布氏艾美耳球虫早熟弱毒虫株的选育

运用Ｊｅｆｅｒｓ（１９７５）选育法进行了Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟弱毒虫株的选育，经过连续七代的选育，获得了Ｅｉｍｅｒｉａｂｒｕｎｅｔｉ早熟弱毒虫株，该虫株的潜隐期为１０８ｈ，比Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ亲本毒株提前了１２ｈ以上。免疫试验和致病性试验的结果表明Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟虫株具有免疫原性，对攻毒具有完全的保护作用。Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟虫株的致病力相对其亲本株大大降低。上述结果表明，Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟弱毒虫株可用于鸡球虫弱毒疫苗的研制。

L-NMMA对鸡球虫早熟弱毒疫苗免疫鸡增重的影响

为了研究鸡球虫早熟弱毒疫苗对免疫鸡增重的影响及一氧化氮合成酶抑制剂(L-NMMA)对免疫鸡增重和免疫效果的影响。取40只SPF雏鸡,分为空白对照组(C1、C2)和单剂量重复接种组(T1、T2),T1、T2组按推荐免疫剂量单剂量重复接种鸡球虫早熟弱毒疫苗,C1和T1、C2和T2分别于二次接种后第7、14天逐只空腹称重,剖检记录十二指肠、空肠和盲肠病变记分,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和盲肠进行病理组织学检查。另选取40只SPF雏鸡,分为空白对照组C20、攻毒对照组T21、免疫对照组T22和免疫加药组T23,T22和T23按推荐免疫剂量两次免疫鸡球虫早熟弱毒疫苗,T23在免疫的同时腹腔注射L-NMMA,二免后第14天T21、T22和T23均接种鸡球虫混合强毒,测定SPF雏鸡平均增重、相对增重、肠道(十二指肠、空肠和盲肠)病变记分、病变记分减少率(RLS)、血便记分、死亡率及卵囊产量等指标。结果显示,接种组的平均增重显著低于未接种组(P<0.05),接种组的十二指肠、空肠和盲肠有轻微病变且黏膜上皮细胞均有不同程度损伤和脱落;免疫加L-NMMA组一免、二免后及攻毒后试验鸡的平均增重均极显著高于免疫攻毒对照组(P<0.01),且与空白对照组鸡的平均增重无显著差异(P>0.05),且免疫对照组和免疫加药组肠道病变记分和卵囊产量无显著差异(P>0.05)。说明鸡球虫早熟弱毒疫苗对雏鸡肠道有轻微损伤,且对鸡增重有一定影响;L-NMMA可降低鸡球虫早熟弱毒疫苗对试验鸡增重的影响,且不影响疫苗的免疫效果。

鸡球虫早熟弱毒活苗的试验研究

本研究参照球虫虫苗研究的有关资料，通过对E．tenella，E．maxia，E．acernulina长春株早熟选育，研制出鸡球虫早熟弱毒疫苗。在实验室免疫效果观察的基础上，阐述了免疫保护的效果。

柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)早熟株的选育及其生物学特性的研究

本研究对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)北京株进行10代早熟选育,获得早熟弱毒株,对其生物学特性研究证实:该早熟株潜隐期为123h,比亲本毒株缩短了21h;内生发育研究发现其第二代裂殖生殖发育较快,第二代裂殖体含裂殖子较少,提前进入配子生殖;该早熟株繁殖能力下降,仅为毒株为24.75%;该早熟株致病性大大下降,经口感染发现剂量为10×10~4/只的早熟株的致病性仅相当于剂量10×10~2/只亲本毒株的致病性;对其免疫原性研究发现;①分别用剂量为1000个卵囊/只的早熟株丝。

鸡球虫病四价五株活疫苗安全性试验

为研究鸡球虫病四价五株活疫苗的安全性,对适宜日龄的无特定病原体(SPF)雏鸡按照推荐免疫剂量进行1次单剂量接种、单剂量重复接种和1次超剂量接种(推荐免疫剂量的10、20、30倍和100倍)试验。通过死亡率、相对增重率(RWG)、肠道(十二指肠、空肠、盲肠)病变记分等主要指标来表示鸡球虫病四价五株活疫苗的安全性。结果显示,100倍超剂量接种,雏鸡死亡率≥80%,1次单剂量接种、单剂量重复接种和10、20、30倍超剂量接种,雏鸡均未死亡,且每组10只鸡里面至少有8只各肠道病变记分≤1.0。本试验结果表明除100倍超剂量外,按其余各组剂量接种对雏鸡都是安全的,本试验为其临床应用提供了科学依据。

