早期反应生长因子1特异的脱氧核酶对大鼠动脉损伤后血管内皮功能的保护及超微结构的影响

目的探讨早期反应生长因子1特异的脱氧核酶对大鼠实验性颈总动脉损伤后内皮功能及超微结构的影响。方法Wistar大鼠96只,随机分为假手术组、对照组1(MgCl2)、对照组2(FuGENE6)和ED5治疗组,每组24只。行左颈总动脉内膜剥脱术后,ED5治疗组经球囊导管将ED5 500μg、注入损伤的血管节段内,作用20 min。对照组1注入200μL的1 mmol/L MgCl2液,对照组2注入含FuGENE6 30μL的1 mmol/L MgCl2液200μL。分别于第3、7、14和第21天各处死动物6只,处死前心脏取血检测一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素,同时光镜及透射电镜观察血管形态学变化。结果ED5治疗组一氧化氮和一氧化氮合酶含量均较两对照组增高,第14天最明显,此时一氧化氮与两对照组相比分别为57.1±1.9μmol/L比38.7±1.9μmol/L和57.1±1.9μmol/L比38.3±1.9μmol/L,差异有显著性统计学意义(P<0.05);一氧化氮合酶分别为11.1±0.4μmol/L比8.1±0.4μmol/L和11.1±0.4μmol/L比8.0±0.4μmol/L,差异有显著性统计学意义(P<0.05)。而内皮素浓度较两对照组有所降低,以第14天最显著,分别为111.2±7.2 pg/L比136.6±7.2 pg/L和111.2±7.2 pg/L比135.5±7.2 pg/L,差异有显著性统计学意义(P<0.05)。光镜观察发现ED5治疗组新生内膜厚度较两对照组明显减轻,以第21天最明显(64.0±4.2μm比81.1±4.9μm和64.0±4.2μm比80.0±3.9μm,P<0.01)。透射电镜观察发现对照组血管新生内膜的平滑肌细胞呈“合成型”改变,而治疗组新生内膜的血管平滑肌细胞呈“收缩型”改变。结论早期反应生长因1特异的脱氧核酶可改善动脉球囊损伤后的血管内皮功能,抑制血管平滑肌细胞的表型改变,从而减轻内膜增生程度。

重组人粒细胞集落刺激因子对急性缺血再灌注脑损伤大鼠脑组织Egr-1、Survivin蛋白表达及血管再生的影响

目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对急性缺血再灌注大鼠脑缺血半暗带区Survivin、Egr-1表达和微血管再生的影响。方法:72只大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组24只。模型组和治疗组大鼠制备大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注局灶性脑缺血大鼠模型。治疗组大鼠术后2h后自腹部皮下注射rhG-CSF50μg/(kg·d),单次注射7.5mL,连续用药5d,模型组和假手术组给予等体积生理盐水。各组大鼠均于实验后7、14和21d处死8只。免疫组化SP法检测Egr-1和Survivin蛋白的表达,并通过CD31+细胞的标记进行微血管计数。结果:实验后7、14和21d,各组大鼠脑组织缺血半暗带Egr-1和Survivin蛋白表达的比较,差异有统计学意义(F=194.983、497.289、122.182、162.468、322.983和126.100,P<0.001)。实验后14d,2种蛋白的表达达到峰值,之后逐渐下降。实验后14d,治疗组Egr-1和Survivin蛋白的表达均高于模型组。实验后14d微血管计数达到高峰,治疗组高于模型组(P<0.05)。结论:rhG-CSF可能通过上调Egr-1和Survivin的表达促进血管形成。

组胺对星形胶质细胞Egr-1表达的调节作用

目的:探讨组胺对星形胶质细胞早期反应生长因子-1(Egr-1)表达是否具有调节作用。方法:将野生型(WT)和组氨酸脱羧酶敲除(HDC-KO)小鼠及组胺处理的HDC-KO小鼠取脑,并提取皮层组织总RNA。将原代培养的大鼠皮层星形胶质细胞分别给予不同浓度的组胺(10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)或10^(-4)mol/L)处理15、30、60、120或240 min。组胺H_1、H_2受体拮抗剂分别于组胺给药前15 min加入。组胺处理完毕后,提取细胞总RNA或蛋白。利用real-time PCR和Western blot测定Egr-1的表达。结果:与WT小鼠相比,HDC-KO小鼠大脑皮层Egr-1的mRNA表达量显著降低,而外源性给予组胺则能促进其Egr-1的mRNA表达。在培养的星形胶质细胞上,组胺可促进Egr-1的mRNA表达,其中10-5mol/L的组胺作用最强,而组胺(10^(-5)mol/L)处理30 min时Egr-1的mRNA表达量达到峰值,相应的Egr-1蛋白表达于60 min时显著增高,该作用可被组胺H_1受体拮抗剂而非H_2受体拮抗剂显著抑制。结论:组胺对大脑皮层组织及培养的星形胶质细胞Egr-1表达具有上调作用,该作用与激动组胺H_1受体有关。

