黄芩苷对感染性早产模型大鼠的干预效果及对AMPK/NF-κB通路的影响

目的探究黄芩苷对感染性早产模型大鼠的干预效果及对腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子κB(NF-κB)通路的影响.方法选取成功妊娠Wistar雌性大鼠,8只为空白组,24只成功建模,分为模型组、药物对照组、实验组各8只.药物对照组、实验组分别进行黄体酮、黄芩苷干预,7 d后光镜下观察胎盘组织病理形态,酶联免疫吸附法检测炎性因子、基质金属蛋白酶(MMP)、氧化应激指标水平,实时荧光定量法和蛋白质免疫印迹法检测AMPK mRNA、NF-κB mRNA和蛋白表达量.结果与空白组相比,模型组、药物对照组、实验组单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、丙二醛(MDA)水平、NF-κB mRNA和蛋白表达量上升,超氧化物歧化酶(SOD)水平、AMPK mRNA和蛋白表达量下降(P<0.05);与模型组相比,药物对照组、实验组MCP-1、HMGB1、IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9、MDA水平、NF-κB mRNA和蛋白表达量逐渐下降,SOD水平、AMPK mRNA和蛋白表达量逐渐上升(P<0.05).结论黄芩苷可减轻感染性早产大鼠炎性及氧化应激反应,调节基质金属蛋白酶水平,其原因可能与AMPK/NF-κB通路得到调控有关.

高氧诱导SD大鼠ROP动物模型的建立

目的:探讨用SD大鼠建立高氧诱导的早产儿视网膜病变(ROP)动物模型,为研究该病的发病机制及治疗提供理论基础。方法:新生SD大鼠24只分为2组,每组12只,实验组大鼠置于IPR-2小鼠隔离包,连续吸高浓度O27d后,再置于空气中饲养7d;对照组大鼠置于空气中饲养14d。通过视网膜铺片观察视网膜血管、组织切片HE染色观察视网膜新生血管、免疫组织化学观察VEGF和CD34蛋白的表达。结果:视网膜铺片显示实验组见大量无灌注区及新生血管芽,较对照组明显多。HE染色显示实验组内皮细胞数较对照组明显多。免疫组织化学表明CD34和VEGF在突破内界膜的细胞呈阳性表达。VEGF半定量测定显示实验组平均灰度值较对照组低,面密度值较对照组高。两组鼠生长发育均未见明显异常。结论:高氧诱导SD大鼠成功产生视网膜新生血管,可作为探究ROP疾病发生机制和治疗方法的可靠动物模型。

Pyk2在高氧诱导小鼠视网膜新生血管模型中的表达研究

目的探讨高氧诱导小鼠视网膜新生血管模型中富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（Pyk2）基因表达水平的变化。方法实验研究。选取7日龄C57BI／6J新生小鼠144只，分为高氧组和对照组，每组72只。高氧组小鼠在密闭氧箱内以（75±2）％氧浓度饲养5d后置于室内空气环境中；对照组小鼠一直处于室内空气环境中饲养。两组小鼠于出生后12、14、17d分别处死8只，进行组织病理学切片检查和视网膜铺片。实时荧光定量PCR检测Pyl（2和血管内皮生长因子（VEGF）在视网膜组织中的表达水平。多组间均数比较采用两因素方差分析，组间均数比较采用SNK-q检验；同一时间点两组间数据比较采用t检验。结果组织病理学切片检查结果可见，高氧组小鼠出生后14d（15．36±3．69）和17d（29．63±4．69）有大量突破视网膜内界膜的内皮细胞核及血管芽，与对照组（0．97±1．00、0．83±0．79）相比差异有统计学意义（t14d=-20．629，P14c=0．000；t17d=-33．814，P17d=0．000）。视网膜铺片检查结果可见，高氧组小鼠出生后12d视网膜血管明显收缩、阻塞，视网膜大片区域无灌注，出生后14d新生血管开始形成，出生后17d新生血管形成达到高峰。实时荧光定量PCR检测结果可见，与对照组（Pyk2：12d：1．00±0．14，14d：0．71±0．20，17d：0．67±0．15；VEGF：12d：1．00±0．13，14d：0．88±0．14，17d：0．94±0．15）相比，高氧组出生后12dPyk2（0．05±0．03）和VEGF（0．10±0．06）mRNA表达量均降低（t=15．706，P=0．000；t=15．911，P=0．000），而出生后14d和17dPyk2（1．11±0．22、1．68±0．30）和VEGF（2．10±0．41、4．85±0．46）表达量增高（Pyk2：t14d=-3．376，P14d=0．007；t17d=-7．358，P17d=0．000；VEGF：t14d：-6．904，P14d：0．000；t17d=-19．667，P17d=0．000）。结论高氧诱导小鼠出生后14d和17d视网膜组织中Pyk2的表达水平增高，Pyk2可能参与高氧诱导的视网膜新生血管形成。