日本血吸虫大陆株粘蛋白样蛋白部分基因的克隆

目的构建日本血吸虫中国大陆株粘蛋白样蛋白(SjMLP)核酸疫苗。方法分子克隆常规操作将扩增产物 SjMLP 编码区基因序列克隆至载体 pUCm-T 中,然后亚克隆到真核表达载体 pcDNA3.1(+)中。结果经酶切、PCR 及测序鉴定表明所构建的质粒 pUCm-T/SjMLP 和 pcDNA3.1(+)/SjMLP 中含有所扩增的基因序列。结论成功地构建了含目的基因的真核表达质粒 pcDNA3.1(+)/SjMLP,从而,为进一步对其进行 DNA 免疫系列研究工作奠定了基础。

日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶DNA疫苗对猪保护性免疫作用研究

目的 探讨日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶 (Sj CTPI) DNA疫苗诱导猪的保护性免疫作用。方法 分别构建并制备 pc DNA 3.1- Sj CTPI DNA疫苗及 pc DNA3.1- P35和 P40 (IL - 12的两个亚单位 )的 DNA疫苗。取上海松江本地猪 (自幼阉割 ) 30头 ,分为 A、B、C 3组 ,每组 10头。 A组 (TPI组 )每头猪于两侧臂部肌肉注射 5 0 0 μg Sj CTPI DNA疫苗 ;B组 (TPI+IL- 12组 )每头猪肌肉注射 5 0 0 μg Sj CTPI DNA及 5 0 0 μg P35 DNA疫苗、5 0 0 μg P40 DNA疫苗。C组 (对照组 )每头猪肌肉注射 5 0 0 μg pc DNA3.1质粒 DNA。共免疫 3次 ,每次间歇 3周。末次免疫后 30 d,每猪攻击 6 0 0条日本血吸虫尾蚴 (背部贴片法 )。攻击后 45 d剖杀 ,经胸主动脉灌注 ,并从门静脉处收集成虫计数。从肝脏上同一部位切下小块肝组织 ,置 5 % KOH内溶解 ,后计算每克虫卵数。比较各组间的减虫率、减雌率和减卵率。在免疫前、末次免疫后和攻击后从猪耳静脉采血 ,分离血清 ,用 EL ISA法测抗体。结果 TPI组和 TPI+IL- 12组与质粒对照组相比 ,分别获得 48.3%和 46 .2 %的减虫率 ,5 3.6 %和5 9.6 %的减雌率 ,49.4%和 6 5 .8%的减卵率。TPI组的 10头猪中有 6头在免疫后可检出抗 r Sj CTPI抗体 ,TPI+IL- 12组 10头猪中有

日本血吸虫中国大陆株23kDa膜蛋白的基因克隆与序列分析

本研究根据曼氏血吸虫疫苗候选分子Sm23的基因序列，设计了一对引物，并通过聚合酶链反应（PCR）基因克隆技术，从日本血吸虫中国大陆株cDNA文库中克隆出了中国大陆株23kDa膜蛋白基因。DNA序列分析表明，编码日本血吸虫中国大陆株Sj23膜蛋白的基因含有657bp，与曼氏血吸虫Sm23的核着酸有79．5％的同源性，而与日本血吸虫菲律宾株的Sj23的同源性为100％。该研究为发展Sj23多肽疫苗奠定了基础。

日本血吸虫(中国大陆株)磷酸丙糖异构酶(SjC-TPI)基因克隆与序列分析

根据已知日本血吸虫菲律宾株TPI序列，设计合成一对5’端分别带有BamH1，Sal1酶切位点的引物P1和P2，制备日本血吸虫成虫（中国大陆株）mRNA，采用反转录聚合酶链反应技术，从mRNA中扩增出日本血吸虫中国大陆株TPI基因片段，序列分析表明，日本血吸虫（中国大陆株）TPI基因开放阅读框架全长为759bp，与曼氏血吸虫TPI基因的同源性为84％。与日本血吸虫（菲律宾株）TPI基因的同源性为99.7％。

