铁皮石斛苗床下立体栽培羊肚菌技术及其对土壤理化性质的影响

探讨四川省攀枝花市秋末冬初设施塑料大棚中羊肚菌(Morchella spp.)-铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)立体栽培的可行性,测定在羊肚菌生长过程中的菌丝生长期(M1)、子实体生长期(M2)和采收期(M3)表层土壤的pH、全氮、铵态氮、速效磷、有效钾、有机质、电导率(Electric conductivity,EC)和固体溶解性物质总量(Total dissolved solids,TDS)等。结果表明,与对照组相比,在羊肚菌生长的过程中,试验组不同时期表层土壤的pH和有效钾含量均下降,而速效磷、全氮、铵态氮、EC、TDS和有机质的含量均显著增高,且产量达(1950±180)kg/hm^(2)。

大苞鞘石斛种子快繁体系培养基的筛选

以大苞鞘石斛(Dendrobium wardianum Warner)种子为材料,利用MS培养基为基础培养基,选取2种生长素(NAA、IAA)和2种细胞分裂素(6-BA、KT)进行不同浓度的两两随机组合(NAA+6-BA、NAA+KT、IAA+6-BA和IAA+KT),筛选大苞鞘石斛的最适种子萌发培养基、生根培养基和继代培养基。结果表明,在MS+蔗糖(30 g/L)+马铃薯匀浆(80 g/L)+琼脂粉(7 g/L)+活性炭粉末(0.5 g/L)的基础培养基上,添加NAA(0.9 mg/L)+KT(0.3 mg/L)是大苞鞘石斛种子萌发的最适培养基,添加NAA(0.3 mg/L)+6-BA(0.6 mg/L)是最适生根培养基,添加IAA(0.3 mg/L)+6-BA(0.6 mg/L)是最适继代培养基。可见,大苞鞘石斛在不同生长阶段对植物生长调节剂的种类及浓度的需求存在差异,结果可为大苞鞘石斛的快速繁殖提供科学依据。

春石斛品种Dendrobium Second Love‘Tokimeki’与金钗石斛多糖免疫活性的比较研究

为比较春石斛栽培品种Dendrobium Second Love‘Tokimeki’与金钗石斛的粗多糖、精多糖(除蛋白多糖)和多糖水洗组分(过层析柱分离的水洗组分)的免疫活性差异,分别对昆明小鼠灌胃上述6种不同纯度的多糖,观察其对小鼠脏体指数、迟发性变态反应、抗体积数和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分比与吞噬指数等免疫学指标的影响。结果表明:2种石斛的免疫活性随多糖纯度的提高而增强,纯度最高的多糖水洗组分免疫活性最强,且各指标均显著高于对照。D.Second Love‘Tokimeki’和金钗石斛同等纯度的多糖在胸腺指数、脾脏指数、小鼠耳肿胀率及小鼠抗体积数上均无显著差异,而D.Second Love‘Tokimeki’的3种不同纯度多糖的吞噬指数均达到了与金钗石斛多糖水洗组分无显著差异的水平。综合来看,栽培品种D.Second Love‘Tokimeki’的多糖免疫活性与金钗石斛多糖相近,具有良好的药用开发价值。

NaCl浓度对铁皮石斛次生代谢物的影响

为探索不同浓度的盐胁迫对铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)次生代谢物含量的影响,设置0、50、100、150、200 mmol/L NaCl对铁皮石斛进行盐胁迫处理。结果表明,不同浓度的盐胁迫对铁皮石斛体内次生代谢物含量的影响有所差异,50~100 mmol/L NaCl处理可使铁皮石斛体内类黄酮、氨基酸和总酚等次生代谢物含量明显增加,50 mmol/L NaCl处理可使铁皮石斛体内总多糖含量明显增加,活性成分有效提高,中药材价值极大增强。

铁皮石斛(Dendrobium catenatum)快速繁殖的研究进展——兼论其学名与中名的正误

铁皮石斛是中国长期使用的名贵药用植物。近20年来,该药用植物的研究和生产已取得了显著的进展。本文系根据文献信息和在中国兰科植物种质资源保护中心的多年实验,对铁皮石斛快速繁殖研究的进展做一简要总结和评价。鉴于该种植物的学名和中名在不少文献中存在使用混乱,本文将在命名上和分类上予以澄清。笔者认为铁皮石斛的学名应当用其最早的合法名称Dendrobium catenatum Lindl.,而中名则应当用其最为常用的"铁皮石斛"。