鸡球虫疫苗通过专家鉴定

北京农学院段嘉树副教授主持的“鸡球虫病疫苗研制与防治机理研究”,于1995年7月20日在北京通过专家鉴定。本项科研成果的主要内容是:1.首次在国内成功地培育出E.tenella和E.necatri)(早熟弱毒株。2.E.tenella,E.necatrex,E.maxima三种球虫株制成的疫苗具有安全、有效、稳定的特性。3.基于生产场所不同球虫的流行情况的差异、研制出了适用于商品肉鸡的三价苗和适用于肉种鸡的四价苗经30万羽鸡试验证明安全有效。4.

鸡球虫病三价四株活疫苗安全性研究

为了评价鸡球虫病三价四株活疫苗的安全性并为临床试验提供依据,试验按照《兽用生物制品试验研究技术指导原则》将疫苗分别以一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量(20倍)接种雏鸡进行安全性试验,通过死亡率、相对增重率(RWG)、肠道病变记分、肠道病理组织学观察进行结果判定。结果表明:三个接种组鸡均无死亡,十二指肠、空场和盲肠的平均病变记分均≤1.00分;接种组与空白对照组鸡的平均增重除在14,28,35日龄差异显著外(P<0.05),其余日龄均无显著差异(P>0.05);一次单剂量和单剂量重复接种各组绝大多数鸡的十二指肠、空肠和盲肠无明显眼观病变,镜检仅有少量绒毛上皮脱落和少数虫体寄生,一次超剂量接种鸡剖检可见十二指肠分布少量白色结节,空肠和盲肠有少量出血点,镜检发现三个肠段绒毛上皮局部脱落,固有层内有少量虫体寄生。说明该疫苗对鸡的生长性能没有影响,安全性良好。

鸡球虫病四价五株活疫苗的实验室效力研究

为了探究自主研制的四价五株鸡球虫病活疫苗的实验室免疫效力,为临床应用提供科学依据,试验选择1日龄SPF雏鸡530只,设置了不同免疫剂量、日龄、免疫间隔及单次大剂量与两次小剂量、网上平养和地面平养组考察免疫后相对增重率、平均增重、死亡率、肠道病变记分等指标,测定疫苗的最小免疫剂量、最小首免日龄、最短免疫间隔、免疫产生期及免疫持续期、最适接种次数和适用范围。结果表明:当柔嫩艾美耳球虫山西早熟株(E.tenella,PTsx)、堆型艾美耳球虫山西早熟株(E.acervulina,PAsx)、毒害艾美耳球虫山西早熟株(E.necatrix,PNsx)、巨型艾美耳球虫山东和山西早熟株(E.maxima,PMsd和PMsx)的一免/二免剂量分别为≥1000/2000,400/800,200/400,100/200个/只时,免疫攻毒组鸡至少有8只各肠道病变记分均≤1.00分,死亡率≤10.0%,免疫效果良好;首免日龄≥4 d、二免间隔时间≥9 d、二免后攻毒间隔≥10 d、二免后攻毒间隔≥91 d的免疫攻毒组均至少8只鸡各肠道病变记分≤1.00分,死亡率≤10.0%,免疫效果良好;两次小剂量免疫组在死亡率、肠道病变记分方面均优于单次大剂量免疫组,免疫期间网上平养组与地面平养组鸡平均增重差异不显著(P>0.05),相对增重率均≥80.00%,攻毒后两组鸡各肠道平均病变记分均至少有8只鸡各肠道病变记分均≤1.00分,死亡率为0,免疫效果良好。说明PTsx、PAsx、PNsx和PMsd/PMsx最小一免/二免剂量分别为1000/2000,400/800,200/400,100/200个/只;最小首免日龄为4 d,最短二免间隔为9 d,二次免疫产生期为10 d,免疫持续期≥91 d;两次免疫接种方式的效果更好;该球虫疫苗对网上平养和地面平养鸡均适用。