米非司酮配伍米索前列醇对早孕蜕膜组织转化生长因子表达的影响

目的观察米非司酮配伍米索前列醇对早孕蜕膜组织转化生长因子表达的具体影响。方法以2015年1月至2016年1月在我站自愿要求流产的健康早孕妇女60例为研究对象,结合其流产方法的不同分为两组。测定观察组(米非司酮+米索前列醇流产30例)、对照组(常规负压吸引手术流产30例)患者排除的蜕膜组织中TGF-β(转化生长因子)的表达差异。结果两组患者对比显示观察组患者TGF-β表达等级与对照组患者相比存在显著性差异,且观察组低于对照组(t=8.152,P<0.05)。同时观察组患者中TGF-β表达等级为2级者(16.7%)与对照组患者(86.7%)相比存在显著性差异,且观察组低于对照组(χ~2=30.612,P<0.05)。结论米非司酮配伍米索前列醇能有效抑制早孕蜕膜组织中转化生长因子的表达,通过免疫效应有效达到终止患者早期妊娠的目的。

米非司酮对早孕绒毛、蜕膜组织中胰岛素样生长因子-Ⅱ mRNA表达的影响

目的 :探讨米非司酮对早孕绒毛、蜕膜组织中胰岛素样生长因子_Ⅱ (IGF_Ⅱ )mRNA表达的影响及IGF Ⅱ与早期妊娠及流产的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR) ,对 2 0例人工流产妇女 (对照组 ) ,2 0例服用米非司酮药物流产的早孕妇女 (药物组 )绒毛、蜕膜组织中IGF_ⅡmRNA的表达进行检测。苏木精 伊红染色 ,PAS染色分别观测其绒毛及蜕膜组织中组织形态学改变及其糖原储存量变化。结果 :药物组绒毛、蜕膜组织中IGF_ⅡmRNA的表达与对照组相比明显降低(P <0 0 5 ,P <0 0 1)。对照组绒毛、蜕膜组织中糖原含量丰富 ,药物组均较低 (P <0 0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :米非司酮可能通过下调绒毛、蜕膜组织中IGF_ⅡmRNA的表达 ,影响胎盘功能 。

胰岛素样生长因子系统在人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达

为探讨胰岛素样生长因子系统 (IGFs)在体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达及其作用 ,采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术半定量检测体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中 IGFs m RNA表达水平。结果显示 ,体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中可以检测出胰岛素样生长因子 - II(IGF- II) m RNA、胰岛素样生长因子 - I受体 (IGF- IR) m RNA、胰岛素样生长因子结合蛋白 - 3(IGFBP- 3) m RNA表达 ,其中 IGF- II m RNA、IGF-IR m RNA表达为强阳性 ,IGFBP- 3m RNA表达较弱。因此认为 ,IGFs可能在早期妊娠蜕膜和绒毛滋养层发育分化、胎盘形成和胚胎生长发育过程中以自分泌和 (或 )旁分泌方式发挥重要的调节作用。

孕激素对早孕蜕膜基质细胞胰岛素样生长因子-Ⅰ受体基因表达的调控

目的 探讨孕激素对体外培养的人早孕蜕膜基质细胞胰岛素样生长因子 - 受体 (IGF- R)基因表达的影响。方法 采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术半定量检测不同浓度孕激素作用 72小时后及 0 .1μm ol/ L孕激素作用不同时间后人早孕蜕膜基质细胞中 IGF- R m RNA的表达水平。结果 体外培养的人早孕蜕膜基质细胞中 IGF- R m RNA呈强阳性表达 ,孕激素降调 IGF- R m RNA的表达 ,并与浓度呈显著负相关 (r=- 0 .6 80 ,P<0 .0 0 1)。孕激素终浓度为 0 .1μm ol/ L时 ,IGF- R m RNA的表达与作用时间无显著相关性 (r=0 .0 0 5 ,P>0 .0 5 )。结论 孕激素可能通过降调人早孕蜕膜基质细胞中 IGF- R m RNA的表达 ,调节基质细胞的增殖和蜕膜化 。

