早期生长反应蛋白2在糖尿病神经病变大鼠坐骨神经中的表达

目的:观察早期生长反应蛋白2(early growth response protein 2,EGR2)在糖尿病神经病变大鼠坐骨神经中的表达情况。方法:60只大鼠取6只作为对照组,另外54只大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),监测大鼠血糖。23只大鼠形成糖尿病,其中有5只大鼠形成糖尿病神经病变。测定各组大鼠坐骨神经传导速度,每周测定一次尾静脉血糖,取小段坐骨神经作横断面电镜检查。PCR和蛋白质印迹检测坐骨神经EGR2的表达情况。结果:EGR2 mRNA及蛋白表达在糖尿病神经病变组明显高于在糖尿病组。结论:EGR2在糖尿病神经病变的大鼠坐骨神经表达明显升高,可能是通过IL6/gp130/STAT3途径导致的。

玉蓝降糖胶囊通过调节早期生长反应因子2缓解糖尿病周围神经病变大鼠的神经髓鞘损伤

目的:研究玉蓝降糖胶囊对糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经髓鞘损伤的修复作用及其对早期生长反应因子2(EGR2/KROX20)和髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响,探讨玉蓝降糖胶囊对周围神经病变大鼠髓鞘损伤的保护机制。方法:将96只SD大鼠随机分为正常组、模型组、玉蓝降糖胶囊低剂量组、玉蓝降糖胶囊中剂量组、玉蓝降糖胶囊高剂量组、二甲双胍+依帕司他组,每组16只。正常组大鼠予普通饲料饲养,其余各组大鼠予链脲佐菌素腹腔注射配合高脂高糖饲料喂养,各给药组小鼠均灌胃相应剂量药物。给药结束后检测大鼠机械痛阈值(MNT)及坐骨神经传导速度(SNCV),HE染色法观察大鼠坐骨神经和背根神经节(DRG)组织的病理改变;采用免疫组化法检测小鼠坐骨神经中KROX20、MBP和白介素-6(IL-6)表达水平。结果:模型组大鼠血清糖化血清蛋白(GSP)水平高于正常组(P<0.01);玉蓝降糖胶囊高剂量组大鼠血清GSP水平低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠MNT、SNCV均低于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);玉蓝降糖胶囊高剂量组、二甲双胍+依帕司他组大鼠MNT、SNCV均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。病理学结果显示,与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经中出现较多神经髓鞘结构紊乱、轴突萎缩的现象,DRG神经元结构松散,出现空泡变化、染色减弱和尼氏体减少;与模型组比较,玉蓝降糖胶囊低剂量组、玉蓝降糖胶囊中剂量组、玉蓝降糖胶囊高剂量组、二甲双胍+依帕司他组大鼠神经损伤得到了明显改善,DRG神经元染色增强,尼氏体增加。模型组大鼠坐骨神经病变程度HE评分高于正常组(P<0.05);玉蓝降糖胶囊高剂量组大鼠坐骨神经病变程度HE评分低于模型组(P<0.05)。免疫组化结果显示,模型组大鼠坐骨神经中KROX20和MBP表达水平低于正常组(P<0.01),IL-6蛋白表达水平高于正常组(P<0.05);玉蓝降糖胶囊中剂量组、玉蓝降糖胶囊高剂量组、二甲双胍+依帕司他组大鼠坐骨神经KROX20表达水平均高于模型组(P<0.01或P<0.05);玉蓝降糖胶囊低剂量组、玉蓝降糖胶囊中剂量组、玉蓝降糖胶囊高剂量组、二甲双胍+依帕司他组大鼠坐骨神经MBP表达水平均高于模型组(P<0.01或P<0.05);玉蓝降糖胶囊中剂量组、玉蓝降糖胶囊高剂量组、二甲双胍+依帕司他组大鼠坐骨神经IL-6表达水平均低于模型组(P<0.01)。结论:玉蓝降糖胶囊可降低糖尿病周围神经病变大鼠的机械痛阈值,提高坐骨神经传导速度,改善神经轴突的脱髓鞘现象及周围神经损伤。其作用机制可能为调节KROX20及MBP表达,保护受损神经髓鞘,缓解炎症反应,从而保护周围神经功能。

