时差成像系统对复苏周期单囊胚移植妊娠结局的影响

目的探讨时差成像系统对复苏周期单囊胚移植妊娠结局的影响。方法选取在本中心接受体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的113个周期,将每周期获得的受精卵随机分配到时差成像系统(实验A组)和桌面培养箱(对照B组)进行卵裂期胚胎培养,囊胚培养全部转入桌面培养箱进行,同一培养系统胚胎同一液滴集合培养,按照受精方式和年龄进行分层,比较两组2PN卵裂率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚形成率、优质囊胚形成率。将集合培养形成的可用囊胚进行冻存,并对第一次复苏周期囊胚移植的妊娠结局进行分析。复苏囊胚来源于时差成像系统的为实验C组(42周期),来源于桌面培养箱的为对照D组(33周期)。结果实验A组和对照B组患者的2PN卵裂率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚形成率、优质囊胚形成率比较,差异无统计学意义。实验C组和对照D组患者的年龄、转化日内膜厚度、流产率比较,差异无统计学意义;但实验C组的临床妊娠率(83.33%vs 60.61%)和着床率(83.33%vs 60.61%)显著高于对照D组(P<0.05)。结论时差成像系统对胚胎发育没有明显不利影响,可能改善复苏周期囊胚移植的临床妊娠结局。

时差成像系统对囊胚培养及妊娠结局的影响

目的探讨时差成像系统(TLI)对囊胚培养及妊娠结局的影响。方法选取2017年1月至2018年12月在本中心接受辅助生殖治疗并行囊胚培养的481例不孕患者为研究对象。根据囊胚培养方式不同分为采用TLI系统进行囊胚培养的TLI组(n=189)和采用传统培养体系培养囊胚的标准培养系统(SI)组(n=292),比较两组患者的一般资料及囊胚形成率、可利用囊胚率和优质囊胚率。TLI组采用形态学评分结合胚胎动态发育参数选择囊胚,SI组根据形态学评分选择囊胚,比较两组囊胚移植后的临床妊娠结局。结果两组患者的一般资料比较无显著性差异(P>0.05)。两组的受精率、2PN卵裂率、囊胚形成率、可利用囊胚率和优质囊胚率比较亦无显著性差异(P>0.05)。TLI组143例患者移植冻融囊胚,SI组217例移植冻融囊胚,两组的移植囊胚质量比较无显著性差异(P>0.05);但TLI组囊胚移植后的临床妊娠率(78.32%vs.68.66%)和着床率(65.63%vs.54.83%)显著高于SI组(P<0.05),两组的流产率比较无显著性差异(P>0.05)。结论采用TLI系统进行囊胚培养,以形态学评分结合胚胎动态发育参数选择囊胚,可以明显改善囊胚移植后的临床妊娠结局。

利用时差成像系统观察囊胚形成时间对临床结局的影响

目的:利用时差成像系统(TLI)观察囊胚形成时间对移植结局的影响。方法:选择2019年4月-2021年10月于本中心行囊胚培养的313例为研究对象,通过TLI观察记录最优质囊胚的形成时间,并分为短时组(<120 h)177例,中时组(120~144h)88例,长时组(>144h)48例,比较冻胚移植后3组临床结局。结果:种植率、临床妊娠率及早期流产率短时组分别为59.32%、58.45%、4.81%;中时组分别为55.68%、55.68%、6.12%;长时组别为35.42%、35.42%、5.88%;短时组与中时组的临床妊娠率和种植率无统计学差异(P>0.05),但均高于长时组(P<0.05),3组的流产率无统计学差异(P>0.05)。结论:通过TLI观察胚胎动态发育时间,选择较快发育成优质囊胚者进行冻胚移植,可以改善移植结局。