日本血吸虫疫苗候选抗原GST的研究及重组GST抗原的应用

经过8年(1986～1994)的系统研究弄清我国流行的日本血吸虫(大陆株)天然GST抗原性质及其抗原性,免疫原性,证明26kDa GST为血吸虫GST的同功酶,是日本血吸虫主要的保护性抗原。阐明日本血吸虫大陆株和菲律宾株GST抗原在生化、免疫学特性、氨基酸序列及核苷酸序列上极其相似性的基础上。

日本血吸虫Calpain的DNA疫苗诱导小鼠免疫保护性研究

目的 研究日本血吸虫中国大陆株Calpain的DNA疫苗对Balb/c小鼠的免疫保护性作用。方法 大量制备pVAC质粒DNA和pVAC -CalpainDNA疫苗 ,Balb/c小鼠 5 0只 ,随机均分为对照组和实验组 ,对照组每只小鼠的股四头肌注射接种 10 μgpVAC质粒DNA ,实验组以同样方式注射 10 μgpVAC -CalpainDNA疫苗 ,第 3周加强免疫一次。第 4周每只小鼠经腹部皮肤感染 ( 2 5± 1)条尾蚴 ,感染 6周后剖杀 ,从门静脉灌流收集计成虫数、碎脾计T淋巴细胞总数、从各鼠肝脏的同一部位切下小块肝组织 ,置 5 %KOH溶液消化后 ,计算每克肝组织虫卵数 ,比较减虫率、减雌率和减卵率。于免疫前、第一次免疫后 2周和感染后 2周分别从尾静脉采血 ,用ELISA测定抗体水平。结果 与对照组相比 ,实验组获得 36.84%的减虫率、36.36%的减雌率和 43.31%的减卵率 ,感染后实验组小鼠IgG抗体水平升高幅度大于对照组 ,对照组T淋巴细胞数显著多于实验组。结论 CalpainDNA疫苗可诱导小鼠产生较好的免疫保护作用 。

日本血吸虫亲免素基因的扩增及序列分析

【目的】研究日本血吸虫亲免素基因编码序列的结构及进行初步的功能预测。【方法】用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中扩增,以获取日本血吸虫中国大陆株亲免素基因完整的开放阅读框(openreadingframe,ORF);用生物信息学技术确认其是否为亲免素编码基因并进行结构功能的初步分析和预测。【结果】用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中获得了亲免素基因5'端和3'端所缺序列,得到的亲免素基因cDNA的总序列长为1438bp,其ORF长1296bp,编码431个氨基酸。利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫亲免素基因的完整cDNA序列。并用RT-PCR从日本血吸虫尾蚴mRNA扩增出亲免素基因的ORF。【结论】成功获得了日本血吸虫亲免素编码基因的全长cDNA,为进一步的功能研究打下了基础。

日本血吸虫SjC23蛋白质疫苗对核酸疫苗免疫增强作用的研究

目的 研究 Sj C2 3蛋白质疫苗对 Sj C2 3DNA疫苗增强小鼠的免疫保护作用的效果。方法 分别构建和制备 Sj C2 3DNA疫苗 (pc DNA3.1- Sj C2 3)和 Sj C2 3大亲水片段融合蛋白质 (GST-HD)疫苗。把 48只 BAL B/ c小鼠随机分为 A、B、C、D 4组 ,每组 12只。 A组 (DNA和蛋白质疫苗联合免疫组 )每只小鼠分别在第 0、2周经股四头肌注射 10 0μg Sj C2 3质粒 DNA,在第 4周经背部皮下多点注射 5 0 μg GST- HD+5 0 μg CFA;B组 (Sj C2 3DNA组 )每只小鼠分别在第 0、2、4周经股四头肌注射 10 0 μg Sj C2 3质粒 DNA;C组 (蛋白质疫苗组 )于第 4周每鼠经背部皮下多点注射 5 0 μgGST- HD+5 0 μg CFA1次 ;D组 (对照组 )每鼠分别在第 0、2、4周肌注 10 0 μg pc DNA3.1。各组在末次免疫后 4周每鼠以 45± 2条日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,攻击后 45 d剖杀小鼠 ,计数成虫及肝内虫卵数。在免疫前、末次免疫后和攻击后从小鼠尾静脉采血 ,分离血清 ,用 Western- blot法检测抗体反应。结果 联合组与质粒对照组相比 ,获得了 42 .9%的减虫率和 6 0 .0 %的减卵率 ,均显著高于单独Sj C2 3DNA疫苗组 2 8.1%的减虫率和 37.9%的减卵率 ,及单独蛋白质疫苗组 (GST- HD) 2 3.8%减虫率和 39.5 %的减卵率 (P均 <0 .0 5 )。联合组抗体水平?

