日本血吸虫毛蚴与钉螺感染率关系的计量研究

本文报告近年来在室内和现场开展日本血吸虫毛蚴与钉螺感染率关系的计量研究结果.不论在室内、水沟或河道,对一定量的钉螺,毛蚴数量愈多,钉螺的感染率愈高,二者之间呈现正相关.但以定量毛蚴与1、5、10只钉螺的感染作对比分析,则可见钉螺的感染率随钉螺的递增而递减. 钉螺的感染率与毛蚴投放处的距离和水体大小成反比.现场上1次不发现感染的、多次投放可以发现感染;但当钉螺与毛蚴都减少到很少程度时,多次投放也可能不发现感染.

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅺ日本血吸虫中国大陆现场分离株虫卵毛蚴尾蚴对吡喹酮的敏感性

目的测定日本血吸虫中国大陆主要流行区现场分离株虫卵、毛蚴和尾蚴阶段对吡喹酮的敏感性,为建立日本血吸虫吡喹酮敏感性检测技术提供基础。方法分别从中国湖南、湖北、江西、安徽、江苏和云南6省日本血吸虫病流行区病人粪便标本中分离虫卵,建立日本血吸虫现场分离虫株;采用实验室已有的3株曼氏血吸虫株为对照。将各虫株虫卵分别孵育于5×10-6、10-6、5×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中24h后移至清水孵化,观察虫卵的孵化率。将各虫株毛蚴分别暴露于5×10-6、10-6、5×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中,0、1、5min后观察比较毛蚴的运动及形态学变化。将各虫株尾蚴分别暴露于10-5、6×10-7、4×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中,0、20、40、60、80、100min后,解剖镜下观察尾蚴的泳动、收缩和断尾率的变化。并将结果与曼氏血吸虫株进行比较。结果经10-6,5×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中24h后,日本血吸虫虫卵的孵化率分别为0.52%、11.90%和49.15%,曼氏血吸虫分别为4.17%、31.37%和92.53%。当暴露于10-6mol/L吡喹酮1min后,日本血吸虫毛蚴的变形率为100.00%,曼氏血吸虫为55.73%;当分别暴露于5×10-7、10-7mol/L吡喹酮5min后,日本血吸虫毛蚴的变形率为96.82%和21.80%,曼氏血吸虫毛蚴为21.80%和0。当暴露于10-5mol/L吡喹酮中40min,日本血吸虫尾蚴的断尾率为96.75%,曼氏血吸虫为28.30%;暴露于4×10-7mol/L吡喹酮中100min,日本血吸虫尾蚴的断尾率为95.82%,曼氏血吸虫为11.40%;当暴露于10-7mol/L吡喹酮中80min,日本血吸虫尾蚴的断尾率为29.65%,曼氏血吸虫尾蚴为0。结论日本血吸虫各现场分离株间在虫卵、毛蚴和尾蚴阶段对吡喹酮的敏感性无明显差异,但均明显高于曼氏血吸虫。研究提示,将毛蚴移入5×10-7mol/L吡喹酮溶液中1min,镜下观察其变形率,可作为日本血吸虫对吡喹酮敏感性的观察指标,可用于现场判断病人化疗失败的原因是否是由于吡喹酮不敏感株产生所引起。将尾蚴移入4×10-7mol/L吡喹酮溶液中80～100min,镜下观察其断尾率,可用于螺体内虫株吡喹酮敏感性监测。

离子对日本血吸虫毛蚴趋向的影响

目的研究几种常见离子对日本血吸虫毛蚴趋向作用的影响。方法采用改良的Roberts比较法,以不同浓度的Fe3+、Ca2+、Fe2+、Na+、NH4+、Mg2+、Al3+溶液为实验组,等量去离子水作为对照组,检测这些离子对日本血吸虫毛蚴趋向作用的影响。结果Fe3+、Mg2+、Al3+对日本血吸虫毛蚴趋向的影响为显著吸引作用;Fe2+、Ca2+为排斥作用;NH4+和Na+对日本血吸虫毛蚴趋向的影响依离子浓度不同而有差异。结论不同的离子对日本血吸虫毛蚴趋向运动有不同的影响。