2型糖尿病合并脑梗死患者血清脂联素、血管内皮生长因子、高敏C反应蛋白及其颈动脉内膜粥样硬化关系的研究

目的观察2型糖尿病(T2DM)合并脑梗死患者中血清脂联素(APN)、血管内皮生长因子(VEGF)、高敏C反应蛋白(hsCRP)与颈动脉内膜粥样硬化的关系。方法选取住院的T2DM患者105例,糖尿病合并脑梗死(DACI)组的患者72例,单纯T2DM 33例和同期健康体检者正常对照(NC)组30例。分别检测各组颈动脉内膜中层厚度(IMT),APN,VEGF和hsCRP水平的变化。结果对NC组、T2DM组和DACI组研究对象进行了相关项目的测量,IMT(0.72±0.13)mm、(0.89±0.19)mm vs(1.13±0.37)mm,Crouse积分(1.22±1.06)分、(3.52±1.73)分vs(4.68±2.28)分,VEGF(112.96±11.27)ng/L、(143.83±15.86)ng/L vs(160.32±19.43)ng/L,hsCRP(1.52±0.98)mg/L、(6.58±2.83)mg/L vs(14.56±4.73)mg/L水平和颈动脉斑块检出率从NC组、T2DM组和DACI组依次增高(33.3%、63.6%vs 83.3%),而APN水平依次降低(8.76±3.07)μmol/L、(5.17±2.87)μmol/L vs(3.28±1.87)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。DACI组患者血清VEGF和hsCRP水平随着颈动脉斑块严重程度的增加而增加,而APN出现依次降低(P<0.01)。结论 VEGF、APN和hsCRP参与了DACI的颈动脉粥样硬化过程,并且与动脉粥样硬化斑块的不稳定性密切相关。

早期生长反应因子1在H_2O_2损伤的晶状体上皮细胞中的表达及其意义

目的探讨早期生长反应因子1(early growthresponse-1,Egr-1)在经H2O2损伤后的晶状体上皮细胞中的表达及其意义。方法用SP免疫组化法测定经H2O2处理后2h、8h、24h的晶状体上皮细胞中Egr-1的表达,用MAIS300图像分析系统测定其光密度值,采用t检验分析其在各时间点的表达水平。结果在H2O2作用后2h的晶状体上皮细胞中,Egr-1多为强阳性表达,平均光密度值为0.55±0.08;在H2O2作用后8h的晶状体上皮细胞中,Egr-1多为阳性表达,平均光密度值为0.40±0.09;两组比较,差异有非常显著的统计学意义(P<0.01)。在H2O2作用后24h的晶状体上皮细胞和对照组晶状体上皮细胞中,Egr-1未见表达,平均光密度值为0。结论Egr-1在H2O2损伤后的晶状体上皮细胞中早期表达,可能为氧化损伤引起的白内障的早期反应之一。

EGR-1和MMP-2在早期自然流产患者中的表达及临床意义

目的探讨早期生长反应因子(EGR-1)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在早期自然流产患者绒毛中的表达及临床意义。方法采用RT-PCR和Westernblot检测20例早期自然流产患者(流产组)和20例正常早孕人工流产(对照组)绒毛组织中EGR-1和MMP-2的表达情况。结果流产组中EGR-1、MMP-2 mRNA和蛋白水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EGR-1和MMP-2在早孕绒毛组织中表达异常可能参与早期妊娠失败的发生。

早期生长反应因子-1及乙酰肝素酶在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的:探讨早期生长反应因子(Egr)-1与乙酰肝素酶(heparanase)蛋白在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达情况及相关性。方法:采用免疫组织化学SABC法检测58例BTCC组织及10例正常膀胱黏膜组织的Egr-1蛋白、heparanase的表达情况,并分析两者表达情况与BTCC临床病理特征的关系,以及两者在BTCC中表达的相关性。结果:Egr-1蛋白和heparanase蛋白在10例正常膀胱黏膜组织中不表达,在BTCC组织中阳性表达率分别为70.69%(41/58)和58.62%(34/58)。Egr-1蛋白及heparanase蛋白阳性表达率在不同年龄、性别、肿瘤大小及数目的患者之间差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分级及临床分期患者Egr-1蛋白及heparanase蛋白表达率差别有统计学意义(P<0.01)。在BTCC中Egr-1蛋白与heparanase蛋白表达呈正相关(r=0.3875,P<0.01)。结论:Egr-1及heparanase蛋白的高表达在BTCC的发生、发展中起重要作用,与非肌层浸润型膀胱癌进展为肌层浸润型膀胱癌过程相关。