日本血吸虫线粒体DNA两个分子的遗传变异

目的 从线粒体DNA的 2个分子 ,探讨我国日本血吸虫的遗传变异。 方法 试剂盒抽提基因组总DNA后 ,以特异性引物对线粒体还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH)脱氢酶 1(ND1)和细胞色素c氧化酶I(COI)进行PCR扩增 ,将PCR产物分别测序 ,并以生物信息学方法加以比较 ,构建系统进化树。 结果 序列系统进化树显示日本血吸虫中国大陆株与中国台湾株之间差异较大 ,在树状图中可归为 2类 ;中国大陆山区型地域株 ,即云南洱源和四川天全在树状图中归为 1类 ;中国大陆湖沼洲滩型地域株 ,即湖南岳阳、江西新建和安徽贵池 3个地域株在树状图中处于并列位置 ;湖北省境内不同地域株在树状图中归为 1类。 结论 我国各地日本血吸虫存在不同程度的遗传变异 ,各地域株间亲缘关系密切 。

日本血吸虫表达序列标签的获取和分析

目的 运用表达序列标签 (expressedsequencetag,EST)技术 ,从日本血吸虫成虫cDNA文库中分离、鉴定和分析表达基因序列 ,为日本血吸虫病的防治提供候选疫苗和药物靶点。方法 构建日本血吸虫成虫cDNA文库 ,随机挑取重组阳性克隆进行测序 ,将获取的EST登录GenBank ,并进行生物信息学分析。结果 随机挑取 382个阳性克隆进行测序 ,获得 1 49个EST(登录号分别为 :CA747382～CA747391 ,BU91 70 5 5～BU91 70 5 8,CA30 5 30 7～CA30 5 30 9,BU5 81 980 ,BU5 82 4 0 0～BU5 82 4 0 3,BU66690 6和CA9465 4 8～CA946666) ,同源性比较发现 ,部分序列与血吸虫的生活史的不同阶段和不同性别序列有一定的同源性。结论 EST技术有助于快速、经济地获取和研究日本血吸虫表达基因。

SjESG-2A锤头状核酶表达载体构建及其抗日本血吸虫虫卵发育研究

目的设计并合成日本血吸虫中国大陆株卵壳蛋白基因2A(eggshell protein gene 2A,ESG-2A)的特异性锤头状核酶并构建真核表达载体。探讨其在BALB/c小鼠体内的抗日本血吸虫虫卵发育作用。方法运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ),将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,采用双酶切、琼脂糖凝胶电泳及DNA序列测定方法鉴定阳性克隆。以日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠,建立动物模型。大量抽提阳性重组子,分别在小鼠感染时、感染后2w、感染后4w,将其经后腿胫前肌免疫BALB/c小鼠,共3次。小鼠感染6w后计数成虫负荷及肝组织虫卵数。ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞培养上清IFN-γ和IL-4的水平。结果经酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA3.1(+)的XbaI和EcoR I酶切位点之间,命名为pcRz-ESG-2A。在核酶组,IFN-γ的水平呈上升趋势,IL-4的水平呈先上升后下降;在空载体组和生理盐水组,IFN-γ的水平呈上升趋势,IL-4的水平也呈上升趋势。核酶组免疫BALB/c小鼠能诱生减虫率25.64%和减卵率44.21%。结论成功合成SjESG-2A特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体。核酶在已感染日本血吸虫尾蚴的BALB/c小鼠体内具有抗日本血吸虫虫卵发育的作用。