海南石斛与昌江石斛体外抗菌活性实验研究

为探索海南石斛(Dendrobium hainanense)和昌江石斛(Dendrobium changjiangense)不同提取部位的体外抗菌效果,以金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、白色念珠菌为受试菌株,采用倍比稀释法、琼脂平板法对海南石斛和昌江石斛不同部位进行抗菌活性筛选,并考察对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长抑制曲线和电导率变化情况。结果表明,A、E能显著抑制金黄色葡萄球菌的正常生长,A对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(MIC)为2.5 mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为5.0 mg/mL;E对金黄色葡萄球菌MIC和MBC均为2.5 mg/mL;且E极显著增加金黄色葡萄球菌的渗透性。A、C、E显著抑制白色念珠菌的正常生长,F极显著抑制白色念珠菌的正常生长,增加白色念珠菌的渗透性,F对白色念珠菌的MIC和MBC均为1.25 mg/mL。表明海南石斛的乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌有较强抗菌效果,昌江石斛的乙酸乙酯部位对白色念珠菌具有较强抗菌效果,该结论为海南石斛和昌江石斛进一步开发奠定了科学基础。

海南石斛和昌江石斛体内抗菌活性实验研究

目的:探索昌江石斛和海南石斛体内抗菌活性。方法:根据体外抗菌试验结果,选择A、E、F、G的高、中、低浓度考察其对金色葡萄球菌的体内抗菌活性,A、B、C、E、F的高、中、低浓度对白色念珠菌的体内抗菌活性。经过剂量梯度筛选,确定各组分小鼠的LD50;通过观察不同菌液浓度引起小鼠死亡率,确定小鼠的MLD;建立染菌小鼠模型,确定各个药物体内抗菌效果。结果:E、F对感染金黄色葡萄球菌的小鼠具有保护作用;C、E、F对感染白色念珠菌的小鼠具有保护作用。结论:海南石斛和昌江石斛具有一定的体内抗菌活性,值得进一步研究和开发。

铁皮石斛的组织培养及种植技术研究进展

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura)是中国传统名贵中药材,其种子质量轻,自然繁殖率低,野生资源濒临枯竭。以相关研究文献为基础,对铁皮石斛的生物学特性、人工培育技术、栽培影响因素、病虫害防治等方面进行了综述,旨在为铁皮石斛自然资源保护、人工栽培的研究提供参考。

墨兰AP3基因过表达载体构建及遗传转化铁皮石斛

为探讨墨兰(Cymbidium sinense)AP3基因在兰花唇瓣中的功能,基于前期从墨兰转录组中得到的AP3基因序列,通过PCR技术构建墨兰AP3基因过表达载体,利用农杆菌EHA105转化铁皮石斛(Dendrobium officinale)原球茎,建立遗传转化体系。经PCR验证,20棵抗性苗中获得9棵阳性苗,其阳性苗率达45%,成功将墨兰AP3基因导入铁皮石斛。

硅盐对越南石斛组培苗生长发育的影响

以越南石斛(Dendrobium vietnamense Aver.)为植物材料,硅酸钙为外源添加物,筛选最适合添加到越南石斛的原球茎诱导培养基、壮苗生根培养基中的硅酸钙浓度。结果表明,最适合添加到越南石斛原球茎诱导培养基的硅酸钙浓度为0.2 g/L,原球茎诱导率为71.43%;对越南石斛组培苗的防褐化效果最佳的硅酸钙浓度为0.5 g/L;株高生长最多的最佳硅酸钙浓度为0.4 g/L;枝条数最多的硅酸钙浓度为0.3 g/L;叶片数最多的硅酸钙浓度为0.3 g/L;当硅酸钙浓度为0.3~0.5 g/L时,越南石斛生根效果较佳。

