早期生长反应基因2在肝癌组织的表达及其对细胞增殖能力的影响

目的 观察早期生长反应基因2（EGR2）在肝癌组织中的表达,探讨其对肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 分析肿瘤基因组图谱（TCGA）数据库中50对肝癌组织和癌旁非癌组织中EGR2的mRNA表达水平;用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测8个患者的肝癌组织及配对癌旁非癌组织中EGR2的表达.通过构建重组质粒pQCXIP-EGR2并转染HepG2肝癌细胞,构建稳定高表达EGR2的肝癌细胞株,并采用噻唑蓝（MTT）法和平板克隆形成实验观察稳定高表达EGR2对肝癌细胞增殖能力的影响.同时采用Western blot法和FQ-PCR法检测稳定高表达EGR2对细胞周期相关蛋白细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达的影响.结果 TCGA数据库分析结果表明EGR2在肝癌组织中的表达量（89.95±16.04）明显低于癌旁非癌组织（440.59±60.60,P＜0.05）.FQ-PCR结果也显示,与癌旁非癌组织比较,来自同一患者的肝癌组织中EGR2基因的mRNA表达水平明显降低（P＜0.05）.MTT实验结果表明显示稳定高表达EGR2的细胞的生长速度明显降低（P＜0.05）.平板克隆形成实验结果显示,与对照细胞比较（177.00±8.18）,高表达EGR2的肝癌细胞的克隆形成数量（86.00±5.51）显著减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.Westem blot法和FQ-PCR实验结果表明,稳定高表达EGR2可降低肝癌细胞中Cyclin D1的表达.结论 EGR2在肝癌中表达下调,过表达EGR2可通过调控Cyclin D1的表达进而抑制肝癌细胞的增殖.