用早熟凝集染色体环法研究中子诱发染色体畸变的剂量效应关系

目的:建立人外周血淋巴细胞早熟凝集染色体环(prematurely condensed chromosomes ring,PCC-R)与中子辐射剂量之间的效应关系曲线。方法:选择健康成年男性2人,取静脉血(肝素抗凝),用中子反应堆分别照射0、1.0、2.5、5.0、7.5和10.0 Gy(剂量率为0.2 Gy/min),照射后的血样在37℃恒温培养箱内静置3 h以进行细胞修复,然后将血样分别接种到RPMI 1640培养基中培养48 h。终止培养前1 h加入500 nmol/L蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸,观察辐射诱发的人外周血淋巴细胞早熟凝集染色体环与照射剂量之间的效应关系。结果:500 nmol/L的冈田酸诱导的人外周血淋巴细胞早熟凝集染色体中早熟凝集染色体环随着照射剂量的增加而增加,并呈直线相关(y=0.097 6x+0.000 3,R^2=0.980 5)。结论:早熟凝集染色体环随着照射剂量的增加而增加,它可作为生物剂量指示计用于受到中子照射后的剂量估算,特别是在受到大剂量照射的情况。

提前获取早熟凝集染色体环快速估算受照剂量的可行性研究

目的:缩短培养时间,拟合γ射线诱发离体人外周血淋巴细胞早熟凝集染色体环(premature condensation chromosomerings,PCC-R)的剂量-效应曲线,探讨快速估算生物剂量的可行性。方法:^(60)Coγ射线照射离体人外周血,剂量为0、1、3、6、10、15、20 Gy,照后分别培养44和48 h,收获前1 h加入冈田酸,分别计数PCC-R频率,拟合受照44与48 h的剂量-效应曲线并进行比较。结果:培养44 h较48 h获得的分析细胞数略少,PCC-R率略低于48 h结果(各个剂量点间的差异均无统计学意义)。外周血淋巴细胞PCC-R率随照射剂量的增加而增加,0～15 Gy剂量范围内二者之间满足直线方程Y=-0.015 2+0.062 5D(R^2=0.983 9)。结论:缩短培养时间至44 h,PCC-R仍然可以用于15 Gy以内的辐射事故的剂量估算。

早熟凝集染色体环法在山西太原事故受照射者生物剂量估算中的应用

目的:探讨药物诱导的早熟凝集染色体环(prematurely condensed chromosomes ring,PCC-R)分析方法在辐射事故受照射者生物剂量估算中的应用。方法:山西太原辐射事故发生后16h收集5名受照射者(1、2、3、4和5号)的外周血,及1号受照者照射后23h的骨髓细胞和24h的外周血,采用冈田酸(Okadaic acid,OA)诱导的PCC方法计数PCC细胞中的PCC-R,以新建立的PCC-R剂量-效应曲线(1～20Gy)估算生物剂量。照射后31d对4名受照射者(2～5号)的PCC-R频率进行了分析。并采用常规染色体双加环(dic+r)、胞质分裂阻滞微核(cytokinesis-block micronuclei,CBMN)分析及物理方法对PCC-R法的结果进行验证。结果:最严重受照射者1号的外周血培养仅获得极少量的PCC细胞,而骨髓培养获得了一定数量的PCC细胞。以骨髓细胞PCC-R频率对1号及以外周血PCC-R频率对2～5号进行剂量估算的结果分别为12.4、3.6、3.2、1.7和1.5Gy。2～5号受照者照后31d PCC-R频率与照后16h相比下降幅度分别为51%、69%、69%及44%。结果与用dic+r、CBMN分析及物理方法估算的剂量接近,与临床表现基本相符。结论:经实际应用证明,药物诱导的PCC-R法简便、快速,新建立的PCC-R剂量-效应曲线准确、可靠。该法更适用于较高剂量照射的生物剂量估算,且应在照后尽早取血,最好在1个月之内。

^60Coγ线超大剂量照射人离体血早熟凝集染色体环的剂量-效应曲线

目的建立超大剂量了线离体照射后人血淋巴细胞早熟凝集染色体环（PCC-R）的剂量一效应曲线。方法外周静脉血样采自3名健康男性，经^60Coγ线（剂量率2．35Gy／min）照射0、1、3、5、8、10、13、16、20、26和30Gy。于37℃恒温箱培养48h，收获前1h加入冈田酸以诱导产生早熟凝集染色体（PCC），计数PCC细胞中的PCC-R频率，拟合剂量．效应曲线。结果PCC指数随照射剂量增加而逐渐减少；每细胞PCC—R频率随照射剂量增加而增加直N20Gy，〉20Gy后趋于饱和。对所获数据进行回归分析，所拟合的曲线符合线性模型（上限剂量到20Gy）：Y=-0．020＋0．052D（γ为每细胞PCC-R频率，D为剂量，Gy）。结论本研究用药物诱导PCC—R法所建立的剂量-效应曲线可估计的上限剂量达20Gy，它的可靠性和实用性还有待于在今后的辐射事故中实际应用加以验证。