日本血吸虫ATP合酶脂结合蛋白样基因DNA疫苗的构建及其在真核细胞中的表达

[目的]构建日本血吸虫ATP合酶脂结合蛋白样基因(ATP synthase lipid-binding protein-like protein gene of Schistosoma japonicum,SjAslp)核酸疫苗,并观察其在真核细胞中的表达情况。[方法]根据GenBank中SjAslp cDNA全长设计特异性引物,从实验室已构建好的重组质粒pBCSK+/SjAslp中扩增出SjAslp cDNA全长,将其克隆入pUCm-T.载体,再亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)构建成日本血吸虫组织蛋白酶B肽链内切酶全基因核酸疫苗(pcDNA3.1(+)/SjAslp);经PCR、酶切及测序鉴定后,利用电穿孔将其转染HeLa细胞。采用免疫细胞化学法检测SjAslp在HeLa细胞内的表达情况。[结果]成功构建SjAslp核酸疫苗,免疫细胞化学技术检测其能在HeLa细胞浆内表达。[结论]pcDNA3.1(+)/SjAslp核酸疫苗能在真核细胞内表达,为抗日本血吸虫核酸疫苗的研制打下了必要的基础。

动物血吸虫病防制的主要进展、问题和今后工作重点

1 我国动物血吸虫病流行现状日本血吸虫病曾在我国南方12个省、市、自治区的400个县(市、区)流行,据统计全国曾有钉螺面积140亿m^2,病人1000万,病畜百万头以上。解放后,在党和各级政府的领导下和血防工作者的辛勤劳动下,我国血防工作取得了举世瞩目的成就,至今已有227个县(市、区)达到消灭血吸虫病标准,55个县达到基本消灭标准,占总疫区县数的70%。

113个日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫表达序列标签的获取及分析(英文)

目的 运用表达序列标签 (ExpressedSequenceTag ,EST)技术快速、节约、有效地获得有关日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫表达基因的知识。方法 随机挑取日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA文库单个重组克隆进行部分测序以获得EST ,获得的EST通过BLAST程序同EMBL寄生虫数据库和GeneBank数据库进行比较及同源性分析。结果 本研究共随机挑取日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA文库单个重组克隆 3 1 4个 ,获得了 1 3 2个有EST价值的序列 ,其中 1 1 3个成功在GeneBankdbEST中登录。 7 6%有EST价值的序列为日本血吸虫已知序列 ,4 5%为日本血吸虫同源序列。曼氏血吸虫或其他生物的同源序列占有EST价值的序列的 2 3 5% ,未知序列占 57 6%。通过同源性分析 ,发现了几个令人感兴趣的基因 ,另外 ,大多数同源序列具有看家基因功能。结论 EST方法具有快速、有效地获得有关日本血吸虫 (中国大陆株 )

日本血吸虫原肌球蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达

目的克隆日本血吸虫原肌球蛋白编码基因,并在大肠杆菌中表达.方法抽提日本血吸虫(大陆株)成虫总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得编码日本血吸虫原肌球蛋白的cDNA片段,该片段与全序列比较,缺氨基端14个氨基酸.该PCR产物克隆入T 载体并对插入片段进行序列测定后,亚克隆入表达载体pbV220,经琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切反应和PCR鉴定后,选择克隆用于温控表达.结果 RT-PCR产物克隆入T载体,序列测定表明,在核苷酸水平和推断和氨基酸水平,与曼氏血吸虫分别有96.5%和98.1的同源性.目的DNA片段亚克隆入原核表达载体pBV220,在大肠杆菌 DH5α中诱导表达.经SDS-PAGE和Western blot分析表明,该非融合表达产物相对分子质量约为32000(32 kDa),日本血吸虫(大陆株)成虫天然原肌球蛋白免疫兔血清能特异识别该重组蛋白.结论编码日本血吸虫原肌球蛋白cDNA克隆及起其在细菌中的表达获得成功.