视神经损伤后脑衰反应调节蛋白-2表达及其磷酸化修饰的变化及意义

背景 脑衰反应调节蛋白-2（CRMP-2）具有促进中枢神经轴突生长的作用,但中枢神经损伤后在细胞周期素依赖蛋白激酶5（CDK5）诱导下CRMP-2会发生过度磷酸化修饰,从而导致生长锥塌陷,阻碍神经系统的修复.视神经作为一种特殊的中枢神经组织,其损伤后是否发生CRMP-2表达的变化和磷酸化修饰鲜见研究报道. 目的 探讨视神经钳夹伤小鼠模型视神经组织中CRMP-2表达及其磷酸化修饰水平的动态变化及意义.方法 选取8～9周龄健康BALB/c小鼠48只,雌雄不限.采用随机数字表法将小鼠随机分为假手术组和损伤后3、7、14 d组,每组12只.各损伤组小鼠右眼术中暴露视神经,用小号动脉夹于球后2 mm处夹持视神经10s,假手术组小鼠手术操作同各损伤组,但不钳夹视神经.分别于术后3、7、14 d获取小鼠视神经组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA的相对表达量;采用Western blot法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2蛋白、磷酸化CRMP-2（p-CRMP-2）及CDK5的表达变化,检测结果进行组间比较.结果 假手术组及损伤后3、7、14d组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA及蛋白相对表达量的总体比较差异均无统计学意义（CRMP-2 mRNA：F=2.971,P=0.097;CRMP4蛋白：F=1.202,P=0.370）.假手术组及损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2蛋白的相对表达量分别为0.001±0.000、0.064±0.003、0.136±0.005和0.346±0.012,CDK5蛋白的相对表达量分别为0.440±0.009、0.723±0.011、0.874±0.015和0.952±0.019,总体比较差异均有统计学意义（p-CRMP-2：F=445.600,P＜0.001;CDK5：F=186.600,P＜0.001）,其中损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2和CDK5蛋白的相对表达量均明显高于假手术组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 小鼠视神经钳夹伤后视神经组织中CRMP-2的表达无明显变化,但视神经组织中CDK5和p-CRMP-2蛋白表达均明显上调,且随着损伤后时间的延长上调更为明显.