昌江石斛内生抗菌活性菌株筛选与鉴定

采用组织块分离法和划线分离法,从昌江石斛(Dendrobium changjiangense)植株体内分离得到内生细菌10株,以大肠埃希菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和白假丝酵母菌(Candida albicans)3株供试指示菌,采用琼脂平板法对分离的昌江石斛内生细菌进行抗菌活性的研究。结果表明,昌江石斛分离到的内生细菌中根部最多,茎部次之,叶部最少,昌江石斛所分离出的10株内生细菌中,有2株对至少1种供试菌有一定的抑菌作用,占总分离菌株的20%,其中C-06菌株对3种指示菌均具有抑菌作用,有1株细菌C-05分别对2种指示菌有抑菌作用。通过细菌16S rRNA基因序列分析,活性菌株分布在芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属。昌江石斛含有丰富的内生菌资源,部分内生菌具有代谢抑菌的特性,可作为新型药物的筛选源,为临床疾病的治疗提供可参考的途径。

2种石斛属植物和小叶石仙桃多糖的组织化学定位

为对不同年龄的铁皮石斛(Dendrobium candidum)、铜皮石斛(D.moniliforme)及石斛伪品-小叶石仙桃(Pholidota chinensis)不同器官中的多糖进行组织化学定位,选择具有较高药用价值的石斛类药用植物和药用部位,确定铁皮石斛的最佳采收期,根据多糖的理化性质,材料经冰冻切片,用改良的高碘酸-席夫试剂(PAS)对多糖进行组织化学定位;结果表明,多糖类物质主要存在茎的薄壁细胞、根的皮层细胞、叶的叶肉细胞中。其总多糖含量有如下顺序:二年生的铁皮石斛茎>铜皮石斛茎≈>小叶石仙桃茎,铁皮石斛根≈铜皮石斛根>小叶石仙桃根,铁皮石斛叶≈小叶石仙桃叶>铜皮石斛叶。另外,在不同的器官中,铜皮石斛的多糖含量呈现“茎≈根>叶”和小叶石仙桃的多糖含量呈现“叶>茎≈>根”的规律,而二年生的铁皮石斛则为“茎>叶>根”。这表明在种间及同种植物的不同器官、不同年龄,其多糖的含量存在差异。而3种兰科植物中,以二年生铁皮石斛茎的多糖含量最高,表明其药用价值也最高。

石斛属植物SRAP反应体系的建立与优化

SRAP标记是一种新的分子标记技术。本研究以霍山石斛总DNA为模板,对石斛SRAP反应体系的重要参数进行优化试验。经过大量重复性实验,建立了一套适用于石斛属植物稳定可靠、重复性强的SRAP反应体系:25μl的反应体系中,模板DNA量30ng、2.5mmol/LMg2+浓度、0.8μmol/L的上下游引物、200μmol/L的dNTPs以及Taq酶1U。该体系的建立为SRAP标记应用于石斛属植物的遗传多样性研究及原植物鉴别奠定了基础。

乐清市铁皮石斛总黄酮含量的测定

[目的]测定乐清市铁皮石斛总黄酮的含量。[方法]以芦丁为对照品,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色,在510 nm波长处用紫外分光光度法测定总黄酮的含量。[结果]芦丁在0.011 1～0.066 7 mg/ml浓度范围内与吸光度呈良好线性关系(R2=0.999 2);样品溶液在12 h之内稳定性良好,RSD值为0.15%;建立的方法重复性良好,其RSD值为3.12%。[结论]该方法简便、准确、稳定,可用于铁皮石斛中总黄酮含量的测定。

流苏石斛的离体快速繁殖

以流苏石斛茎段为外植体进行离体快速繁殖研究。结果显示:茎段诱导芽的适宜培养基为MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+CH0.5g·L-1,芽的诱导率达58.3%;培养基MS+BA4.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+CH0.5g·L-1可促进丛芽的形成,而丛芽增殖的适宜培养基为MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+CH0.5g·L-1,增殖系数达6.23;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,50d后试管苗生根率可达100%。研究还发现,壮苗的适宜培养基为1/2MS+BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+CH0.2g·L-1,丛芽在该培养基上培养75d后,可同时完成增殖与生根程序。