血管内皮生长因子在正常月经周期子宫内膜及早孕蜕膜中的表达

目的 观察血管内皮生长因子 (VEGF)在正常人子宫内膜增殖期、分泌期和早孕蜕膜组织的表达及其定位。方法 应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 -过氧化酶连接法 (SP法 )检测 7例正常增殖期、12例分泌期、11例早孕蜕膜VEGF的表达。VEGF阳性计数分级为 :阳性细胞数≤2 0 %为Ⅰ级、2 0 %～ 4 0 %为Ⅱ级、>4 0 %～ 6 0 %为Ⅲ级、>6 0 %为Ⅳ级。在统计学处理时将Ⅰ级作为阴性 ,Ⅱ～Ⅳ级作为阳性。通过检测比较 3组VEGF表达有无差别。结果 3组年龄 (岁 )差别无统计学意义 ,分别是 2 6 0 0± 4 12、2 8 6 9± 3 0 0、2 8 73± 6 5 9(P >0 0 5 )。VEGF在 7例增殖期子宫内膜中 2例表达阳性 (2 8 6 % ) ,12例分泌期子宫内膜全部表达阳性 (10 0 % ) ,11例早孕蜕膜 10例阳性 (90 9% ) ,三者率的差异有统计学意义 (P <0 0 1)。增殖期与分泌期VEGF阳性率比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;分泌期与蜕膜期VEGF阳性率比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。VEGF表达主要位于内膜腺上皮细胞 ,棕染颗粒定位于细胞浆内。结论 VEGF在人月经周期子宫内膜变化及胚胎着床中可能起一定作用。VEGF在子宫内膜主要表达于腺体细胞 ,染色定位于细胞浆。

米非司酮抗早孕子宫蜕膜表皮生长因子的测定

目的:了解米非司酮对蜕膜中表皮生长因子(EGF)的影响。方法:应用放射免疫法测定米非司酮加米索组、米非司酮组、对照组各15例蜕膜中EGF水平。结果:3组蜕膜中EGF水平分别为11.055±12.893ng/mg蛋白质,9.528±8.102ng/mg蛋白质,12.667±8.598ng/mg蛋白质,无显著性差异(P>0.05)。结论:米非司酮对蜕膜中EGF水平无影响。

白血病抑制因子及其受体在早孕蜕膜和绒毛组织中表达的研究

目的：探讨正常早孕蜕膜和绒毛组织白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)的表达。方法：采用原位杂交和免疫组织化学染色技术对18例正常早孕妇女蜕膜和绒毛组织LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白的表达进行研究。结果：全部早孕蜕膜组织和绒毛滋养细胞中有LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白表达，同一组织和细胞LIF和LIFR基因表达强弱基本一致，LIFR在绒毛滋养细胞的表达强于蜕膜。结论：人类蜕膜和绒毛滋养细胞LIF和LIFR基因表达可能与胚泡着床、维持胎盘功能和促进胚胎发育有关。

米非司酮对早孕大鼠蜕膜、黄体分泌组织型纤溶酶原激活因子及蜕膜组织学的影响

目的 进一步探讨米非司酮抗生育的作用机理。方法 应用酶联免疫吸附法检测早孕大鼠蜕膜、黄体组织培养液中组织型纤溶酶原激活因子 (tissue- type plasminogen activator,t PA)的含量 ,观察米非司酮对体外培养大鼠蜕膜形态学的影响。结果 加入米非司酮培养 2 4 h后 ,蜕膜和黄体组织培养液中的 t PA含量与对照组比较均显著升高 (P<0 .0 5 ) ;米非司酮对早孕大鼠蜕膜形态学的影响表现为蜕膜组织退化 ,间质水肿 ,血管扩张及组织间血细胞渗出。结论 提示米非司酮还可能通过激活黄体和蜕膜的纤溶过程 ,引起黄体溶解及蜕膜细胞外基质退化、蜕膜剥脱 。

服用米非司酮后早孕妇女血浆、蜕膜和绒毛组织中的肿瘤坏死因子和泌乳素水平

肿瘤坏死因子(TNF-α)在女性生殖内分泌系统作为激素调节肽已有不少报道,它刺激垂体细胞释放促肾上腺皮质激素(ACTH)、生长激素(GH)、促甲状腺激素(TSH)和泌乳素(PRL),抑制蜕膜细胞PRL的释放和mRNA表达.本研究测定了服用米非司酮100mg 48h后做人工流产的早孕妇女血浆、蜕膜和绒毛组织中的TNF-α和PRL水平,以探讨TNF-α和PRL在米非司酮抗早孕过程中的作用及其之间的相互关系.