早期肿瘤退缩和肿瘤反应深度对HER-2阴性晚期胃癌患者疗效与预后的影响

目的探讨早期肿瘤退缩(ETS)和肿瘤反应深度(DpR)对阿帕替尼联合多西他赛治疗人表皮生长因子受体2(HER-2)阴性晚期胃癌患者疗效与预后的影响。方法回顾性分析安徽省宿州市立医院2018年1月至2020年1月收治的82例HER-2阴性晚期胃癌患者的临床资料,依据患者的生存状况分为进展生存组(A组,31例)、无进展生存组(B组,35例)、死亡组(C组,16例),比较3组的人口学特征和临床资料。采用Logistic多因素回归分析HER-2阴性晚期胃癌患者疗效与预后的相关因素,采用Pearson相关性分析ETS和DpR与各危险因素的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估ETS和DpR对阿帕替尼联合多西他赛治疗HER-2阴性晚期胃癌患者疗效与预后的预测价值。结果3组患者人口学特征、临床资料比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组患者年龄≥60岁、饮酒史、家族史、TNMⅣ期、胃体部和胃幽门部肿瘤、肿瘤直径>3.5 cm、阳性淋巴结比率(LNR)<0.16%、合并并发症、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分为1分、疗效为病变进展、ETS<15%、DpR缩小<15%、化疗时长≤12周、中性粒细胞减少分级为G0(中性粒细胞<1.5×109/L)的占比均显著高于A组和B组,且A组上述指标显著高于B组(P<0.05);与A组和B组比较,C组患者术中出血量较多、术后血钾平均值较低、术后首次下床时间较长,且A组上述指标较B组差异显著(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,年龄≥60岁[OR=2.94,95%CI(2.492,4.095),P=0.031],TNMⅣ期[OR=3.673,95%CI(2.017,4.812),P=0.001],胃体部和胃幽门部肿瘤[OR=3.012,95%CI(2.684,4.348),P=0.018],肿瘤直径>3.5 cm[OR=2.301,95%CI(2.485,4.128),P=0.028],LNR<0.16%[OR=2.012,95%CI(2.783,3.573),P=0.023],ETS<15%[OR=1.793,95%CI(2.846,3.965),P=0.017],DpR缩小<15%[OR=1.782,95%CI(3.283,4.174),P=0.004],化疗时长≤12周[OR=2.942,95%CI(1.742,4.970),P=0.000]为HER-2阴性晚期胃癌患者疗效与预后不良的危险因素。Pearson相关性分析结果显示,ETS与年龄≥60岁、TNMⅣ期、胃体部和胃幽门部肿瘤、肿瘤直径>3.5 cm、LNR<0.16%呈负相关(r=-0.741,-0.324,-0.536,-0.974,-0.445,P<0.05),与DpR缩小<15%、化疗时长≤12周呈正相关(r=0.791,0.354,P<0.05);DpR缩小与年龄≥60岁、TNMⅣ期、胃体部和胃幽门部肿瘤、肿瘤直径>3.5 cm呈负相关(r=-0.837,-0.987,-0.044,-0.097,P<0.05);与LNR<0.16%、ETS<15%、化疗时长≤12周呈正相关(r=0.512,0.275,0.791,P<0.05)。预测阿帕替尼联合多西他赛治疗HER-2阴性晚期胃癌患者疗效与预后中,ETS的灵敏度、特异性和ROC曲线下与坐标轴围成的面积(AUC)分别为90.74%,87.03%,0.83,DpR分别为96.29%,94.44%,0.87,ETS+DpR分别为98.14%,96.29%,0.93;ETS+DpR的灵敏度、特异性和AUC均优于单用ETS或DpR。结论ETS和DpR均为阿帕替尼联合多西他赛治疗HER-2阴性晚期胃癌患者疗效与预后的危险因素,且ETS和DpR水平与各危险因素均相关,二者单独及联合预测HER-2阴性晚期胃癌患者的疗效与预后均有较高价值。

血清α_1-MG、β_2-MG、Hs-CRP和尿NAG联合检测对早期肾损害诊断的临床应用研究

目的观察血清α1微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)和尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(NAG)联合检测在早期肾损伤的临床诊断价值。方法对100例健康体检者、100例病理上无明显肾小管间质病变但可能有早期肾损伤的糖尿病、高血压病患者分别进行血清尿素(Urea)、肌酐(Cr)、α1-MG、β2-MG、Hs-CRP和尿NAG的检测,并对结果进行统计分析。结果糖尿病、高血压病患者的血清α1-MG、β2-MG、Hs-CRP和尿NAG均有不同程度的升高,四项之间有较好的相关性,且与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论尿NAG可反应肾小管的重吸收功能及其损伤程度,而血清α1-MG、β2-MG则可作为临床上肾小球滤过膜,尤其是电荷屏障受损的标志,Hs-CRP在肾损伤早期较Cr、Urea升高明显。四项联合测定能够为早期肾损伤的预防及诊断提供更好的实验室依据。