日本血吸虫毛蚴存活曲线和期望寿命的实验观察

目的准确掌握日本血吸虫毛蚴从虫卵中孵化出后，在脱氯水中的存活时间。方法采用收集新鲜成熟兔肝虫卵孵化毛蚴，分组、定时、整群在解剖镜下观察的方法，对毛蚴在２０℃和２５℃有光照的两种状态水体中的存活情况进行实验观察。结果在２０℃时日本血吸虫毛蚴的期望寿命为１０．１１ｈ．最长存活时间为 ３８ｈ；在２５℃时日本血吸虫毛蚴的期望寿命为９．０７ｈ，最长存活时间为２６ｈ；两种温度状态下，毛蚴存活曲线属Ｂ型曲线。结论室内进行毛蚴感染钉螺实验时，感染时间应控制在１０ｈ内为宜。

日本血吸虫虫卵中毛蚴抗原的融合表达及抗原性分析

目的重组表达制备日本血吸虫虫卵中毛蚴抗原(SjMP10)。方法根据日本血吸虫虫卵中毛蚴抗原SjMP10分子的读框序列设计合成1对引物,扩增SjMP10DNA片段并克隆到表达载体pGEX-4T-3中。转化BL21(DE3)后,诱导表达谷胱甘肽转移酶-虫卵中毛蚴抗原10(GST-SjMP10)融合蛋白。采用洗脱法制备GST-SjMP10融合蛋白,应用免疫印迹法(Westernblotting)和淋巴细胞增殖试验进行重组蛋白的抗原性分析。结果SjMP10基因克隆到表达质粒pGEX-4T-3后,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导能表达出Mr39000的GST-SjMP10融合蛋白,经电洗脱法纯化的上述重组融合蛋白可被血吸虫感染兔血清所识别,并能刺激血吸虫感染鼠脾淋巴细胞增殖。结论日本血吸虫虫卵中毛蚴抗原SjMP10融合表达获得成功。

吸引日本血吸虫毛蚴的物质及其应用的初步观察

采用改良的Roberts比较法,观察Mg2+、Fe3+等金属离子对日本血吸虫毛蚴(Schistosoma japanicum miracidia)的趋向作用及其在"模拟钉螺"中的应用。结果表明,加入1.00mol/L的Mg2+溶液时,日本血吸虫毛蚴在Φ形容器中实验组和对照组的数目为93:21(P<0.01);Fe3+浓度从0.05mol/L到1.00mol/L变化时,日本血吸虫毛蚴在实验组和对照组的数目分别是52:17(P<0.01),41:7(P<0.01),225:39(P<0.01),24:5(P<0.01),81:29(P<0.01)。一定配比的明胶混合物释放出的Fe3+离子具有比钉螺处理过的水更强的吸引日本血吸虫毛蚴的能力。Mg2+、Fe3+在适宜的溶液浓度时能够显著影响日本血吸虫毛蚴的趋向运动,"模拟钉螺"具有比钉螺处理过的水更大的吸引日本血吸虫毛蚴的能力。利用对日本血吸虫毛蚴有趋向作用的物质制成"模拟钉螺"吸引毛蚴,减少毛蚴侵入钉螺的机会,这种先保护钉螺而最终保护人类的方法有望成为预防日本血吸虫感染的新思路。

日本血吸虫虫卵毛蚴抗原SjMP10的表达及血清学诊断价值

目的优化融合蛋白GST-SjMP10的体外表达条件,探讨GST-SjMP10用作ELISA包被抗原对血吸虫病的诊断价值。方法用不同浓度的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对重组蛋白GST-SjMP10诱导表达,用亲和层析法纯化,用纯化的重组GST-SjMP10蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性、慢性血吸虫感染患者、肝吸虫病患者及健康人血清IgG类抗体,观察该抗原用于血吸虫病诊断的敏感性及特异性。结果当IPTG的浓度为0.1mmol/L时,重组表达的GST-SjMP10融合蛋白大部分处于可溶性状态,可用亲和层析法纯化。以纯化的GST-SjMP10建立ELISA法检测急性、慢性血吸虫感染患者血清IgG类抗体的阳性率分别为97.5%和96.7%,与肝吸虫病患者血清无交叉反应,健康人血清无假阳性反应。结论成功表达GST-SjMP10融合蛋白,用于诊断血吸虫病有较高的特异性和敏感性。

