3 5 9 95株二者在HA1区域的氨基酸同源性仅为 94.82 % ,存在较大差异 ,这些O相毒株可以通过在MDCK细胞上的传代而转变为D相毒株 ,日本的同期毒株 ,其情况也相似。结论 A3型流感病毒在HA1区域发生的变异 。

H3亚型猪流感病毒分离与鉴定

从东莞和鹤山等地不同猪场采集的40份鼻拭子或病死猪的肺、气管病料中分离到4株有血凝活性的病毒,其中3株病毒与新城疫病毒阳性血清的HI试验为阳性,另外1株病毒与抗猪流感H3亚型猪流感病毒阳性血清的HI试验为阳性;根据猪流感病毒M基因设计引物,扩增出预期的约315 bp片段,表明该病毒为H3亚型猪流感病毒。

慢性乙型病毒性肝炎患者PT、APTT、FIB临床价值再评价

目的:进一步探讨慢性乙型病毒性肝炎(慢乙肝)患者的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)变化的临床意义。方法:200例慢乙肝患者分为轻度慢乙肝组(轻度组)30例、中度慢乙肝组(中度组)25例、重度慢乙肝组(重度组)65例、肝炎肝硬化组(肝硬化组)30例、重型慢乙肝组(重型组)50例,另选100名正常人作为对照组,检测其PT、APTT、FIB并进行对比分析,并与肝功能指标[ALT、总胆红素及γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)]作相关分析。结果:除轻度组的PT与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其他各组的PT与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05～0.01);除轻度组和中度组的APTT、FIB与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其他各组的APTT、FIB与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05～0.01)。PT、APTT、FIB与γ-GT呈正相关(P<0.05～0.01)。结论:检测慢乙肝患者的PT、APTT、FIB有助于准确判断其肝脏受损程度、评估预后。

H5N1禽流感病毒实验室检测方法灵敏性比较

目的比对实验室常用的H5N1禽流感病毒检测方法灵敏性。方法增殖H5N1病毒,蚀斑技术定量待检病毒,应用细胞接种、血凝实验、RT-PCR、Real-time RT-PCR等方法检测稀释的病毒悬液,比较检测的最低滴度。结果细胞接种、Real-time RT-PCR、RT-PCR及血凝实验能检测病毒的最低滴度为10 PFU/mL、10 PFU/mL、103 PFU/mL及3.52×105 PFU/mL。结论几种检测方法比较而言,细胞接种与Real-time RT-PCR检测灵敏性最高;血凝实验用时最短,但灵敏性低,结果需要进一步确认;RT-PCR用时较较短,检测灵敏性较高。

H1亚型猪流感病毒的分离鉴定

从山东、浙江、湖南、广西等地区各猪场采集30份疑似猪流感病猪的病料,通过鸡胚培养、血凝及血凝抑制试验、电镜观察、RT-PCR和测序分析进行了分离鉴定。结果从山东和湖南两地分离到4株有血凝活性的病毒,其中山东的2株病毒与新城疫病毒阳性血清的血凝抑制试验为阳性,通过电镜观察湖南的2株病毒具有猪流感病毒的特征,且与抗H1亚型猪流感病毒阳性血清的血凝抑制试验为阳性;根据H1亚型猪流感病毒HA基因设计引物,利用RT-PCR扩增出543bp片段,经序列分析证实该病毒为H1亚型猪流感病毒。

鸡传染性支气管炎病毒(M41)HI抗原的制备与初步应用

实验比较了不同方法制备IBV HI抗原,并比较不同PLC1处理浓度、不同保存时间等因素对制备IBV HI抗原的影响,筛选出制备抗原的最佳条件:选择10 U/ml的PLC1与等体积超速离心后的M41 IBV以及pH值7.40、.01 mol/L PBS稀释液混合,在37℃水浴作用2 h并不断振荡,取出后加入β-丙内酯4℃灭活24 h。在HI实验中,该抗原不与AIVH5、AIVH9、ND单因子血清反应,仅与IB阳性血清反应,有高度特异性。用高岭土37℃处理1 h可明显降低SPF阴性血清非特异反应。上述抗原在4℃保存3周血凝价达到最高。应用该抗原检测免疫前后鸡群IBV抗体,取得良好效果,证明用该方法与条件所制备的抗原可以用于IB诊断及临床实验。