日本血吸虫原肌球蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达(英文)

克隆日本血吸虫原肌球蛋白编码基因 ,并在大肠杆菌中表达。方法 抽提日本血吸虫 (大陆株 )成虫总RNA ,经逆转录—聚合酶链反应 (RT PCR)获得编码日本血吸虫原肌球蛋白的cDNA片段 ,该片段与全序列比较 ,缺氨基端 1 4个氨基酸。该PCR产物克隆入T载体并对插入片段进行序列测定后 ,亚克隆入表达载体pbV2 2 0 ,经琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切反应和PCR鉴定后 ,选择克隆用于温控表达。结果 RT PCR产物克隆入T载体 ,序列测定表明 ,在核苷酸水平和推断和氨基酸水平 ,与曼氏血吸虫分别有96 5%和 98 1的同源性。目的DNA片段亚克隆入原核表达载体pBV2 2 0 ,在大肠杆菌DH5α中诱导表达。经SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,该非融合表达产物相对分子质量约为 3 2 0 0 0 ( 3 2kDa) ,日本血吸虫 (大陆株 )成虫天然原肌球蛋白免疫兔血清能特异识别该重组蛋白。

日本血吸虫果糖二磷酸醛缩酶抗体反应模式及诊断价值的研究

目的观察血吸虫感染家兔体内抗日本血吸虫中国大陆株果糖二磷酸醛缩酶(Sj FBA)抗体反应的动态变化,评价检测抗Sj FBA抗体IgG用于血吸虫现症感染的诊断与疗效考核价值。方法采用RT-PCR方法从日本血吸虫中国大陆株cDNA中扩增出编码Sj FBA的开放阅读框基因片段,然后亚克隆到表达质粒pET28a(+)中,构建重组表达质粒Sj FBA-pET28a。将重组表达质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,经镍螯合胶亲和层析的方法纯化重组Sj FBA蛋白。用日本血吸虫中国大陆株尾蚴感染日本大白兔,6周后用吡喹酮与青蒿琥酯进行治疗,收集感染前和感染后2、4、6周及治疗后2、4、6、8、10、12、14、16周的血样。以重组Sj FBA为包被抗原,建立检测抗Sj FBA抗体IgG的酶联免疫吸附试验方法(rSj FBA-ELISA),用于检测家兔不同感染阶段血清抗Sj FBA抗体反应模式。分别用5、10、15和20条日本血吸虫中国大陆株尾蚴感染小鼠,收集感染后35d的小鼠血清,采用rSj FBA-ELISA检测抗Sj FBA抗体IgG并观察抗Sj FBA抗体水平与感染度的关系。用rSj FBA-ELISA分别检测血吸虫病患者血清、健康人血清、华支睾吸虫病和卫氏并殖吸虫病患者血清,观察该方法用于血吸虫病诊断的敏感性与特异性;使用该方法检测治疗前及治疗后1年的同一血吸虫现症感染患者的配对血清,观察抗Sj FBA抗体IgG检测用于血吸虫病疗效考核的价值。结果血吸虫感染家兔体内抗Sj FBA抗体IgG水平随感染时间的延长而逐渐增强,感染6周达到高峰(A450值为1.364),但治疗后抗Sj FBA的抗体则迅速下降,治疗6-8周后抗体水平可下降至阴性阈值(A450值为0.4),而未治疗组则抗体水平则始终保持在高水平,表明家兔体内抗Sj FBA抗体反应呈典型的短寿抗体反应模式。不同感染度小鼠血清抗Sj FBA抗体水平随着感染度的升高而逐渐升高,呈剂量依赖性关系。检测抗Sj FBA抗体IgG用于血吸虫现症感染诊断的特异性为88.8%,敏感性为82.5%,阴性预测值和阳性预测值分别为78.6%和91.0%;与华支睾吸虫病患者血清的交叉反应率为10%,与卫氏并殖吸虫病患者血清的交叉反应率为30%。治愈1年后患者血清中抗Sj FBA的抗体IgG阴转率达100%。结论日本血吸虫Sj FBA在宿主体内诱导短寿抗体反应,应用rSj FBA-ELISA检测抗Sj FBA抗体IgG的敏感性和特异性均较高,具有血吸虫病诊断与疗效考核价值。

Sjcb2 DNA疫苗的构建及其在真核细胞中的表达(英文)