时差成像系统对IVF/ICSI周期胚胎发育及移植结局的影响

目的比较时差成像(TLI)系统培养与常规培养胚胎的发育情况及其新鲜胚胎移植的临床结局,探讨TLI系统应用于辅助生殖技术的临床价值。方法回顾性分析2019年1月至2020年12月在我中心行体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)并选择新鲜移植的510个周期的临床资料。按照胚胎培养方式的不同分为TLI组(n=166)和常规组(n=344);常规组通过胚胎形态学评分优选胚胎进行移植,TLI组通过胚胎发育动力学参数及形态学评分优选胚胎进行移植。比较两组的一般资料、胚胎发育情况以及卵裂期胚胎新鲜周期移植的临床妊娠结局。结果(1)两组患者的一般资料比较,TLI组的平均年龄显著小于常规组,获卵数显著高于常规组(P<0.05);其余体质量指数(BMI)、基础FSH等指标均无显著性差异(P>0.05)。两组间受精率、2PN卵裂率、D3可利用胚胎率、卵母细胞利用率、D3优质胚胎率均无显著性差异(P>0.05);TLI组的正常受精率(67.99%vs.62.11%)、囊胚形成率(69.51%vs.65.76%)、可利用囊胚率(43.41%vs.38.86%)及优质囊胚率(28.36%vs.24.36%)均显著高于常规组(P<0.05)。TLI组新鲜周期移植胚胎数显著少于常规组(P<0.05);TLI组临床妊娠率较常规组有升高趋势,双胎妊娠率有下降趋势,但尚无显著性差异(P>0.05)。(2)因两组间年龄、获卵数存在统计学差异,故对数据进行倾向性匹配分析。匹配后两组患者间基线资料比较均无显著性差异(P>0.05);相关结局与匹配前基本一致,TLI组的正常受精率、囊胚形成率、可利用囊胚率、优质囊胚率均显著优于常规组(P<0.05),移植胚胎数显著低于常规组(P<0.05),而两组间胚胎种植率、临床妊娠率、流产率均无显著性差异(P>0.05)。结论TLI系统可显著提高卵子的正常受精率,改善囊胚形成和发育,提高囊胚利用率和优质囊胚率,为优选胚胎选择提供了可靠的依据;通过TLI系统选择胚胎,在减少胚胎移植数量的基础上,保证了稳定的临床妊娠结局。因此,认为通过TLI系统可优选出发育潜能较好的胚胎,为单胚胎移植提供有力支持。

时差成像系统挑选优质胚胎对IVF-ET妊娠结局的改善作用

目的探讨时差成像系统(TLI)挑选优质胚胎对体外授精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法收集本中心2015年8月～2017年5月接受IVF-ET的不孕症患者98例,随机分组,采用TLI动态观察筛查胚胎进行ET的47例常规IVF治疗患者为实验组(A组),同期51例采用传统培养方法的常规IVF治疗患者为对照组(B组),根据形态学标准挑选胚胎进行ET,并比较妊娠结局。此外,再选取53例常规IVF治疗的患者共478枚胚胎,每个周期胚胎随机分为两组,采用TLI集簇培养的胚胎记为C组,微滴单胚胎常规方法培养记为D组,比较两组2PN来源的胚胎培养结果差异。结果实验组(A组)与对照组(B组)的D3优质胚胎率、临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率差异均无统计学意义(P> 0.05);实验组(A组)种植胚胎与未种植胚胎相比,原核消失时间(tPNF),发育至2细胞时间(t2)、2细胞分裂至3细胞持续时间(cc2)、3细胞分裂至4细胞持续时间(s2),差异有统计学意义(P <0.05),发育至3细胞、4细胞、5细胞时间(t3、t4、t5),差异均无统计学意义(P> 0.05)。C组与D组来源于2PN的胚胎,卵裂率、D3优质胚胎率、D3可利用胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论采用TLI挑选优质胚胎安全可行,非侵入性评估能够掌握完整的胚胎发育信息,TLI筛选参数可预测胚胎发育潜能,利于临床选择优质胚胎移植,改善妊娠结局。