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脑血肿周围组织和海马bax及bcl-2基因表达的调节

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脑出血后出血灶周围脑组织和出血侧海马bax、bcl-2基因表达的影响,探讨神经营养因子对神经细胞调亡的调控。方法:实验于2006-01/10在广西医科大学医学科学实验中心完成。①取成年清洁级Wistar大鼠72只,雌雄各半,体质量250g左右。②采用脑内囊注射胶原酶建立大鼠脑出血模型,动物于苏醒后按Bederson法进行神经病学评分,评分>3分后入选本实验,入选72只大鼠随机抽签法分为3组,每组24只。碱性成纤维细胞生长因子组按8μg/kg剂量肌肉注射,1次/d;生理盐水组肌肉注射等剂量的生理盐水,1次/d;模型组不作任何干预。③每组分别于干预后1,3,7d随机抽取8只大鼠,麻醉状态下取出血灶周围脑组织和出血侧海马,采用半定量反转录-聚合酶链反应检测调亡调控基因bax mRNA,bcl-2mRNA的表达。结果:在建立脑出血模型中共5只大鼠死亡,随后对死亡动物进行解剖,发现脑内血肿量过大,致脑疝形成而导致死亡,后随机补充动物。72只大鼠进入结果分析。①血肿周围脑组织bax mRNA表达:干预后3d,7d,碱性成纤维细胞生长因子组血肿周围脑组织bax mRNA表达比生理盐水组明显减少(3d:0.54±0.19,0.76±0.23,P<0.05;7d:0.45±0.19,0.71±0.16,P<0.01)。②血肿周围脑组织bcl-2mRNA表达:干预后3d,7d,碱性成纤维细胞生长因子组的血肿周围脑组织bcl-2mRNA表达比生理盐水组明显增高(3d:0.68±0.25,0.39±0.19,P<0.05;7d:0.80±0.21,0.48±0.18,P<0.01)。③出血侧海马bax mRNA表达:干预后3d和7d,碱性成纤维细胞生长因子组的出血侧海马bax mRNA表达比生理盐水组均明显减少(3d:0.54±0.18,0.70±0.11;7d:0.43±0.24,0.69±0.18,P均<0.05)。④出血侧海马bcl-2mRNA表达:干预后3d和7d,碱性成纤维细胞生长因子组的出血侧海马bcl-2mRNA表达比生理盐水组均明显增多(3d:0.66±0.11,0.50±0.15;7d:0.72±0.12,0.52±0.22,P均<0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子能调节凋亡相关基因,提高大鼠脑出血后大脑脑组织和海马bcl-2mRNA的表达,降低bax mRNA的表达。

MicroRNA-20a对胃癌细胞生长与迁移的影响及其机制

目的:探讨microRNA-20a(miR-20a)对胃癌细胞的生长和迁移的影响及其相关分子机制。方法:通过qRT-PCR方法检测正常胃黏膜上皮细胞(gastric epithelial cell 1,GES-1)和胃癌细胞系MKN45,SGC7901和NUGC-3中miR-20a的相对表达水平;选取SGC7901细胞为代表,MTT法和克隆形成能力实验评估miR-20a mimic和inhibitor对细胞生长能力的影响;Transwell实验观察miR-20a的mimic和inhibitor对细胞迁移能力的影响;qRT-PCR检测miR-20a靶基因早期生长反应蛋白2(early growth reactive protein 2,EGR2)在mRNA水平的表达。结果:MiR-20a在胃癌细胞中的表达量较GES-1细胞显著增加;MTT实验、克隆形成实验和Transwell实验显示miR-20a mimic促进SGC7901细胞的生长和迁移,而miR-20a inhibitor抑制生长和迁移。MiR-20a mimic抑制EGR2 mRNA表达,而miR-20a inhibitor促进EGR2 mRNA表达。结论:MiR-20a可促进胃癌细胞生长和迁移能力,其分子机制可能与下调EGR2 mRNA的表达相关。