RU486对早孕妇女蜕膜组织级体激素受体含量及血清激素水平的影响

RU486是法国Roussel Uclaf公司合成的一种孕酮受体水平拮抗剂,临床实践证明该化合物具有较好的催经止孕效果。为进一步明确RU486的作用机理,本文测定了早孕妇女服用RU486后蜕膜组织孕、雌激素受体含量及血清激素水平。结果表明,一次口服RU486 600mg可使早孕5—7周妇女蜕膜组织细胞核内孕、雌激素受体含量增加,细胞浆内孕激素受体含量减少,血清雌二醇(E_2)、睾酮(T)含量上升而对FSH、HCG和孕酮(P)含量无明显影响。本研究结果进一步证实,大剂量的抗孕激素RU486能竞争性地结合蜕膜组织孕激素受体,使早孕期高浓度的内源性孕酮与其受体的正常结合受到干扰,从而达到抗早孕目的。

Bcl-2和Bax蛋白在人早孕胎盘绒毛和蜕膜组织中的表达

目的探讨Bcl-2和Bax蛋白在人早孕绒毛和蜕膜组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学ABC法检测Bcl-2和Bax蛋白在孕5～7周绒毛和蜕膜组织细胞中的表达,用真彩色病理图像分析系统4.0图像分析软件测定Bcl-2和Bax蛋白表达的积分吸光度值。结果Bc1-2蛋白主要分布于孕5～7周绒毛合体滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质和细胞核中,蛋白表达积分吸光度值依次降低,其差异无统计学意义（P〉0.05）。Bax蛋白在孕5～7周绒毛细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞中均未见表达;孕6周,Bax蛋白表达于极少部分蜕膜细胞的细胞质中。结论Bc1-2和Bax蛋白在人早孕过程中参与了绒毛滋养层细胞增殖和分化、子宫内膜蜕膜化的过程,在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。

米非司酮对人早孕蜕膜组织细胞凋亡的影响

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）同胚泡植入及胎盘发育密切相关，为了进一步探讨米非司酮终止早孕的机制，本文随机选择要求人工流产的妇女２５名，服药组１３名，对照组１２名。应用流式细胞仪对经碘化丙锭（ＰＩ）染色后的蜕膜组织细胞ＤＮＡ进行分析。结果两组细胞ＤＮＡ直方图上均出现细胞凋亡峰，其细胞所占比例（ｘ±ｓ）％服药组为６．８２±３．０９，对照组为３．４３±２．１３，服药组明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。二倍体峰细胞比例服药组为７６．００±７．０９，对照组为８４．４５±３．８４，服药组低于对照组（Ｐ＜０．０５）。四倍体峰细胞比例两组分别为３．７０±１．６４、３．２９±０．６７，无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结果表明人早孕蜕膜组织中存在着细胞凋亡，米非司酮终止早孕的作用可能是通过拮抗孕激素作用促进蜕膜细胞凋亡而实现的。

米非司酮对早孕绒毛蜕膜组织细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜组织细胞增殖及凋亡的影响。方法选取2012年6月-2013年12月该院收治的自愿采用米非司酮药物流产的早孕妇女48例作为研究组,同期在自愿进行人工吸宫流产的早孕妇女50例作为对照组,比较分析两组患者绒毛蜕膜组织中Bcl-2、Bax、Fas、Survivin蛋白表达情况及细胞增殖指数和凋亡指数。结果与对照组相比,研究组患者绒毛蜕膜组织中Bax、Fas以及Survivin蛋白的阳性表达明显提高(P<0.05),而两组Bcl-2蛋白的阳性表达变化不明显(P>0.05)。与对照组相比,研究组患者绒毛蜕膜凋亡指数均明显提高(P<0.05),两组绒毛蜕膜的增殖指数变化不明显(P>0.05)。讨论米非司酮抗早孕机制可能是通过对基因Bax、Fas以及Survivin蛋白表达的调控,以达到诱导早孕绒毛蜕膜组织细胞凋亡,从而起到抗早孕的临床作用。

外源性细胞因子对早孕蜕膜调节自然杀伤细胞活性的作用

为探索外源性细胞因子对妊娠的影响，本研究在培养的蜕膜细胞中加入不同浓度的干扰素γ、表皮生长因子、白细胞介素２ 和白细胞介素６，培养 １２、２４ 和 ４８ 小时后取其上清液，５ １ Ｃｒ 掺入法检测其对人外周血自然杀伤细胞（ Ｎ Ｋ）的杀伤作用。结果发现，该上清液可以促进人外周血 Ｎ Ｋ 细胞的杀伤活性，这种作用与细胞因子的种类、浓度及作用时间无明显相关性。提示外源性细胞因子有可能通过破坏蜕膜细胞因子网络平衡状态对妊娠造成危害。