日本血吸虫毛蚴对不同密度和距离湖北钉螺易感性的初步实验观察

为探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum)毛蚴对不同密度、不同距离湖北钉螺(Oncomelania hupensis)易感性,在现场环境下,采用20 000条新鲜孵化出的日本血吸虫毛蚴分别感染1、2、3、5 m处的湖北钉螺,每处钉螺分为5、10、50、100只/袋4个密度组,感染4 h后带回实验室饲养,8周后解剖观察钉螺感染情况。结果发现,距离1、2、3、5 m,密度5、10、50、100只/袋4个组钉螺感染率分别为7.06%、4.35%、2.47%和1.23%;4.55%、4.44%、4.11%和2.27%;2.62%、1.58%、1.29%和1.1%;2.36%、4.04%、2.73%和1.5%。研究表明,钉螺感染概率与距毛蚴投放的距离成反比;但是,未得出钉螺感染率与钉螺密度之间的线性关系。

洲滩草本植物对日本血吸虫毛蚴杀灭作用的观察

分别用10%的青蒿(茎)、猫眼草(茎)、毛茛(叶)、藜蒿(根)和益母草浸出液对日本血吸虫毛蚴进行杀灭试验,作用1min后的毛蚴死亡率分别为88.28%、84.54%、78.42%、62.62%和68.40%。表明以上植物对毛蚴有一定杀灭作用。

经不同螺蛳处理的水对日本血吸虫毛蚴趋向运动的影响

目的观察经不同螺蛳处理的水(SCW)能否影响日本血吸虫毛蚴的趋向运动。方法采用改良Roberts比较法,在22℃室温下,分别观察钉螺、田螺、扁卷螺和赤琥珀螺的SCW影响日本血吸虫毛蚴的趋向运动情况。结果田螺、赤琥珀螺SCW与钉螺SCW一样,对毛蚴的趋向运动具有相同的吸引作用,且田螺、赤琥珀螺的吸引作用与钉螺无明显差异;而扁卷螺的SCW则对毛蚴的趋向运动具有明显的排斥作用。结论钉螺、田螺和赤琥珀螺的SCW对日本血吸虫毛蚴的趋向运动具有吸引作用,而扁卷螺的SCW对毛蚴的趋向运动具有排斥作用。

日本血吸虫毛蚴对钉螺的钻穿及在螺体内的分布和移行

采自安徽贵池的钉螺每粒感染 50只湖南株日本血吸虫毛蚴后的组织学观察说明 :毛蚴钻穿钉螺有从螺鳃部、头足部的表皮以及实质组织 (外套膜、触角和阴茎 )等三方面途径 ,其中以前二者尤为重要 ;毛蚴进入螺鳃丝后直接进入血液循环系统。从头足表皮进入的毛蚴 ,除了少数在钻穿部位附近滞留外 ,多数继续向头足部深层的肌肉和窦状组织间隙移行 ,以前头足窦、直肠和消化道外的组织间隙以及肾脏为主要的移行部位 ;从外套膜、触角、阴茎等部位进入的毛蚴不表现明显的组织间移行 ;至于毛蚴能否从消化道部位入侵 ,需进一步观察。螺宿主对吸虫幼虫期的血细胞反应主要是在毛蚴入侵早期以及子胞蚴逸离母胞蚴的早期 ,表明螺宿主血细胞反应可能具有对幼虫发育期的特异性。

蚊幼虫对日本血吸虫毛蚴非选择性摄入现象的观察

蚊幼虫对日本血吸虫毛蚴非选择性摄入现象的观察宋文剑，李雍龙，韩家俊血吸虫毛蚴除能入侵某些非特异性螺类及与其共生于同一生态环境的某些水生动物如鱼、虾、蝌蚪外，还能被其他天敌所吞食（Ｂａｒｂｏｓａ，１９６５）。本文报道了谈色库蚊（Ｃｕｌｅｘｐｉｐｉｅｎｓ...