甲状腺乳头状癌患者血清EGR1/2 mRNA水平检测在临床早期实验诊断中的价值研究

目的 探讨血清早期生长反应因子1(early growth response factor 1,EGR1)mRNA,早期生长反应因子2(early growth response factor 2,EGR2)mRNA表达水平在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者早期诊断中的价值。方法 选择2019年1月~2022年2月在苏州市立医院确诊治疗的78例PTC患者(PTC组)和46例甲状腺良性肿瘤患者(良性肿瘤组)为研究对象,另以同期到该院体检的38例健康者为对照组,收集整理所有PCT患者的临床基本资料。采用实时荧光定量PCR法检测各组血清EGR1 mRNA和EGR2 mRNA表达水平,比较PTC患者、良性肿瘤患者和对照组血清EGR1 mRNA和EGR2 mRNA表达水平差异,分析PTC患者血清EGR1 mRNA和EGR2 mRNA水平与患者临床病理特征的关系,采用Pearson法分析PTC患者血清EGR1 mRNA和EGR2 mRNA表达相关性,采用ROC曲线分析血清EGR1 mRNA和EGR2 mRNA水平对PTC患者早期诊断的价值。结果 对照组、良性肿瘤组和PTC组血清EGR1 mRNA(1.03±0.14,0.81±0.10,0.74±0.08),EGR2 mRNA(0.98±0.12,0.76±0.09,0.67±0.06)水平依次显著降低,差异具有统计学意义(F=103.402,166.508,均P<0.001)。肿瘤分期为Ⅲ~Ⅳ(0.71±0.13)、有淋巴结转移(0.69±0.12)、浸润程度超过包膜(0.67±0.17)的PTC患者血清EGR1 mRNA表达水平低于肿瘤分期为Ⅰ~Ⅱ、无淋巴结转移、浸润程度未浸润包膜的患者(0.78±0.15,0.77±0.16,0.79±0.18),差异有统计学意义(t=2.206,2.415,2.945,均P<0.05);肿瘤分期为Ⅲ~Ⅳ(0.63±0.08)、有淋巴结转移(0.63±0.11)、浸润程度超过包膜(0.58±0.12)的PTC患者血清EGR2 mRNA表达水平低于肿瘤分期为Ⅰ~Ⅱ、无淋巴结转移、浸润程度未浸润包膜的患者(0.71±0.12,0.70±0.14,0.73±0.16),差异有统计学意义(t=3.481,2.382,4.455,均P<0.05);Pearson相关性分析显示,PTC患者血清中EGR1 mRNA与EGR2 mRNA表达呈正相关(r=0.216,P<0.05);血清EGR1 mRNA和EGR2 mRNA水平联合检测早期诊断PTC的ROC曲线下面积为0.829,敏感度、特异度分别为85.90%,73.91%。结论 PTC患者血清EGR1 mRNA,EGR2 mRNA水平下调,其水平变化与PTC病情发展密切相关,二者联合检测对PTC早期诊断具有重要意义。

EZH2调控卵巢癌细胞生物学行为的机制研究

目的探讨组蛋白甲基化转移酶Zeste同源物增强子2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)调控卵巢癌(ovarian cancer,OC)生物学行为的机制,为寻找OC治疗的新靶点提供实验支持。方法采用EZH2小干扰RNA(small interfered RNA,siRNA)在不同OC细胞系中敲减EZH2,并使用qRT-PCR、Western blot分析干扰siEZH2 mRNA和蛋白质的效率。进一步采用CCK-8法、细胞划痕试验、Transwell试验以及流式细胞术检测干扰EZH2后对OC细胞增殖、迁移及侵袭能力和凋亡水平等生物学行为的影响。采用Western blot分析干扰EZH2后,早期生长反应因子1(early growth response 1,EGR1)和H3K27me3蛋白的表达水平,并分析EZH2调控OC细胞生物学行为的机制。结果转染siEZH2后,OC细胞系中EZH2 mRNA的表达水平显著低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且A2780细胞中EZH2蛋白的表达水平亦明显下调(P<0.05)。Western blot检测结果表明,EGR1以及H3K27me3蛋白水平出现了不同程度地降低。转染siEZH2-1后,转染组A2780细胞的增殖能力显著低于阴性对照组(P<0.05);细胞划痕试验和Transwell试验结果显示,转染siEZH2-1后细胞的迁移和侵袭能力显著减弱(P<0.05);流式细胞术结果显示,转染siEZH2-1后细胞凋亡水平显著增强(P<0.05)。结论EZH2在OC细胞系中高表达,并促进A2780细胞的增殖、迁移、侵袭和抗凋亡。但EZH2并非通过其H3K27me3转移酶功能调控EGR1的表达而调控影响OC的生物学行为。