目的克隆日本血吸虫组织蛋白酶B基因,构建真核表达重组质粒,转染真核细胞,观察其表达情况。方法用PCR技术从已构建好的重组质粒pBC SK+/Sjcb2中扩增出Sjcb2基因片段,重组入克隆载体pUCm-T。再将Sjcb2基因片段亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)。进行PCR、双酶切和DNA序列鉴定后,运用电穿孔技术将重组体pcDNA3.1(+)/Sjcb2转染HeLa细胞,间接免疫荧光技术观察目的基因的表达。结果成功扩增出Sjcb2基因片段并构建DNA疫苗;重组质粒在HeLa细胞中获得表达。结论Sjcb2基因能够在体外真核细胞中表达。

Sjcb2基因原核表达载体的构建及表达

目的探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)中国大陆株(Chinese strain)组织蛋白酶B肽链内切酶基因(Cathepsin B endopeptidase)的原核表达载体pWR450-1的构建及表达情况。方法根据Genbank中Cathepsin B en-dopeptidase全序列(Genbank登录号为AY226984)设计特异性引物应用聚合酶链反应技术扩增基因全长,克隆入pUCm-T载体,酶切后亚克隆入原核表达载体pWR450-1并进行表达;利用SDS-PAGE及Western blotting观察日本血吸虫组织蛋白酶B肽链内切酶表达情况。结果成功构建了Sjcb2/pWR450-1原核表达重组质粒,该重组质粒在大肠杆菌中可经IPTG诱导表达分子量约为86kD的融合蛋白,Western blotting分析表明,该融合蛋白能被兔阳性血清所识别。结论日本血吸虫组织蛋白酶B肽链内切酶可在原核表达载体pWR450-1中表达,为研究其功能打下了必要的基础。

寄生虫学

抗恶性疟原虫重组谷氨酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定；恶性疟原虫MESA基因的克隆和测序；海南省恶性疟原虫氯喹抗性相关基因Pfmdr1多态性分析；间日疟原虫MSPIC端基因亚克隆及在大肠埃希菌中的融合表达；NO在IL-12诱导抗伯氏疟原虫感染免疫效应中的作用；IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠Th1／Th2细胞因子表达水平的影响；儿童先天性病残与弓形虫感染关系的研究；宫内感染弓形虫影响儿童生长发育的观察；弓形虫表面抗原P22基因片段的克隆、表达及鉴定；弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究Ⅱ．pcDNA3-HBsAg-GRA1在COS-7细胞中的表达及鉴定；弓形虫GRA7基因在大肠埃希菌中的表达；小鼠过继转移致敏小肠IEL抗弓形虫感染；弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区在大，肠杆菌中的表达；卡氏肺孢子虫肺炎动物模型的实验观察；丝虫特异IgG4检测试剂盒的研制；日本血吸虫FKBP12基因的原核克隆表达及表达产物的纯化；日本血吸虫中国大陆株雌性特异性DNA片段及重复序列的分离与鉴定；左旋咪唑防御日本血吸虫尾蚴感染的实验研究；核酸疫苗VR1012／Sj31粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的研究；日本血吸虫染色体核型及其G带带型分析；蚯蚓与日本血吸虫间共同抗原的初步研究；致弱日本血吸虫尾蚴感染小鼠皮肤组织中CD11c分子的动态表达；日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定；日本血吸虫Sj14FABP与细胞因子IL-12重组质粒的构建和表达；Mago nashi：一个日本血吸虫性别决定基因的发现与鉴定；CpG ODN对B本血吸虫感染小鼠Th1／Th2细胞因子表达水平的影响；日本血吸虫Sj16基因重组杆状病毒的构建和鉴定；日本血吸虫精蠹酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析；日本血吸虫天然抗原分子的柱纯析分离纯化与鉴定；铜锈环梭螺（Bellamya aeruginosa）作为广州管圆线虫中间宿主的发现；抗华支睾吸虫代谢抗原单克隆抗体的制备及鉴定研究；华支睾吸虫病大鼠肝细胞凋亡的实验研究；猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价。