早孕妇女外周血和蜕膜组织中自然杀伤细胞亚群的变化

目的和方法：用流式细胞仪检测正常非孕及早孕妇女外周血和蜕膜自然杀伤细胞表面标记ＣＤ５６和ＣＤ１６分子，探讨早孕外周血与蜕膜之间自然杀伤细胞亚群的差异以及雌、孕激素对外周血自然杀伤细胞的影响。结果：蜕膜以ＣＤ５６＋细胞为主要淋巴细胞，早孕外周血则以ＣＤ５６＋ＣＤ１６＋和ＣＤ１６＋为主。孕酮在一定范围内增加，可使外周血自然杀伤细胞各亚群的百分率明显增加；在早孕期，雌、孕激素水平的急剧升高可能使外周血ＣＤ５６＋细胞向ＣＤ１６＋细胞转化。结论：早孕外周血和蜕膜组织中的自然杀伤细胞对维持正常妊娠发挥着重要作用。

米非司酮对早孕蜕膜组织中IV型胶原及纤维粘连蛋白的影响

目的 :探讨米非司酮 (Ru486 )对早孕蜕膜组织中 IV型胶原、纤维粘连蛋白(FN)的影响 ,进一步认识米非司酮的抗早孕机理。方法 :孕 <6 0 d妇女 ,随机分为对照组和药物组。药物组口服米非司酮总量为 1 5 0 mg。采用免疫组织化学 (ABC)法测定早孕蜕膜组织 IV型胶原 (对照组 1 5例 ,药物组 2 0例 )和纤维粘连蛋白 (对照组 2 5例 ,药物组 30例 )的分布状况。结果 :与对照组相比 ,药物组早孕蜕膜组织中 IV型胶原、FN均明显减少(P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 )。尤其是 IV型胶原在腺体基膜 ,FN在蜕膜细胞间质中降低最为明显 (P<0 .0 1 ) ,上皮基膜、血管周围 IV型胶原含量也明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :米非司酮明显影响早孕蜕膜组织中这两种细胞外基质 (ECM)的含量及分布 ,可使 IV型胶原、FN的含量减少 ,而起到抗早孕作用。早孕蜕膜组织中这两种 ECM成分可能受孕激素及糖皮质激素的调控。

外源性细胞因子对早孕蜕膜T细胞免疫活性的研究

目的 :探讨外源性细胞因子对早孕蜕膜T细胞免疫活性作用的方式。方法 :在培养的蜕膜细胞中加入γ干扰素、白细胞介素 2、白细胞介素 6和表皮生长因子 ,共同培养 12、2 4、4 8h后收集上清液 ,并加入培养的T细胞中 ,用氚 胸苷 (3 H TdR)掺入法测定T细胞的转化值。结果 :在蜕膜与细胞因子共同培养的上清液作用下 ,各实验组T细胞的转化有不同程度的升高 ,有的T细胞转化效应显著增强 (P <0 .0 5 ) ,但增强的T细胞转化效应未显示出与作用于蜕膜的细胞因子种类、浓度及作用时间有相关性。结论 :在外源性细胞因子的作用下 ,早孕蜕膜细胞可以增强T细胞的转化作用 ,从而破坏蜕膜免疫微环境细胞因子网络的平衡状态 ,危害妊娠。

排胚汤对早孕流产物绒毛及蜕膜组织的影响

1997年9月～1998年1月,采用中药排胚汤协同西药米非司酮抗早孕,临床取得流产率增高,药流后出血时间缩短的疗效,在此基础上,对流产物进行了病理检查,观察排胚汤对绒毛和蜕膜组织的影响。材料和方法1 药物米非司酮:每片25mg,北京第三制药厂生产;米索前列醇:每片200μg,英国 Semele 公司生产;排胚汤:由莪术、水蛭、急性子等组成,本院药厂生产,每瓶100ml(含生药量0.86g)。

子宫内膜、正常早孕和自然流产蜕膜组织中△Np63的表达

目的观察△Np63蛋白在自然流产蜕膜组织中的表达,探讨△Np63在胚泡植入和早期妊娠维持中的作用。方法收集自然流产的蜕膜27例组织(其中胚胎停止发育23例、习惯性流产1例及不全流产3例),正常早孕蜕膜66例,非妊娠期子宫内膜组织57例(其中增生期33例,分泌期24例),用SP免疫组化染色法观察△Np63的表达。结果△Np63广泛表达于腺上皮和间质细胞中。增生期和分泌期子宫内膜中△Np63主要表达在腺上皮,蜕膜组织中△Np63在间质蜕膜细胞中的有较强的表达。流产组△Np63蛋白阳性率为55.6%,明显低于增生期的90.9%、分泌期的87.5%及正常早孕组的86.4%(P<0.05)。△Np63高表达率在分泌期组及流产组分别为16.7%和11.2%,明显低于增生期的63.6%和正常早孕组的57.6%(P<0.01)。结论△Np63可能参与子宫内膜的生理周期变化,并与子宫内膜向早孕蜕膜组织转化及维持早孕关系密切。