石斛抗氧化和滋阴作用的试验研究

[目的]研究金钗石斛、鼓槌石斛和铁皮石斛的抗氧化和滋阴药效异同,为其临床用药提供一定的科学依据。[方法]采用DPPH.清除率检测法评价其体外抗氧化活性;并采用氢化可的松建立阴虚大鼠模型,用试剂盒法测定血清中的超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力,并计算大鼠体重、进食量以及死亡率,评价石斛滋阴效果。[结果]体外抗氧化试验表明,3种石斛的抗氧化作用强弱为:铁皮石斛>鼓槌石斛>金钗石斛,铁皮石斛与鼓槌石斛抗氧化活性和Vc接近,金钗石斛次之;浙江产铁皮石斛和云南产鼓槌石斛抗氧化效果相当,均优于其他产地的。滋阴试验结果表明,铁皮石斛和鼓槌石斛滋阴作用等同,金钗石斛次之。[结论]铁皮石斛、金钗石斛和鼓槌石斛抗氧化和滋阴有差异,在临床使用时可有选择的使用。

齿瓣石斛提取物体外抗菌作用初步研究

[目的]研究齿瓣石斛的无水甲醇和水提取物的抗菌活性。[方法]采用试管稀释法测定齿瓣石斛无水甲醇和水提取物对11种临床常见的病原菌的MIC及MBC,初步判定其抑菌效果。[结果]无水甲醇和水提取物在体外对7种细菌有不同程度的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌的抑制作用最强,对痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌无明显作用;无水甲醇提取物的抗菌作用强于水提取物。[结论]齿瓣石斛无水甲醇和水提取物对所测试菌种具有良好的体外抗菌作用。

脱落酸处理对铁皮石斛类原球茎体耐脱水性的影响

脱落酸(abscisic,ABA)预处理可以显著提高铁皮石斛(Dendrobiumcandidum)类原球茎体(protocrom-likebodies,PLBs)的耐脱水性,其中以5μmol/L的ABA预处理24h效果最好。经2h快速脱水后,类原球茎体存活率约为对照的10倍,达到50%左右。预处理期间细胞相容性物质含量的研究表明,ABA预处理过程中可溶性总糖、蔗糖、可溶性蛋白质及脯氨酸含量均无明显变化,而可溶性多糖含量明显增加,作者认为可溶性多糖的积累是类原球茎体耐脱水性提高的原因之一。

铁皮石斛组织培养研究进展

铁皮石斛(Dendrobium officinale)是中国的珍贵中药材,目前,铁皮石斛野生资源稀缺,组织培养是铁皮石斛快速繁殖的有效途径。近年来,铁皮石斛组织培养上的研究主要有种子无菌萌发,外植体诱导原球茎发生、增殖与分化,在培养基上生根与壮苗等,大量研究表明,以铁皮石斛茎段为外植体进行组培更易获得试管生根苗。原球茎增殖与分化最适基础培养基是MS,NAA浓度为0.5 mg/L时,铁皮石斛生根率为100%,且长势良好,生长健壮。配以一定的添加物能使之更快形成幼苗。同时,幼苗壮苗以MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基为最佳,茎粗、苗高、叶长,效果最好。但是铁皮石斛组织培养周期长是其快速繁殖中存在的主要问题,对此,建议可以通过遗传变异、单倍体诱导、离体开花授粉等非常规育种方式,快速培育优良品种,或者在进行组织培养研究时,直接以组织培养物替代原药材使用或者生产活性成分等方面进行研究。

铁皮石斛栽培技术概况

铁皮石斛是我国传统中药材,属于国家二类保护药用植物。铁皮石斛植物体内含有丰富的多糖和甘露糖,对人们的健康具有独特的保健与药用价值。文章系统地简述了铁皮石斛的总体发展概况、产业政策、品种选择及种苗组织培养生产,重点讨论了栽培技术要点和种植基地的区域性和安全性以及发展前景和存在问题,并探讨了品种选育、栽培模式、施肥技术、病虫害等因素对铁皮石斛药用价值的影响。结果显示,扩展分布范围并保证种植基地的安全可以提高药材的质量;栽培品种的选育对药材质量也有一定的影响;试管苗工业化生产能够快速的培育出质量优良的品种;光照、基质、施肥、采收等因素都在一定程度上影响栽培品的质量。因此,根据这些理论基础,设计出一整套高效、安全的铁皮石斛种植栽培的模式,可以提高铁皮石斛的品质,并促进整个行业的可持续发展。