水环境对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向运动的影响

目的探索硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴侵入钉螺的最佳水环境。方法采用改良的Rorbert比较法,以0.2 mol/L硫酸亚铁胺溶液进行实验,等量去离子水作为对照组,比较不同pH、不同水硬度和盐度对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴侵入钉螺的影响。结果在pH(6～10)的环境对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向运动无显著的影响。随着溶液的酸碱度在相对安全的范围内改变,毛蚴的趋向仍为排斥作用;水的硬度对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向运动无显著的影响;而水中盐度变化时,硫酸亚铁胺对日本血吸虫毛蚴大多仍呈排斥作用。结论以上结果说明硫酸亚铁胺无论在酸性或碱性土壤环境中都具有较好地抑制毛蚴侵入钉螺的作用;水硬度和含盐度在一定范围内变动对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向作用无显著影响。

猪日本血吸虫毛蚴孵出时间观察

为了解感染血吸虫的牲猪,经粪孵检查毛蚴的孵出时间,作了下列观察。 一、材料和方法 阳性钉螺来源、实验动物选购、试验感染尾蚴数及分组均与第294页同。 二、试验方法 试验猪8头,粪孵阳性后,每头猪任意取新鲜粪便10g,通过40孔/25.4mm尼龙筛过滤,弃去沉渣,滤液再以260孔/25.4mm过滤清洗,整个过程在10℃水温下30min内完成,然后将沉渣置入250ml三角烧瓶内,添加27℃左右温水于26℃恒温箱内孵化,每隔2h倒出孵化瓶内水1次,

湖沼地区草本植物化感作用对日本血吸虫毛蚴影响的研究

目的:观察洲滩草本植物与日本血吸虫之间的化感作用及生态学关系,探讨控制湖沼地区血吸虫病传播的新措施。方法:采用改良的Rorbert’比较法和平皿法,观察湖北省荆州市郊血吸虫病疫区草本植物浸出液(10%)对日本血吸虫毛蚴趋向钉螺的影响及杀灭毛蚴的作用。结果:野胡萝卜草、猫眼草、地菜、苔草、紫花地丁等洲滩草本植物的浸出液能够非常显著地抑制日本血吸虫毛蚴的趋向运动,而小蓟的浸出液具有显著地吸引日本血吸虫毛蚴的作用;益母草、毛茛、猫眼草、蒿及藜蒿浸出液对日本血吸虫毛蚴具有杀灭作用。结论:洲滩草本植物的化感作用具有控制血吸虫病传播的潜在能力,有望成为一种控制湖沼地区血吸虫病的新措施。

绵羊日本血吸虫粪孵毛蚴的孵期和孵峰

绵羊日本血吸虫粪孵毛蚴的孵期和孵峰林邦发，孟秀珍，傅志强（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）现今，在家畜日本血吸虫病的诊断中，病原学的诊断方法仍然作为确诊的依据，目前使用粪孵毛蚴诊断日本血吸虫病中用三送（粪）三检或一送（粪）三检方法，检出...

日本血吸虫毛蚴与钉螺感染率计量关系的进一步研究(河道现场实验部分)

在平原水网地区河道内,于平均气温为20.85℃的5月,将钉螺袋(每袋5只阴性钉螺)固定在岸边水下2cm处,每个实验点1袋。以不同数量毛蚴投入紧靠螺袋的水中,2次/d(4h后取出螺袋),连续6d,共投放12次,作现场实验。结果每次投放25、50、100、500、1000及2000条毛蚴6个实验组的钉螺感染率依次为1.09％、0.45％、2.74％、12.39％、27.27％及54.48％;空白对照组感染率为0％。毛蚴数与钉螺感染率呈线性正相关(r=0.9996,P<0.01),其回归方程为y=-0.3655+0.0274x(x=毛蚴数,y=钉螺感染率)。据此推算了钉螺的理论感染率及其95％可信限。理论数与实际数符合良好。前2个低剂量毛蚴组理论钉螺感染率的95％可信限的下限值均为0％。