Involvement of MAPK/ERK kinase-ERK pathway in exogenous bFGF-induced Egr-1 binding activity enhancement in anoxia-reoxygenation injured astrocytes

Objective Intravenous administration of basic fibroblast growth factor （bFGF） is effective to reduce the volume of cerebral infract due to ischemia. This study was designed to investigate the molecular mechanism, especially the signal transduction pathways, involved in this protective role of bFGF. Methods Anoxia-reoxygenation treated atrocytes were used to study the role of mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase kinase （MAPK/ERK kinase, MEK）-ERK signaling pathway after exogenous bFGF administration by Western blot. Electrophoretic mobile shift assay was used to detect the binding activity of early growth response factor-1 （Egr-1）, an important transcription factor for endogenous bFGF. Results bFGF could protect some signal transduction proteins from the oxygen-derived free radicals induced degradation. ERK1/2 was activated and involved in Egr-1 binding activity enhancement induced by exogenous bFGF. Conclusion MEK-ERK MAPK cascade may be an important signal transduction pathway contributed to bFGF induced enhancement of Egr-1 binding activity in anoxia-reoxygenation injured astrocytes.

EGR-1在肝损伤中的作用

肝损伤是多因素引起的复杂病理生理变化,早期生长转录因子-1(EGR-1)在肝损伤中的利弊作用目前仍存在争议.相关研究证实在半乳糖胺/脂多糖诱导的急性肝损伤和异硫氰酸酯(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积症小鼠模型中以及机体非肝脏系统的损伤中,EGR-1能够不断加剧肝细胞炎症,促进凋亡.然而,另有一些研究发现EGR-1可以通过调节TNF-α、iNOS、COX-2、NF-κBp65等因子,在CCl4所致肝损伤中起到保护作用.本文就EGR-1在肝损伤中调节的双向作用及其机制进行简要概述.

Egr-1通过上调NDRG1诱导骨髓间充质干细胞成骨分化

目的探究早期生长因子1(Egr-1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化的影响。方法采集成年男性骨髓组织,分离培养原代BMSCs并在显微镜下观察其形态,流式细胞术鉴定BMSCs表面标志物;pcDNA3.1/Egr-1转染BMSCs,MTT检测BMSCs的增殖,茜素红钙染色试剂盒检测细胞基质内钙结节的形成,ALP活性测定试剂盒检测细胞内ALP的活性,实时定量qPCR和Western blot分别检测细胞内Egr-1、Runx2、NDRG1mRNA和蛋白表达;Egr-1siRNA转染BMSCs,检测细胞内ALP活性、Egr-1、Runx2和NDRG1mRNA及蛋白表达。结果离体培养的BMSCs高表达CD90和CD29,而CD34和CD45呈阴性表达;pcDNA3.1/Egr-1转染对BMSCs增殖无明显作用,却能促进细胞基质内钙结节的形成,上调ALP活性和Egr-1、Runx2、NDRG1的表达,而Egr-1siRNA则作用相反。结论 Egr-1通过上调NDRG1诱导BMSCs的成骨分化。

中药治疗胆汁淤积性肝病作用机制的研究进展

胆汁淤积性肝病具有临床发病率高、病因复杂、发病机制不明确的特点。目前,有关胆汁淤积性肝病的有效治疗药物相对匮乏,中医药治疗胆汁淤积肝损伤(CLI)疗效及其作用机制研究备受关注。常用中药包括清热利湿类、活血化瘀类或凉血化痰类单味药及相关复方,其改善CLI的作用机制研究多聚焦在法尼醇X受体(FXR)、组成型雄甾烷受体(CAR)、早期生长因子-1(EGR-1)、核因子E2相关因子(Nrf-2)等通路。结合当前国内外研究现状,系统地阐述常见中药单味药和复方治疗CLI的药理作用机制,旨在为中药治疗CLI的临床应用提供依据,为中药创新药开发及其深入研究提供参考。