早期生长反应因子1过表达促进肾小管上皮细胞转分化

目的:探讨早期生长反应因子1(Egr-1)在肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法:(1)体外实验:用pcDNA3.1,pcDNA3.1/Egr-1转染肾小管上皮细胞株HK-2,qRT-PCR法、Western免疫印迹法检测Egr-1及转分化标志物E-cadherin、成纤维细胞特异性蛋白(Fsp-1)mRNA及蛋白水平的表达变化;用pcDNA3.1/Egr-1和siEgr-1或psilencer3.1共转染HK-2,Western免疫印迹法检测Egr-1、E-cadherin、Fsp-1蛋白水平的表达变化。(2)体内实验:建立大鼠慢性肾纤维化模型——5/6肾脏次全切除,造模成功后免疫组化法检测大鼠肾组织中Egr-1、E-cadherin、Fsp-1的表达。结果:(1)与转染空载体相比,HK-2细胞过表达Egr-1后,上皮细胞标志性蛋白E-cad-herin表达减弱,成纤维细胞标志性蛋白Fsp-1表达增强(P<0.05),提示出现肾小管上皮细胞转分化表型。而用小干扰RNA干扰掉Egr-1后,与空载体组及亲本细胞组相比,转分化表型得到逆转。(2)体内实验证实,与假手术组(SOR)相比,5/6肾脏次全切除肾组织中,转分化标志蛋白E-cadherin表达减弱、Fsp-1表达增加,同时肾小管上皮细胞Egr-1的表达明显升高,提示肾小管上皮细胞发生转分化,且其与Egr-1过表达密切相关。结论:Egr-1的过表达促进了肾小管上皮细胞转分化,参与肾间质纤维化的发生发展。