阿胶治疗β-地中海贫血孕妇疗效及对EGR2表达的影响

【目的】观察阿胶治疗β-地中海贫血(简称β-地贫)患者妊娠期贫血的疗效及对早期生长反应因子2(EGR2)表达的影响。【方法】转录组测序(RNA-seq):将20例β-地贫孕妇按3∶1比例随机分配到治疗组15例(其中脱落1例,最终纳入14例)和对照组5例,治疗组口服阿胶粉,对照组不予干预,疗程为4周。采集2组孕妇治疗前后的外周血进行RNA-seq分析,确定候选靶标。随后开展前瞻性临床随机对照试验(RCT):招募41例β-地贫孕妇,按3∶2比例随机分配到治疗组24例和对照组17例,治疗组口服阿胶粉,对照组口服阿胶粉模拟剂,疗程为4周。检测2组孕妇治疗前后的血液学参数,并采用实时聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹(Western Blotting)法检测候选靶标的mRNA及蛋白表达量。【结果】(1)RNA-seq分析:基因型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的治疗组治疗后EGR2表达显著上调(log2 FC=1.915;校正P值=9.84E-03),确定EGR2为候选靶标。(2)RCT试验:(1)治疗后,2组β-地贫孕妇平均血红蛋白(Hb)浓度变化无统计学差异(P>0.05),但基因类型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的治疗组患者Hb浓度平均升高(6.54±4.74)g/L,较其他基因类型的β-地贫孕妇有显著性升高(P<0.05)。(2)基因类型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的治疗组患者治疗后外周血EGR2 mRNA及蛋白表达量均显著升高(P<0.05);且2组β-地贫孕妇治疗前后Hb浓度差值与EGR2 mRNA及蛋白表达量差值均存在显著正相关关系,相关系数分别为0.701、0.683(P<0.001)。【结论】基因类型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的地贫孕妇口服阿胶治疗效果最佳,其疗效可能与上调EGR2表达,激活RNA聚合酶Ⅱ启动子,促进核酸结合等发挥珠蛋白基因转录调控作用有关,从而最终有效改善贫血。

早期生长反应基因2在肝癌组织的表达及其对细胞增殖能力的影响

目的 观察早期生长反应基因2（EGR2）在肝癌组织中的表达,探讨其对肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 分析肿瘤基因组图谱（TCGA）数据库中50对肝癌组织和癌旁非癌组织中EGR2的mRNA表达水平;用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测8个患者的肝癌组织及配对癌旁非癌组织中EGR2的表达.通过构建重组质粒pQCXIP-EGR2并转染HepG2肝癌细胞,构建稳定高表达EGR2的肝癌细胞株,并采用噻唑蓝（MTT）法和平板克隆形成实验观察稳定高表达EGR2对肝癌细胞增殖能力的影响.同时采用Western blot法和FQ-PCR法检测稳定高表达EGR2对细胞周期相关蛋白细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达的影响.结果 TCGA数据库分析结果表明EGR2在肝癌组织中的表达量（89.95±16.04）明显低于癌旁非癌组织（440.59±60.60,P＜0.05）.FQ-PCR结果也显示,与癌旁非癌组织比较,来自同一患者的肝癌组织中EGR2基因的mRNA表达水平明显降低（P＜0.05）.MTT实验结果表明显示稳定高表达EGR2的细胞的生长速度明显降低（P＜0.05）.平板克隆形成实验结果显示,与对照细胞比较（177.00±8.18）,高表达EGR2的肝癌细胞的克隆形成数量（86.00±5.51）显著减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.Westem blot法和FQ-PCR实验结果表明,稳定高表达EGR2可降低肝癌细胞中Cyclin D1的表达.结论 EGR2在肝癌中表达下调,过表达EGR2可通过调控Cyclin D1的表达进而抑制肝癌细胞的增殖.

2型糖尿病视网膜病变患者血清ZAG、Egr-1、CMKLR1水平与糖脂代谢和胰岛素抵抗的关系及其影响因素

目的分析2型糖尿病视网膜病变(DR)患者血清锌a2糖蛋白(ZAG)、早期生长反应基因1(Egr-1)、趋化因子样受体1(CMKLR1)水平与糖脂代谢和胰岛素抵抗(IR)的关系及其影响因素。方法选取2017年6月至2020年3月期间汉中市人民医院眼科收治的2型糖尿病患者227例作为研究对象,其中DR患者93例(DR组),非DR患者134例(n-DR组),另取同期于我院接受体检的健康志愿者70例为对照组。比较三组受检者的基线资料、血清学指标,采用Pearson相关分析血清ZAG、Egr-1、CMKLR1水平与糖脂代谢和IR的关系,多因素Logistic回归分析发生DR的影响因素。结果三组受检者的收缩压(SBP)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清ZAG、Egr-1、CMKLR1水平比较差异均具有统计学意义(P<0.05),其中n-DR组、DR组患者的SBP、FBG、HbA1c、HOMA-IR、血清Egr-1、CMKLR1水平明显高于对照组,DR组患者的SBP明显高于n-DR组,n-DR组、DR组患者的血清ZAG水平明显低于对照组,且DR组血清ZAG水平明显低于n-DR组,差异均具有统计学意义(P<0.05);DR组病程为(7.85±1.97)年,明显长于n-DR组的(3.12±0.86)年,差异具有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析结果显示,血清ZAG与FBG、HbA1c、HOMA-IR呈负相关(P<0.05);血清Egr-1与FBG、HbA1c、HOMA-IR呈正相关(P<0.05),血清CMKLR1与FBG、HbA1c、HOMA-IR、FINS呈正相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,病程、HbA1c、ZAG、Egr-1、CMKLR1是DR的独立影响因素(P<0.05)。结论2型糖尿病DR患者血清Egr-1、CMKLR1水平升高,血清ZAG水平降低,其与糖代谢紊乱和IR具有显著相关性,是DR发生发展的独立影响因素。