时差成像培养系统对IVF和ICSI卵裂期胚胎移植患者临床结局的影响

目的探讨时差成像(TL)培养和常规培养对体外受精(IVF)和卵胞质内单精子注射(ICSI)卵裂期胚胎移植(ET)患者妊娠结局、新生儿结局的影响。方法纳入淮安市妇幼保健院生殖医学科2018年1月至2022年3月间行IVF-ET/ICSI-ET助孕的1148对夫妇作为研究对象,共计1200个周期。其中,TL培养550周期为TL培养组(n=550),常规培养650周期为常规培养组(n=650)。比较两组患者基线资料、妊娠结局和新生儿结局的差异。结果TL培养组患者临床妊娠率、着床率、活产率均显著高于常规培养组(χ^(2)=13.776,P<0.001;χ^(2)=23.663,P<0.001;χ^(2)=6.886,P=0.011),移植胚胎数显著低于常规培养组(χ^(2)=2.845,P=0.005)。两组患者早产率、不良新生儿结局、新生儿体重、畸形率、新生儿性别比均无显著性差异(χ^(2)=0.190,P=0.738;χ^(2)=0.663,P=0.024;t=0.221,P=0.878;χ^(2)=0.615,P=1.148;χ^(2)=0.335,P=0.284)。结论TL培养系统可显著改善IVF-ET/ICSI-ET患者临床妊娠率、着床率和活产率,对新生儿出生结局无不良影响。

应用时差成像培养系统观察早期胚胎的卵裂模式对其发育潜能的影响

目的:通过时差成像系统(TLI)观察早期胚胎的卵裂模式,探讨卵裂模式对早期胚胎发育潜能的影响。方法:回顾性分析2019年1月—2021年7月在中山市博爱医院生殖中心行辅助生殖助孕时通过时差成像系统进行囊胚培养的1318个胚胎的发育情况。依据双原核(2PN)受精卵的卵裂模式分为正常卵裂和异常卵裂,其中异常卵裂包括首次卵裂异常和非首次卵裂异常。分析不同卵裂模式组早期胚胎第3天(D3)的优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率及妊娠率、流产率等妊娠结局。结果:正常卵裂组和异常卵裂组的D3优质胚胎率分别为57.36%和39.47%、囊胚形成率分别为66.33%和36.62%、优质囊胚率分别为60.14%和27.61%,正常卵裂组均显著高于异常卵裂组(P<0.01);正常卵裂组与异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。在异常卵裂组中,首次卵裂异常组的D3优质胚胎率和优质囊胚率分别为34.45%和24.64%,均显著低于非首次卵裂异常组的D3优质胚胎率58.02%和优质囊胚率(37.66%),差异均有统计学意义(P<0.05),在2个异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胚胎的异常卵裂影响早期胚胎的发育潜能,异常卵裂发生的时间越早对胚胎发育影响越大。

时差成像系统在IVF-ET的临床应用进展

时差成像系统(time-lapse imaging,TLI)作为一种新的胚胎选择体系,越来越受到国内、外辅助生殖领域临床医生与胚胎学家的青睐。近年来,TLI应用于体外受精(in vitro fertilization,IVF)中的临床研究也逐渐增多。胚胎学家应用这一系统后不需将胚胎从培养箱中移出即可通过视频图像连续观察其整个动态发育过程,以及获得预测胚胎发育潜能的动力学参数。应用TLI提供的动力学参数结合形态学选择移植胚胎,可以改善胚胎着床率和临床妊娠率。但TLI技术无论从硬件还是软件方面均面临着巨大挑战;另外,TLI系统的安全性亦有待进一步评估。