转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的表达

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGFmRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变。结果:HK2细胞有基础量的CTGFmRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24h后,CTGFmRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性。1ng/mlTGF-β1刺激时,CTGFmRNA表达量开始显著增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降,CTGFmRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍(P<0.05)。CTGFmRNA表达量呈时间依赖效应。TGF-β1(5ng/ml)干预30min后,CTGFmRNA表达量开始呈现增加趋势,为对照组的1.48倍(P>0.05),2h后出现显著差异,为对照组的2.14倍(P<0.05);CTGFmRNA表达量在24h达到高峰,持续至36h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍(P<0.005);0.5ng/mlTGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降。在TGF-β1(5ng/ml)干预下,HK2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量αSMA表达。大部分细胞转分化的时间(72h)明显晚于CTGFmRNA?

2型糖尿病患者血清miR-140-3p和EGR1水平与肠道菌群的关系研究

目的 探究2型糖尿病(T2DM)患者血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)和早期生长反应因子1(EGR1)水平与肠道菌群的关系。方法 回顾性选取2021年3月至2022年12月在青岛大学附属青岛市中心医院就诊治疗的125例T2DM患者作为T2DM组,另选取同期体检健康者100名作为对照组。采用实时荧光定量PCR测定血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平,比较对照组与T2DM组的一般资料以及血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平;采用Pearson分析T2DM患者血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平与肠道菌水平的相关性。结果 与对照组比较,T2DM组的体重指数、腰围、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、甘油三酯、总胆固醇均显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM组血清miR-140-3p较对照组均显著下调,血清EGR1 mRNA水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,T2DM组乳酸杆菌、拟杆菌水平均显著减少,T2DM组双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,T2DM患者血清miR-140-3p水平与乳酸杆菌、拟杆菌水平均呈正相关(P<0.05),与双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均呈负相关(P<0.05);T2DM患者血清EGR1 mRNA水平与乳酸杆菌、拟杆菌水平均呈负相关(P<0.05),与双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均呈正相关(P<0.05)。结论 T2DM患者血清miR-140-3p表达水平显著下调,EGR1表达水平显著上调,且与患者肠道菌水平具有一定相关性。

复方茵丹汤对HepG2细胞NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因沉默后MRP2和RXRα表达的影响

目的:观察HepG2细胞中核因子κB(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、早期生长反应因子(Egr-1)基因沉默后复方茵丹汤对多药耐药相关蛋白2(MRP2)和人维甲酸X受体α(RXRα)表达的影响。方法:运用RT-PCR和Western blot检测复方茵丹汤对HepG2细胞中NF-κB、ICAM-1、Egr-1沉默与否,对NF-κB、ICAM-1、Egr-1、MRP2和RXRα基因和蛋白水平的影响。结果:与空白对照组比较,复方茵丹汤组和UDCA组NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白水平明显降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα基因和蛋白水平明显升高(P<0.01,P<0.05),复方茵丹汤对HepG2细胞NF-κB、ICAM-1、Egr-1、MRP2和RXRα表达的诱导作用明显强于UDCA组(P<0.01,P<0.05)。对各组进行NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因沉默后,与正常培养的HepG2细胞比较,转染siRNANF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1的细胞,其NF-κB、ICAM-1、Egr-1的基因和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01)。与siRNA-NF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1转染组比较,siRNA-NF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1转染+复方茵丹汤组的NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论:复方茵丹汤在体外可通过下调NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白的表达来上调MRP2和RXRα基因和蛋白的水平。