时差成像培养系统对高频多精受精(≥3PN)发生患者临床结局的改善效果

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中时差成像培养系统(TLS)是否可以提高高频多精受精发生患者首次移植的成功率。方法回顾性分析2017年7月至2019年7月于我院进行新鲜选择性单囊胚移植的IVF-ET患者的临床资料,常规培养箱培养结合第5天传统形态学评分(D5+CM)770例,时差成像培养系统结合第5天动态参数评分(D5+TLS)537例。根据多精受精率不同将不同培养体系患者分为两组:低频组,0~1个≥3PN合子;高频组,2~7个≥3PN合子。比较低频组、高频组患者D5+CM、D5+TLS的一般情况、临床妊娠率和继续妊娠率。结果低频组D5+CM、D5+TLS的女方年龄、获卵数、不孕年限、基础FSH水平和内膜厚度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。低频组D5+CM、D5+TLS的临床妊娠率和继续妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高频组D5+CM、D5+TLS的女方年龄、获卵数、不孕年限、基础FSH水平和内膜厚度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高频组D5+CM的临床妊娠率和继续妊娠率稍低于D5+TLS,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论TLS可能能改善高频多精受精发生患者的临床结局。

时差成像培养系统对小鼠胚胎发育潜能及组蛋白修饰影响的研究

目的评估时差成像培养系统(time-lapse imaging,TLI)对小鼠胚胎发育潜能及组蛋白表观修饰的影响。方法选择SPF级雌性ICR小鼠,促排卵后取成熟MⅡ卵子进行体外受精(in vitro fertilization,IVF),获取成功受精的合子,分别在TLI和常规培养体系(standard incubators,SI)中进行体外培养,记录两组胚胎的2-细胞率、4-细胞率、8-细胞率、桑葚胚率、囊胚率和孵出率。通过Hoechst、OCT4及CDX2抗体进行免疫荧光染色,分别统计囊胚细胞总数、内细胞团数和滋养外胚层细胞数。两组囊胚移植入第2.5天代孕母鼠子宫,统计植入率及活胎率。通过对组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)、组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(H3K9me2)和组蛋白H3第9位赖氨酸乙酰化(H3K9ac)的免疫荧光染色,评估两组胚胎组蛋白表观修饰情况。结果TLI组和SI组的早期胚胎发育情况、内细胞团和滋养外胚层细胞数、植入率和活胎率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。两组囊胚的组蛋白H3K4me3、H3K9me2和H3K9ac的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论利用TLI体外培养不会影响胚胎的发育潜能以及组蛋白修饰。

逆卵裂胚胎的染色体整倍性及移植后的妊娠结局

目的使用时差成像培养系统记录胚胎早期逆卵裂现象,联合胚胎植入前遗传学检测技术评估逆卵裂胚胎的染色体整倍性,探讨胚胎发育早期存在逆卵裂现象的囊胚的临床应用价值。方法选择2021年5月至2022年6月在徐州市妇幼保健院就诊的142个因高龄、反复种植失败和反复自然流产行胚胎植入前遗传学检测的周期,正常受精胚胎1087个,其中达到活检标准的囊胚483枚,利用时差成像培养系统记录达到活检标准的来自正常卵裂(n=407)和逆卵裂(n=76)的囊胚,比较逆卵裂囊胚与正常卵裂囊胚的染色体整倍性及移植后的妊娠结局。结果胚胎早期正常卵裂和逆卵裂形成的囊胚染色体整倍体率和临床妊娠率均无统计学差异(P<0.05)。结论胚胎发育早期出现逆卵裂不影响其染色体整倍性,早期胚胎出现逆卵裂时可行囊胚培养后依据胚胎级别列入可利用胚胎,移植到宫腔后可以获得健康的新生儿。

应用时差成像技术探讨补肾中药对高龄肾气阴两虚体外受精患者治疗结局的影响

目的:应用时差成像技术观察补肾中药对高龄肾气阴两虚体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者胚胎发育时间参数的调控作用。方法:将76例行IVF-ET治疗的高龄肾气阴两虚证患者随机分为中药治疗组和安慰剂组,每组38例,另选取43例因男方因素行IVF治疗者作为正常对照组,观察各组患者肾气阴两虚症候积分变化;获卵数、2pn受精率、优胚率、临床妊娠率;时间参数及卵裂模式。结果:中药治疗组治疗后肾气阴两虚症状明显改善。中药治疗组ICSI 2PN受精率、优胚率均明显高于安慰剂组(P﹤0.05)。在t5时间段中,正常对照组及中药治疗组均明显快于安慰剂组(P﹤0.05,P﹤0.01)。结论:在IVF-ET治疗周期,应用补肾中药能改善高龄IVF-ET患者的肾气阴两虚症状,可能通过降低高龄女性早期胚胎的发育迟缓,纠正异常卵裂的发生,使高龄肾气阴两虚型IVF患者妊娠结局有所改善。

Time-lapse培养与常规培养卵裂期胚胎移植的妊娠及新生儿结局分析

目的比较时差成像(time-lapse,TL)系统培养与常规培养卵裂期胚胎移植的妊娠和新生儿出生结局,评价TL技术的安全性。方法回顾性分析2016年1月至2019年3月在本中心行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗的1999周期临床资料,根据胚胎培养方式,分为time-lapse组(n=871)和常规组(n=1128),比较两组的妊娠和新生儿结局。结果两组移植日内膜、异位妊娠率、早期流产率、晚期流产率、多胎率、早产率、不良新生儿结局、低体质量儿、极低体质量儿、巨大儿、分娩孕周、新生儿体重、畸形率及男女性别比之间差异均无统计学意义(P>0.05);TL组的移植胚胎数明显少于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);TL组的临床妊娠率、着床率、活产率及抱婴回家率明显高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TL培养可改善IVF妊娠结局,对新生儿出生结局无不良影响,该技术是胚胎培养的安全有效方法。

人卵母细胞体外成熟后受精所形成胚胎筛选模式的建立

目的利用时差成像系统(TLI)结合胚胎形态学评估建立一种对人卵母细胞体外成熟(IVM)后受精所形成胚胎的筛选模式,以期为临床实践中选择高发育潜能的IVM胚胎提供参考。方法收集2016年2月至2019年5月于本中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的402枚未成熟卵母细胞进行IVM培养,卵母细胞成熟后行卵胞浆内单精子注射(ICSI)授精。受精后胚胎在TLI系统中观察培养,观察IVM胚胎各种卵裂模式与其形成囊胚潜能的关系,并收集胚胎发育的动力学参数,分析原核消失时间(tPNF),发育至2细胞时间(t2)、3细胞时间(t3)、4细胞时间(t4)、5细胞时间(t5),2细胞发育至3细胞所需时间(cc2)、3细胞发育至4细胞所需时间(s2)这些参数在第3天(D3)IVM胚胎未形成囊胚组(A组,111枚)和形成囊胚组(B组,51枚)之间的差异。结果402枚未成熟卵母细胞进行IVM培养,共有315枚(78.4%)成熟;315枚IVM成熟卵母细胞进行ICSI,正常受精219枚,其中非二倍性卵裂的发生率最高(24.2%),其次为正常卵裂(21.9%)。IVM胚胎中正常卵裂胚胎的囊胚形成能力最高(52.1%),卵裂球碎裂最低(10.0%),发育停滞和非二倍性卵裂胚胎均无囊胚形成。A、B两组的动力学参数tPNF、t2、t3、cc2、s2比较均无显著性差异(P>0.05),t4、t5组间有显著性差异(P<0.05);B组t4、t5的参数值范围分别为(24.6~41.9)h和(26.1~56.9)h,该范围内的IVM胚胎具有更高的囊胚形成能力。利用TLI系统结合胚胎形态学评估建立一种高发育潜能IVM胚胎的筛选模式,验证该模式所选出A级胚胎的囊胚形成率显著高于优选胚胎(64.3%vs.44.0%)(P<0.05)。结论利用TLI系统结合胚胎形态学评估方法建立的针对IVM胚胎的筛选模式可以作为筛选高发育潜能IVM胚胎的有效工具。